山羊基因杂合度与体液免疫应答的关系

【摘要】本研究以山羊对羊痘弱毒疫苗免疫反应性为模型,研究基因杂合度对体液免疫应答能力的影响,以此寻求乌骨山羊个体基因杂合度与体液免疫应答能力的关系,并探寻山羊INHβA基因对体液免疫应答的遗传效应,期望为今后山羊的抗病育种提供借鉴。选取186只健康的乌骨山羊接种羊痘弱毒疫苗,采用山羊尾巴内侧皮内接种,每只山羊接种0.5ml。使用羊痘抗体酶联免疫分析试剂盒(试剂盒检测范围：3.5ng/L-120ng/L)测定免疫前和免疫后28天血清中羊痘病毒抗体；提取所有样本的全基因组DNA,选取PGR、GnRHR、FSH/β、LHβ、MclR、Agouti、INHβA、Myf5、AA-NAT,IGF-1、NPY-Y1R基因的13个SNP位点,用PCR-SSCP和PCR-RFLP法对样本进行基因分型。以PGR、GnRHR、FSHβ、LHβ、Mc1R、Agouti、Myf5、AA-NAT、IGF-1、NPY-Y1R基因的12位点来计算每个个体的基因杂合度,分析比较羊痘抗体水平在各杂合度水平间的差异和杂合度与抗体水平的相关性；并且分析INHfβA各基因型间血清中羊痘病毒抗体浓度间的差异、基因的加性效应和显性效应。研究结果显示免疫前和免疫后28天血清中羊痘病毒抗体浓度分别为16.54ng/L和28.27ng/L,后者显著高于前者(p<0.01)；以12个SNP位点中每个位点的基因分型与免疫前、免疫后28天血清中羊痘病毒抗体的浓度和免疫前后血清中抗体的增量均没有显著的差异。以这12个中性位点来计算的个体基因杂合度,分析个体基因杂合度与血清中羊痘抗体增量的相关性。结果表明,免疫后28天羊痘抗体增量随着杂合度的升高而降低,表现为弱的负相关(p>0.05)。在研究群体中,INHβA基因有3种基因型,分别为GG、GH和HH,免疫前和免疫后28天血清中羊痘病毒抗体浓度在这3种基因型间差异均不显著(p>0.05)；但在免疫后病毒抗体增量上,GG型>GH型>HH型,其中GG型比HH型高一倍,两者差异极显著(p<0.01)。表明INHβA基因对羊痘病毒疫苗反应性有显著遗传效应,但是该基因是动物体液免疫应答能力的遗传标记还是主基因还需要做进一步研究。
【作者】项性龙；
【导师】姜勋平；
【作者基本信息】华中农业大学，动物遗传育种与繁殖，2014，硕士
【关键词】基因杂合度；体液免疫应答；羊痘抗体；乌骨山羊；

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