ABA诱导水稻中SAPKs活化及其对Osrbohs的调节

【摘要】植物激素脱落酸(ABA)调节植物多种生长发育过程,包括种子贮藏蛋白的合成、种子耐脱水性与休眠、种子的萌发、幼苗的生长以及调节植物对各种胁迫的反应。当植物受到各种环境胁迫如干旱、高盐和寒冷等时,其体内会合成和积累ABA。SnRK蛋白激酶是广泛存在于植物中的一类Ser/Thr类蛋白激酶,参与植物体内多种信号途径的转导,在植物的抗逆境生理过程中扮演了重要角色。因此阐明ABA信号转导中SnRK的功能具有重要意义。本研究以徐稻4号粳稻品种作为研究对象,研究了水稻基因组中与拟南芥SnRK2.6基因同源的SAPK8～10基因在ABA和H2O2处理下基因表达与激酶活性的变化进程、SAPK8～10激酶的亚细胞定位及其对Osrbohs的关系。主要研究结果如下：外源ABA(100μM)处理水稻叶片1h能显著提高SAPK8-10的激酶活性,但并不影响其基因表达量；外源H2O2(10mM)处理30min能也显著提高SAPK8-10的激酶活性,且早于ABA的激活时间。利用原生质体瞬时表达与瞬时沉默体系和荧光定量PCR技术研究SAPK8-10基因的过表达与基因沉默对水稻NADPH氧化酶基因Osrbohs的影响。结果显示,SAPK8-10基因的过表达与沉默对Osrbohs的转录水平没有明显诱导。利用基因重组技术将SAPK8-10基因的编码序列构建至pXZP008真核瞬时表达载体中,采用PEG融合法转化水稻原生质体细胞,以黄色荧光蛋白基因为报告基因,通过激光共聚焦显微镜观察亚细胞定位。结果显示,SAPK8-10蛋白激酶定位在细胞质与细胞核中。为了进一步探索SAPKs的功能,利用双分子荧光互补实验(BiFC)研究了SAPK8-10与Osrbohs在蛋白水平的互作关系。将SAPK8-10与Osrbohs构建到YFPN和YFPC载体中,基因枪转化洋葱表皮细胞,通过激光共聚焦显微镜观察。结果显示,SAPK10与OsrbohB存在细胞内互作。
【作者】王云飞；
【导师】蒋明义；
【作者基本信息】南京农业大学，细胞生物学，2013，硕士
【关键词】ABA；H2O2；SAPK；Osrboh；亚细胞定位；BiFC；

【参考文献】
[1]于继来,柳焯.交流支路的电气剖分方法(一)普通支路的剖分[J].电力系统自动化,2005,01:22-28.
[2]李智,韩崇昭.混合μ控制器设计算法[J].控制与决策,2001,02:236-238.
[3]郑清.基于JSF和EJB3.0的Web应用研究[D].成都理工大学,计算机技术,2013,硕士.
[4]罗杰鹦,姚冬莲,赵宇.文化图式框架中的研究生公共英语教材改革探析——以浙江工业大学为例[J].浙江工业大学学报(社会科学版),2012,03:342-345.
[5]蒋雷敏,李佶.正交铁芯式可控电抗器性能研究[J].科技创新与应用,2014,29:71.
[6]施永.新型相位噪声测量方法[D].西安电子科技大学,测试计量技术及仪器,2011,硕士.
[7]本报记者张怡.中国宝安遭证监会调查[N].中国证券报,2012-02-28A08.
[8]杨炳儒,樊广佺,陈泓婕.一类基于信息挖掘的智能决策支持系统的结构模型[J].模式识别与人工智能,2003,02:225-229.
[9]段云,国瑶.政治关系、货币政策与债务结构研究[J].南开管理评论,2012,05:84-94.
[10]刘珂.断裂、过渡和以太演绎[D].复旦大学,外国哲学,2012,博士.
[11]唐兴栋.几类Schr(?)dinger方程（系统）的爆破解[D].南京师范大学,应用数学,2014,博士.
[12]刘军华.论联合国安理会改革[D].湘潭大学,国际关系,2003,硕士.
[13]杨佳美.新世纪文学的视觉叙事探究[D].河北大学,文艺学,2014,硕士.
[14]庞尧.阿诺德·伯林特审美参与理论研究[D].广西师范大学,文艺学,2014,硕士.
[15]刘敏.元代戏曲艺人生态研究[D].河北师范大学,中国古代文学,2014,硕士.
[16]翟阳.糖尿病肾病中医证型与CysC、Hcy指标相关性的临床研究[D].黑龙江中医药大学,中医内科学（专业学位）,2013,硕士.
[17]王志刚.低强度微波辐射对兔髂外动脉损伤后再狭窄的影响[D].重庆医科大学,外科学,2004,硕士.
[18]王赞云.群体性事件的预防与乡镇政府治理结构优化研究[D].福建师范大学,行政管理,2012,硕士.
[19]吴珊.“影子银行”对我国货币政策传导机制的影响研究[D].安徽大学,金融学,2014,硕士.
[20]余琳骅.当代建筑悬挑设计策略研究[D].浙江大学,建筑设计及其理论,2012,硕士.
[21]顾婷婷,许敏,赵以军,程凯.温度与CO2浓度升高对集胞藻PCC6803修复UV损伤的关键基因转录量的影响[J].生态学报,2015,09:.
[22]沈嘉喜.儿歌在韩国儿童汉语教学中的作用[D].吉林大学,汉语国际教育（专业学位）,2013,硕士.
[23]史文琦,邵伟民,井文涛,董少军.SDSS中空间知识库系统模型的设计[J].计算机工程,2002,01:84-85+257.
[24]王芳,谢克明,刘建霞.基于群体智能的思维进化算法设计[J].控制与决策,2010,01:145-148.
[25]唐元元.联合IL-5可溶性受体与IL-4突变体对哮喘小鼠气道高反应性及IgE、IFN-γ水平的影响[D].第四军医大学,内科学（专业学位）,2014,硕士.
[26]麦丽谊.一种新型纳米泡造影剂的制备和评价[D].华中科技大学,生物制药工程,2013,硕士.
[27]郝国林.拓扑绝缘体纳米结构的可控生长与表面性能[D].湘潭大学,2013.
[28]文春方.云溪区二、三产业发展战略研究[D].湖南大学,工商管理,2003,硕士.
[29]严秋根.紘华电子基于准时生产的物料管理改进研究[D].兰州大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[30]高露双,王晓明,赵秀海.长白山过渡带红松和鱼鳞云杉径向生长对气候因子的响应[J].植物生态学报,2011,01:27-34.
[31]王婧懿.基于锋面追踪算法的R-M不稳定性数值模拟与定量分析[D].浙江大学,航空宇航推进理论与工程,2012,硕士.
[32]兰兰.过渡金属掺杂二维MoS_2材料的电子结构与磁性质研究[D].哈尔滨理工大学,2015.
[33]叶丽.关于初中生的数学推理能力及其培养[D].华中师范大学,2005.
[34]宋婷婷.Sinoma-jj公司财务控制研究[D].辽宁工程技术大学,企业管理,2012,硕士.
[35]程鹏.分期腹腔镜单侧肾上腺肿瘤切除方案在双侧肾上腺肿瘤的应用价值[D].山东大学,外科学（专业学位）,2013,硕士.
[36]梁敏学.传播技术发展对师生关系影响的研究[D].兰州大学,高等教育学,2013,硕士.
[37]彭诚.货币政策信号与货币政策预期管理研究[D].安徽大学,金融学,2014,硕士.
[38]余文松.电视台播控机房的动力建设[J].现代电视技术.2004(01)
[39]管光富.CQ公司的发展战略研究[D].西北大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[40]潘寿虎.基于虚拟样机水稻田双螺旋式整埂机的研制[D].沈阳理工大学,机械制造及其自动化,2013,硕士.
[41]吕英英,余乐书.可溶性盐辅助法大量合成层数可调石墨烯纳米片粉体[A].中国化学会.中国化学会第29届学术年会摘要集——第37分会：能源纳米科学与技术[C].中国化学会:,2014:1.
[42]杜辉.基于现场总线技术的温室节点开发及控制策略研究[D].浙江工业大学,机械电子工程,2004,硕士.
[43]马瑞松,卢建臣,郭海明,林晓,高鸿钧.石墨烯/六方氮化硼异质结表面结构相变的STM研究[A].中国真空学会.中国真空学会2014学术年会论文摘要集[C].中国真空学会:,2014:1.
[44]周茜茜.回译检测译文质量信度与效度的实证研究[D].扬州大学,外国语言学及应用语言学,2012,硕士.
[45]麦立强,陈丹丹,赵康宁,陈施谕,魏湫龙,陈伟.纳米线电化学储能材料与器件[J].功能材料信息,2014,03:8-23.
[46]傅筱.重症疾病预警与分级技术研究[D].浙江大学,生物医学工程,2013,硕士.
[47]胡俊飞,阮健,李胜,丰章俊.电液高频疲劳试验机的控制系统设计研究[J].浙江工业大学学报,2015,01:58-61.
[48]杨晓丽.不同分布两两NQD序列部分和之和的强大数定律及其应用[D].湖北大学,概率论与数理统计,2012,硕士.
[49]李璟.IPv6无线传感网协议测试关键技术研究[D].南京邮电大学,通信与信息系统,2013,硕士.
[50]马鑫.长沙民歌及其演唱研究[D].武汉音乐学院,音乐与舞蹈学,2013,硕士.