断奶仔猪肝脏与腰大肌糖脂代谢的品种比较及SREBP-1c对GCK的转录调控

【摘要】二花脸猪是分布在我国太湖流域的地方猪种,以性情温顺、高产仔量、高脂肪积累量以及对恶劣环境高耐受力著称。和二花脸猪相比,大白猪作为外来猪种具有生长快速、瘦肉率高等特点,但性格急躁易怒、对恶劣环境耐受力低。葡萄糖激酶(Glucokinase,GK/GCK)是细胞葡萄糖代谢的关键酶,研究断奶二花脸猪和大白猪肝脏与腰大肌GCK转录调控的品种差异对揭示品种对猪葡萄糖代谢的影响有重要意义。试验分析了断奶二花脸猪和大白猪体重等生长指标,检测了血清和组织中的激素、酶活等糖脂代谢指标,同时测定肝脏、腰大肌中糖脂代谢和能量代谢相关基因的mRNA水平,最后利用染色质免疫共沉淀(Chromatinimmunoprecipitation,ChIP)技术检验固醇调节元件结合蛋白-1c(Sterolregulatorelementbindingprotein1c,SREBP-1c)对GCK基因的转录调控。1二花脸猪和大白猪血清、肝脏、腰大肌糖脂代谢相关指标水平仔猪断奶后,每窝各选体重与平均窝重相同的雄性仔猪2头,每个品种选3窝,共6头仔猪。宰前称重,采集血液、肝脏和腰大肌样品。检测血清胆固醇、甘油三酯等指标含量,测定肝脏、腰大肌ATP,ADP,AMP,糖原含量以及GCK的酶活力。结果显示：二花脸猪体长(P<0.01)、体重(P)<0.01)、海马重(P<0.01)、背最长肌重(P<0.01)、腰大肌重(P<0.01)、肝脏重(P<0.01)以及背最长肌重／体重(P<0.01)都极显著地低于大白猪,海马重/体重(P<0.01)极显著地高于大白猪；二花脸猪血清瘦素(P<0.05)和甘油三酯(P<0.05)含量显著高于大白猪,皮质醇(P<0.01)、乳酸(P<0.01)、胆固醇(P<0.01)、高密度脂蛋白(P<0.01)、低密度脂蛋白(P<0.01)和睾酮(P<0.01)含量极显著地高于大白猪；二花脸猪肝糖原含量(P<0.05)显著高于大白猪,AMP含量(P<0.05)显著低于大白猪。其它指标没有显著差异。结果提示,二花脸猪、大白猪肝脏与腰大肌糖脂能量存在显著差异。2二花脸猪和大白猪肝脏、腰大肌糖脂代谢基因mRNA水平及SREBP-1c对GCK的转录调控试验检测了二花脸猪、大白猪肝脏、腰大肌线粒体氧化磷酸化基因和糖脂代谢基因的mRNA水平,最后利用ChIP技术检验SREBP-lc能否调控肝脏和腰大肌GCK的转录。结果显示,二花脸腰大肌低密度脂蛋白受体(Lowdensitylipoproteinreceptor,LDLR)(P<0.01)的mRNA水平极显著地高于大白猪,肝脏细胞色素C氧化酶亚基IIICytochromecoxidasesubunitIII,COX3)(P<0.05)的mRNA水平显著低于大白猪,肝脏SREBP-1(P<0.01)和GCK(P<0.01)的mRNA水平极显著地高于大白猪,SREBP-1c(P<0.05)mRNA水平显著高于大白猪；二花脸猪腰大肌SREBP-1c(P<0.05)和GCK(P<0.05)mRNA水平显著高于大白猪；但SREBP-1c蛋白结合在GCK近端启动子区域的含量在两品种猪肝脏和腰大肌均未发现差异。以上结果提示,GCK基因可能是导致二花脸猪和大白猪肝脏和腰大肌能量代谢差异的原因之一,但转录因子SREBP-1c可能未参与对GCK基因的转录调控。
【作者】杜会堂；
【导师】赵茹茜；
【作者基本信息】南京农业大学，基础兽医学，2013，硕士
【关键词】断奶仔猪；品种差异；糖脂代谢；SREBP-1c；GCK；

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