犬流感病毒江苏分离株致病生物学特性研究

【摘要】犬流感病毒(Canineinfluenzavirus,CIV)是新出现的能引起犬严重急性呼吸系统疾病的病原体,对犬的健康构成严重危害。犬作为伴侣动物在人类生活中占据特殊地位,因此犬流感病毒的感染也具有重要的公共卫生意义。禽源CIV是近年来在亚洲地区流行的能够引起犬严重呼吸系统疾病的主要病原。目前我国分离到的CIV绝大多数是禽源H3N2亚型。本实验室先前对禽源H3N2亚型CIV江苏分离株在小鼠上进行的致病性研究显示,A/canine/Jiangsu/06/2010(CIV06)能够对小鼠造成肺外感染并且能够经肠道排出病毒,暗示CIV06很可能具备不同于现已报道的大多数CIV毒株的致病生物学特性。为了研究CIV06对犬的致病性,在已有CIV06对小鼠致病性研究的基础上开展了动物回归实验。感染组采用9只比格犬,鼻内接种10795半数鸡胚感染量(EIDso)的病毒液,对照组接种等量灭菌PBS。感染后第1天犬即出现临床症状,并检测到病毒排出。呼吸系统疾病临床症状计分发现,感染组在感染后第4-6天,临床症状得分达到峰值。PCR检测表明,实验感染犬经呼吸道和消化道途径均可排毒。荧光定量PCR检测表明,病毒RNA在感染犬的多种器官中均可检出,包括心、肝、脾、气管、肺、肾、脑和十二指肠。进一步对这些器官进行组织病理学和免疫组织化学分析发现,除心脏之外,其他组织器官均有明显损伤；抗原染色显示,所有组织器官均出现明显的阳性反应。结果提示,CIV06能够对犬造成肺外感染,引起广泛的组织损伤,该结果与之前报道的其他CIV毒株在致病性方面存在明显差异。为了探讨禽源CIV06是否具备感染禽的能力,将白来航鸡分为3组：感染组20只,鼻内接种0.1mL107EID50的病毒液；接触传播组与对照组各4只,接种等量的灭菌PBS,其中接触传播组与感染组同笼,对照组隔离饲养。结果：整个实验过程中没有观察到任何鸡出现与疾病相关的临床症状,接触传播组和对照组的所有样品病毒RNA检测均为阴性。感染后第1-9天,在感染组口咽拭子中检测到病毒排出。病毒RNA在实验感染鸡的气管、肺、血液、心、胸肌和脾等组织器官中被检出。对气管、肺、心、胸肌和脾进行组织病理学检查发现,仅肺和脾有轻微的病理变化。免疫组织化学分析显示,上述组织均有明显的抗原染色。此外,仅感染组在感染后第7天开始出现血清转化。上述结果表明CIV06能够通过实验接种感染鸡,但是实验感染鸡没有能力感染与之直接接触的健康鸡。总之,禽源犬流感病毒江苏分离株06对犬致病力较强,可造成犬系统性感染,而对鸡没有表现出明显的致病力。本研究为进一步探讨犬流感病毒致病机制奠定了基础。
【作者】曾旭健；
【导师】刘永杰；
【作者基本信息】南京农业大学，预防兽医学，2013，硕士
【关键词】犬流感病毒；H3N2；中国分离株；犬；鸡；致病性；

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