脊尾白虾感染白斑综合征病毒的传播途径调查及相关免疫酶变化特征

【摘要】白斑综合征病毒(Whitespotsyndromevirus,WSSV)于1992年在我国台湾首次出现,能够感染多种虾类发生白斑综合征,是一类无包涵体的杆状双链DNA病毒。WSSV毒性高、致病力强,而且分布范围广,感染发病率随虾类养殖业的发展而上升,引起世界范围内养殖虾类的急性、致死性传染病,造成了虾类养殖业的巨大损失,成为限制养殖业发展的主要因素。2007年以来,江苏沿海养殖的脊尾白虾连续发生WSSV感染的暴发性流行性疾病,并且大规模死亡,对地区海水养殖产业和区域经济发展产生了严重影响。本研究在2012年7月份至2013年4月份,对江苏省沿海脊尾白虾养殖密集地区进行了WSSV感染的流行病学调查,对养殖环境中可能感染WSSV并对其进行水平传播的浮游动植物、底泥、野生虾蟹、脊尾白虾及投喂的冰鲜生物饵料等媒介进行调查分析,采用nest-PCR方法对所采集样品进行WSSV检测。调查发现,采集到的脊尾白虾虾样中80%可检测出WSSV,且发病虾塘出现大规模死虾现象,出现由某一地区先发生,再向邻近方向发展蔓延的特征；2012年9月份和10月份脊尾白虾的发病率和死亡率高于其他月份。环境中的鲜活虾样、浮游动植物、底泥、野生虾蟹及投喂的冰鲜生物饵料等是脊尾白虾发生WSSV感染的重要水平传播媒介,其中蟹类样品的WSSV阳性检出率较高,冰鲜生物饵料、桡足类和藻类也有一定比例的样品携带WSSV,野生虾蟹中也可检出WSSV。调查结果表明,蟹类、冰鲜生物饵料以及发病的脊尾白虾在WSSV感染脊尾白虾的水平传播过程中起着重要作用,桡足及浮游微藻的作用也不可忽视,底泥和水样在WSSV传播过程中的作用有待深入研究；无论是亲虾、蟹、浮游动物、浮游植物、或冰鲜生物饵料等,如被WSSV亏染后都可能成为脊尾白虾感染WSSV的传播源。对WSSV感染脊尾白虾的垂直传播途径进行了初步调查研究。在2012年6-8月脊尾白虾的抱卵高峰期,分两批采集脊尾白虾抱卵亲虾。在透视显微镜下观察每只亲虾所抱的卵,并进行胚胎发育分期；分别提取亲虾组织和卵中的DNA,采用nest-PCR方法对所采集样品进行WSSV检测。在对脊尾白虾卵、仔虾不同发育阶段的研究中发现,受采集时间的影响,虾卵样品大部分处于囊胚期、原肠期、无节幼体期和溞状幼体期。经WSSVPCR检测,亲虾和虾卵的WSSV阳性检出率分别为53%和33.0%,其中处于囊胚期、原肠期、无节幼体期和溞状幼体期的虾卵,均有部分样品检出WSSV阳性。由于溞状幼体期之前的虾卵未开口摄食,故WSSV无法经口传播,并且可以排除卵表携带WSSV的可能性,因此可以排除虾卵中WSSV来自于外界环境的可能性。调查结果提示,WSSV感染脊尾白虾存在垂直传播途径,WSSV可从脊尾白虾的亲虾通过卵传播给子代,使子代也携带WSSV。对脊尾白虾感染WSSV后肝胰腺中碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化物酶(POD)的活性值研究发现,人工感染WSSV后72h内,脊尾白虾体内ACP、AKP、SOD和POD的活性均具有一定的变化规律和特征：四种免疫酶均呈显著变化；ACP和AKP分别于36h和48h时达到最大值；SOD和POD分别于60h和6h达到最高值；ACP、AKP、SOD和POD均对WSSV感染敏感,可以为WSSV感染脊尾白虾防控提供技术基础。根据上述调查研究所得到的有关WSSV传播途径的相关结论以及脊尾白虾被感染后体内出现的免疫因子的变化规律,结合江苏沿海地区脊尾白虾养殖情况,提出了针对江苏地区脊尾白虾养殖过程WSSV流行暴发的防控措施,以期遏制WSSV在江苏地区的流行传播,最大限度地消除脊尾白虾感染WSSV的情况。
【作者】李淑；
【导师】费荣梅；万夕和；
【作者基本信息】南京农业大学，预防兽医学，2013，硕士
【关键词】脊尾白虾；白斑综合征病毒；传播途径调查；免疫酶变化特征；防控措施；

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