柿叶多糖的提取分离及其一级结构表征

【摘要】我国柿叶资源丰富,柿叶的药用价值较高,在中国古代就被做为药品使用。柿叶多糖(PPS)是柿叶的主要功能成分之一,有关柿叶多糖的研究还处于初级阶段,本文结合柿叶多糖的抗氧化活性研究了柿叶多糖的最优提取条件,分析了分离纯化后的柿叶多糖一级结构特征,为柿叶多糖高级结构及活性的研究提供理论基础,研究结果如下：柿叶经过粉碎后用热水提取,得到柿叶粗多糖的水溶液,95%乙醇沉淀得到柿叶粗多糖。通过单因素和正交实验确定了提取因素对柿叶多糖得率影响大小为：pH>温度>时间>料液比,各个因素均有极显著性差异。其最佳提取工艺参数为提取温度60℃、提取时间2h、料液比1：30、pH=7,此最优工艺条件下粗多糖得率可达4.6%。将提取出的柿叶粗多糖复溶后运用sevag法脱蛋白,过氧化氢脱色,运用DEAE-52纤维素柱层析进行分离纯化,分别使用超纯水、0.1、0.2、0.5nol/LNaCl洗脱,得到4个柿叶多糖级分：PPS-1、PPS-2、PPS-3、PPS-4,得率分别为5.1%、38.1%、11.2%、4.5%。红外光谱和紫外光谱结果显示柿叶多糖可能是一种含有糖醛酸的糖蛋白。运用糖腈乙酸脂衍生化法对PPS-1、PPS-2、PPS-3、PPS-4进行GC分析,结果表明4个级分组成基本相似,主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、半乳糖组成。运用PMP衍生化法对PPS-1、PPS-2、PPS-3、PPS-4进行HPLC分析,结果表明PPS-1的单糖组成比例为：葡萄糖醛酸：葡萄糖：木糖：半乳糖：阿拉伯糖=0.41：1.49：5.23：1：0.56；PPS-2的单糖组成比例为：鼠李糖：葡萄糖醛酸：半乳糖醛酸：葡萄糖：木糖：半乳糖：阿拉伯糖=0.14：0.21：0.22：0.19：0.68：1：0.47；PPS-3的单糖组成比例为：鼠李糖：葡萄糖醛酸：半乳糖醛酸：葡萄糖：木糖：半乳糖：阿拉伯糖=0.21：0.28：2.01：2.30：1：0.45；PPS-4的单糖组成比例为：鼠李糖：葡萄糖醛酸：半乳糖醛酸：葡萄糖：木糖：半乳糖：阿拉伯糖=0.16：0.22：0.55：0.28：3.58：1：0.59。
【作者】张君岱；
【导师】陈玉琼；
【作者基本信息】华中农业大学，茶学，2014，硕士
【关键词】柿叶多糖；提取条件；分离纯化；一级结构；

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