红景天苷对鸡胚肺血管内皮细胞、肺血管平滑肌细胞及心肌细胞中HIF-1α表达的影响

【摘要】肉鸡腹水综合征(AscitesSyndrome,AS),被称为是威胁肉鸡养殖业的主要三大营养代谢疾病之一,21世纪初,全球每年因肉鸡腹水综合征所造成的经济损失大约在10亿美元左右,其中因该病死亡而造成的直接经济损失已达到大约5亿美元。巨额的经济损失加大了各地学者们对肉鸡腹水综合征的研究力度,目前,对于肉鸡腹水综合征的研究主要还是停留在饲养管理的阶段,临床上存在一些诸如氯化钙、利尿剂(如双氢克尿噻)、健脾利水的中草药(如木通、商陆根、苍术、猪苓、谷子、灯心草)、维生素C等主要功效为利尿、抗高压的药物,但治疗效果并不理想。研究表明,肉鸡腹水综合征发病原因是机体系统性缺氧,而机体长时间代偿性缺氧构成了肺动脉重构,肺动脉重构又加剧了肺动脉高压(PulmonaryHypertension,PH)的形成,如此循环最终导致了AS,因此,该病又被学者们称为肺动脉高压综合征(PulmonaryHypertensionSyndrome,PHS)。缺氧诱导因子-1(HIF-1)是机体通过感受缺氧信号,从而传导机体中缺氧信号的一个关键的转录因子。缺氧诱导因子-1,是由HIF-1α与HIF-1β两个亚基组成,在机体中,它作为上游控制缺氧的调节蛋白,研究表明,哺乳动物体内的缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达水平会随着细胞氧浓度下降而升高,导致其下游的调控蛋白大量表达(如内皮素1、促红细胞生成素、内皮生长因子等),从而产生一系列的生理病理变化。研究表明,红景天苷(salidroside,sal)作为传统中药红景天的有效成分之一,具有抗缺氧、抗疲劳、抗辐射、抗衰老等多种药理作用。通过哺乳动物实验及临床观察证实,它的抗缺氧作用十分明显,也同时具有保护哺乳动物心肺血管的作用。基于大量哺乳动物的研究基础上,我们通过建立诱导鸡胚肺血管内皮细胞(PulmonaryvascularEndothelialCells,PVECs)、肺血管平滑肌细胞(PulmonaryArterySmoothMuscleCells,PASMCs)及心肌细胞(Cardiocytes)缺氧的模型,以HIF-1α基因表达水平作为衡量机体缺氧的标准,观察红景天苷对HIF-1α基因在鸡胚PVECs、PASMCs及Cardiocytes中的表达水平,探索红景天苷对缺氧诱导的肉鸡鸡胚中的心血管细胞是否具有良好的保护作用,为红景天苷用于防治肉鸡腹水综合征的治疗奠定良好的理论基础。将原代培养的鸡胚PVECs、PASMCs及Cardiocytes各自分为五组：正常对照组、缺氧+不同剂量红景天苷(sal)处理组(40,80,120μg/ml)、缺氧组(0μg/ml),通过荧光定量PCR检测HIF-1αmRNA的表达量。应用试剂盒对鸡胚肺血管内皮细胞、肺血管平滑肌细胞的培养液进行MDA含量的测定。结果表明,与对照组比较,缺氧可显著提高鸡胚肺血管内皮细胞、肺血管平滑肌细胞及心肌细胞内HIF-1αmRNA的表达量(p<0.05),且缺氧的鸡胚肺血管内皮细胞、肺血管平滑肌细胞的培养液中的MDA的含量均上调(p<0.05);与缺氧组比较,红景天苷能够使鸡胚肺血管内皮细胞、肺血管平滑肌细胞及心肌细胞内HIF-1ααmRNA的表达量明显下降(p<0.05),且不同浓度的红景天苷能够使鸡胚肺血管内皮细胞、肺血管平滑肌细胞培养液中的MDA含量下调(p<0.05)。结论：第一,红景天苷能抑制鸡胚肺血管内皮细胞、肺血管平滑肌细胞及心肌细胞中缺氧诱导因子HIF-1αmRNA的表达水平；第二,红景天苷能降低鸡胚肺血管内皮细胞、肺血管平滑肌细胞缺氧组的培养液中的丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量；第三,通过红景天苷降低缺氧诱导因子HIF-1αmRNA的表达量,进而说明红景天苷具有良好的抗缺氧的作用,从而对处在缺氧状态下的鸡胚肺血管内皮细胞、肺血管平滑肌细胞及心肌细胞具有保护作用。
【作者】赵诗洁；
【导师】李家奎；
【作者基本信息】华中农业大学，临床兽医学，2014，硕士
【关键词】红景天苷；缺氧诱导因子-1α；肺血管内皮细胞；肺血管平滑肌细胞；心肌细胞；鸡胚；

【参考文献】
[1]毕秋实.大型旋回破碎机腔形优化设计及离散元仿真验证[D].吉林大学,机械设计及理论,2014,硕士.
[2]赵蕾.运动神经元病的肛门括约肌肌电图研究[D].北京协和医学院,神经病学,2014,博士.
[3]赵立凯.Q235基体表面SHS反应制备NiAl涂层工艺研究[D].哈尔滨工业大学,材料加工工程,2013,硕士.
[4]戈蕊.毒品犯罪主观构成要件证明问题研究[D].燕山大学,诉讼法学,2013,硕士.
[5]罗丹.分层多孔SnO_2、ZnO纳米结构及其应用研究[D].华中师范大学,凝聚态物理,2013,硕士.
[6]王建平.初中学生自我评价问题研究[D].东北师范大学,教育经济与管理,2012,硕士.
[7]张瑶瑶.基于图像反馈的回转筒物料运动状态控制系统研究[D].湖南大学,控制科学与工程,2012,硕士.
[8]乔舒琪.侬智高跨国崇拜研究[D].广西民族大学,中国少数民族史,2013,硕士.
[9]肖志明.Periostin基因在结肠癌转移和耐药性中的作用及机制的研究[D].中南大学,临床医学,2013,博士.
[10]孟繁禹.外圆纵向磨削表面粗糙度的在线测量研究[D].吉林大学,机械制造及其自动化,2004,硕士.
[11]厉昂.辽宁省农村人力资源开发绩效评价[D].黑龙江八一农垦大学,农村与区域发展,2014,硕士.
[12]付丽茹.中国第三方物流企业客户服务研究[D].首都经济贸易大学,产业经济学,2004,硕士.
[13]翟健秀,刘志惠,韩娜,殷军.五味子对CYP450活性的影响及其机制探讨[J].世界科学技术-中医药现代化,2015,01:52-55.
[14]高雅.稀土化合物纳米结构的可控制备及性能研究[D].安徽大学,应用化学,2014,硕士.
[15]于飞飞.基于煤炭供应链的煤流图方法及应用研究[D].清华大学,动力工程及工程热物理,2013,硕士.
[16]胡坚.促使高中文科生进行数学错题有效订正的策略研究[D].上海师范大学,学科教学（专业学位）,2013,硕士.
[17]邓紫微.国家战略背景下长沙湘江新区建设研究[D].湖南师范大学,人文地理学,2014,硕士.
[18]张祖宜.试论广州珠江钢铁公司营销渠道的重构[D].西北大学,工商管理（专业学位）,2012,硕士.
[19]朱伟悦.探析我国监所检察监督之问题与完善[D].中国政法大学,法律（专业学位）,2014,硕士.
[20]冯超.文化产业与旅游产业融合度研究[D].西安外国语大学,人文地理,2014,硕士.
[21]刘晓菲.基于长时序多源遥感数据的植被覆盖度反演与变化检测研究[D].中国矿业大学,大地测量学与测量工程,2014,硕士.
[22]唐功友,张洪云,李超.具有控制时滞系统的最优无静差正弦扰动抑制[J].控制与决策,2007,07:817-820.
[23]谢琦.观念性理解对策略灵活性的影响机制[D].华东师范大学,发展与教育心理学,2013,硕士.
[24]余秋阳.人工藻类系统对污水中N、P及有机物去除试验研究[D].重庆大学,市政工程,2014,硕士.
[25]长青.某银行企业办公自动化系统的设计与实现[D].吉林大学,软件工程,2014,硕士.
[26]辛静静.金属氢化物的表面改性及应用研究[D].齐鲁工业大学,化学工艺,2014,硕士.
[27]夏菁.智能清扫机器人认知能力的研究[D].东北师范大学,计算机应用技术,2012,硕士.
[28]李化.智能化玉米信息处理系统的设计与构建[D].太原理工大学,2003.
[29]王艳.绿色节能基础上青龙县新民居住宅设计研究[D].燕山大学,设计艺术学,2014,硕士.
[30]于宗飞.盾构掘进过程的三维有限元数值模拟分析[D].天津大学,结构工程,2004,硕士.
[31]王海江.秘密共享及其在数字签名中的应用研究[D].郑州大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[32]孙岩.上海贫困大学生资助机制研究[D].上海交通大学,公共管理,2013,硕士.
[33]曹琴.川东高褶带三叠系深层卤水和温泉的水化学特征及成因[D].中国地质大学（北京）,地下水科学与工程,2014,硕士.
[34]杜湖泽.石蜡烯制备及其对沥青的改性[D].北京化工大学,化学工程与技术,2013,硕士.
[35]张思奇,周淑文,巩志国,董名垂.医疗诊断系统中的数据预处理[J].控制工程,2005,01:33-35+66.
[36]刘段.发现系统在学术研究中的应用研究[D].华中师范大学,情报学,2014,硕士.
[37]刘冬一.基于信息抽取技术的知识搜索系统[D].华中科技大学,通信与信息系统,2013,硕士.
[38]毕昱.荆州楚纪南城大遗址保护区环境敏感性评价及应用[D].华中师范大学,人文地理学,2014,硕士.
[39]李良臣.服务品牌资产消费者视角与市场产出视角关系研究[D].华侨大学,企业管理,2013,硕士.
[40]孙丽娟.语义网络在高中英语词汇教学中的实验研究[D].沈阳师范大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[41]王尧.汽车铝制缸体内壁喷涂装置及工艺研究[D].沈阳工业大学,材料加工工程,2013,硕士.
[42]赵康.季节性放牧对典型草原群落生产力的影响[D].内蒙古大学,草业科学,2014,硕士.
[43]党婕.基于红外成像技术的煤层露头火源反演研究[D].西安科技大学,应用数学,2014,硕士.
[44]岳昊.基于元胞自动机的行人流仿真模型研究[D].北京交通大学,2009.
[45]徐美娟.合作学习在初中英语教学中的应用[D].首都师范大学,学科教学,2013,硕士.
[46]荆磊.东太湖湖滨湿地净化功能的示范研究[D].扬州大学,土壤学,2011,硕士.
[47]吴凡.论软腭与歌唱发声之关系[D].武汉音乐学院,音乐与舞蹈学,2013,硕士.
[48]喻文娟.亚致死损伤副溶血弧菌红外光谱检测技术的建立[D].上海交通大学,食品科学与工程,2013,硕士.
[49]冯云桑.Co-Ce氧化物对Mn/TiO_2系低温脱硝催化剂结构与性能的影响[D].江苏科技大学,材料学,2013,硕士.
[50]王华忠,俞金寿.基于混合SVR-PLS方法的丙烯腈收率软测量建模[J].控制与决策,2005,05:549-552.