猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪博卡病毒多重PCR检测方法的建立

猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪博卡病毒多重PCR检测方法的建立

作者:师大云端图书馆 时间:2018-07-28 分类:硕士论文 喜欢:2988
师大云端图书馆

【摘要】猪流行性腹泻(Porcineepidemicdiarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcineepidemicdiarrheavirus,PEDV)引起的一种高度接触性肠道传染病。感染后,主要引起猪的呕吐、腹泻、食欲下降和脱水,各种年龄的猪均易感染。猪传染性胃肠炎(Transmissiblegastroenteritis,TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(Transmissiblegastroenteritisvirusofswine,TGEV)引起的一种导致猪呕吐、水样腹泻和脱水等主要症状的急性、高度接触性传染病。猪博卡病毒(Porcinebocavirus,PBoV)是2009年新发现的一种细小病毒,属于细小病毒科博卡病毒属。目前已经证实,多种博卡病毒都能够感染并且导致宿主发生急性腹泻。目前的数据表明,PBoV与目前猪的腹泻疫情具有一定的相关性,但是不能证明PBoV是原发性病原或者对其他猪腹泻病毒的爆发起到协同作用。由于TGEV、PEDV这两种病毒临床上呈现出相似的症状,经常会发生混合感染,而PBoV又与腹泻疫情相关。因此,为了评估PBoV对TGEV以及PEDV的流行是否会有加剧的现象,所以需要对这三种病毒进行鉴别诊断。由于临床诊断非常困难,而以往的血清学诊断准确率低,病毒分离诊断方法虽然准确率高,但操作较为复杂。PCR方法较传统检测方法具有快速、特异、灵敏、准确的特点,现今己经广泛应用于动物疫病的鉴别诊断。而多重PCR方法可在同一PCR体系中加入多对引物,可同时对多个目的基因进行扩增。既具有传统PCR方法的优点,又可对同一样品同时检测多种病原,可以达到同步诊断的目的,并且缩短检测时间,减少试剂消耗。为此,本文进行了PEDV、TGEV和PBoV多重PCR检测方法的研究。根据PEDV、TGEV和PBoV的保守基因M、S、NP1分别设计合成了3对特异性引物,成功扩增了这三种基因,在国内首次建立了同时快速鉴别诊断这3种病毒的PCR方法。经过敏感性以及特异性试验,发现本试验方法对PEDV的最高敏感度为20pg,TGEV的最高敏感度为35pg,PBoV的最高敏感度为10pg;并通过对其他几种病毒进行PCR扩增,发现本方法特异性良好,可以应用于临床样品检测。在此基础上,将多重PCR方法与单一PCR方法应用于临床实践中,对2012年送检的120份样品进行了检测(其中90份为腹泻猪粪便样品,30份为健康猪粪便样品)。在90份发病猪样品中,PEDV、TGEV和PBoV的阳性率分别为23.33%、1.11%和22.22%,其中PEDV与PBoV昆合感染的病料有6份,阳性率为6.67%。但在30份健康猪样品中,PBoV的阳性率为16.7%,而PEDV与TGEV的阳性率均为0%。多重PCR方法与单一PCR方法的检测结果一致。上述结果均能证明本文所建立的多重PCR方法灵敏度高、特异性强,可以应用于临床检测。
【作者】焦洋;
【导师】雷治海;张常印;姜焱;
【作者基本信息】南京农业大学,基础兽医学,2013,硕士
【关键词】TGEV;PEDV;PBoV;多重PCR;检测;

【参考文献】
[1]王波.嵌入式网络控制系统的设计与实现[D].天津大学,控制理论与控制工程,2004,硕士.
[2]张锐锋.环保企业的市场行为问题探究[D].天津大学,EMBA,2013,硕士.
[3]李凯.出口伊朗地铁车辆转向架构架疲劳可靠性研究[D].北京交通大学,载运工具运用工程,2013,硕士.
[4]张小密.汉代隐士群体研究[D].西北大学,中国古代文学,2013,硕士.
[5]宋璐.英语专业本科生毕业论文写作现状调查[D].曲阜师范大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[6]肖风.RFID系统中的防碰撞算法及安全认证协议研究[D].北京理工大学,控制科学与工程,2014,硕士.
[7]荆琪.基于EAP切换认证机制的研究[D].西安电子科技大学,密码学,2012,硕士.
[8]苑宁思.网络融资模式纾解中小企业融资难[D].天津大学,工商管理,2013,硕士.
[9]杨丽.智能化挖掘机自主作业过程目标识别及定位技术研究[D].吉林大学,2004.
[10]周英.缺氧诱导因子-1α及其靶基因在新生儿缺氧性肺动脉高压中的作用研究[D].新疆医科大学,外科学(专业学位),2013,博士.
[11]刘英杰,那艳铃.关于城市轨道交通环控系统研究方法的分析与探讨[J].现代城市轨道交通.2004(03)
[12]刘校妍,蒋晓敏,楼燕敏,张丰,杜震洪,刘仁义.基于事件和版本管理的逆基态修正模型[J].浙江大学学报(理学版),2014,04:481-488.
[13]尚丽丽.会见权:辩护律师和受追诉者双重透视[D].扬州大学,法律,2012,硕士.
[14]董俊龙.关联规则和聚类分析在方剂配伍规律研究中的应用[D].东北大学,系统工程,2010,硕士.
[15]姚飞.学者向创业者转型过程释意的多案例研究[J].南开管理评论,2013,01:138-148.
[16]肖微.两类求解随机微分方程的数值方法[D].哈尔滨工业大学,计算数学,2013,硕士.
[17]魏俊龙,李拉普,伊书杰.秦沈客运专线过渡段施工探讨[J].中国铁路.2001(11)
[18]索永利.铁路货运电子商务数据交换基础标准研究[D].西南交通大学,交通运输规划与管理,2014,硕士.
[19]张伟豪.探析高校“考证族”[D].中央民族大学,人类学,2004,硕士.
[20]尤潇.港珠澳大桥节段式沉管隧道路面施工组织研究[D].长安大学,材料工程(专业学位),2013,硕士.
[21]佘焱,张嗣瀛.非线性大系统的分散线性化与分散控制[J].自动化学报,1998,05:11-18.
[22]张璇.房地产项目中建筑策划对建筑设计的影响研究[D].华南理工大学,建筑与土木工程,2014,硕士.
[23]李德君.大气压等离子体射流的产生机理[D].大连理工大学,等离子体物理,2004,硕士.
[24]申学国.枞阳出土商周青铜器研究[D].安徽大学,考古学及博物馆学,2014,硕士.
[25]童军.EVA在输变电工程经济评价中的应用[D].浙江大学,项目管理(专业学位),2012,硕士.
[26]周家彬.广西壮汉族CYP2C19等位基因多态性研究[D].广西医科大学,神经病学(专业学位),2013,硕士.
[27]曹洪其,姜志峰,孙志挥.分布式数据库多层关联规则挖掘算法研究[J].计算机应用,2005,12:142-145.
[28]常洪亮.有限合伙制私募股权基金治理研究[D].首都经济贸易大学,企业管理,2014,硕士.
[29]孟春秀.咬合创伤牙周损伤修复中初级神经元调控机制的初步探讨[D].山东大学,口腔临床医学,2013,硕士.
[30]张铝.主流开源JavaEE框架在电子商务平台中的集成与应用[D].湖北大学,系统分析与集成,2011,硕士.
[31]李清.基于内部控制的管理舞弊影响因素研究[D].杭州电子科技大学,会计学,2013,硕士.
[32]黄凌华.AM公司的订货模型研究[D].西南交通大学,工商管理,2012,硕士.
[33]刘丙昌.模糊测试应用于二进制程序的漏洞发现方法研究[D].厦门大学,计算机软件与理论,2014,硕士.
[34]黄小兵.高分辨率遥感影像建筑物提取方法研究[D].西安科技大学,测绘工程,2014,硕士.
[35]丁磊.基于红外传感的温度检测与传输系统设计[D].安徽大学,电子与通信工程,2014,硕士.
[36]刘凯,李小滨,索南加乐,曾晓辉,段建东,潘忠美.一种新的高压线路保护稳定破坏检测元件[J].电力系统自动化,2009,19:56-60.
[37]周晓勇.流形学习算法研究与应用[D].安徽大学,模式识别与智能系统,2014,硕士.
[38]朱海波.机械传动原理方案智能系统及其评价研究[D].清华大学,机械设计及理论,2002,硕士.
[39]杨晖.日照市某三级医院卵巢恶性肿瘤病例对照研究[D].山东大学,流行病学与卫生统计学,2012,硕士.
[40]肇健.基于矢量控制的电压型PWM整流器的研究与设计[D].东北大学,电力电子与电力传动,2010,硕士.
[41]窦波.关于完善吉林省领导干部公开选拔机制的思考[D].东北师范大学,行政管理,2012,硕士.
[42]贺文风.非金属元素及其化合物知识归纳与题型分析[J].试题与研究,2009,32:28-33.
[43]丁佳丽.20世纪初至抗战前徽州近代教育的发展[D].安徽大学,历史学,2013,硕士.
[44]王冬颖.核三代主泵用螺栓材料综合性能研究[D].大连理工大学,动力工程(专业学位),2013,硕士.
[45]李真.烟台市中等职业学校德育教育现状分析与对策研究[D].鲁东大学,学科教学(专业学位),2013,硕士.
[46]陈茂铨,王根轩,刘术新,白燕远,应俊辉,陈兵红,王东明.合成革主要化学污染物对黄山松生理生态特性的浓度效应研究[J].植物生态学报,2011,01:66-72.
[47]黄佳彬.数据挖掘在实践教学信息网中的研究与应用[D].北方工业大学,软件工程,2014,硕士.
[48]崔雪.研究生科技伦理素养的提升研究[D].渤海大学,科学技术哲学,2013,硕士.
[49]崔鹏.鲜食葡萄新品种‘鄞红’的遗传分析及其生物学特性研究[D].浙江大学,作物学,2012,硕士.
[50]支晗.基于损伤相关性的钢筋混凝土简支梁安全性评价方法研究[D].东北大学,固体力学,2011,硕士.

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