小鼠口腔阴道双部位白念珠菌感染模型的构建及不同部位来源白念珠菌的毒力差异研究

小鼠口腔阴道双部位白念珠菌感染模型的构建及不同部位来源白念珠菌的毒力差异研究

作者:师大云端图书馆 时间:2015-07-06 分类:开题报告 喜欢:2314
师大云端图书馆

【摘要】第一章小鼠口腔和阴道双部位念珠菌病模型的构建及其应用第一节小鼠口腔和阴道双部位白念珠菌感染模型的构建目的探索构建小鼠口腔和阴道双部位白念珠菌感染模型的方法。方法设置单独泼尼松龙处理组、单独雌激素处理组以及联合用药组,通过在接种后4天和7天的临床表现、真菌直接镜检、组织真菌载量测定以及组织病理学检查比较三种不同方法的建模效果,选择其中的最佳方案。结果联合用药组小鼠在接种后第4天舌背粘膜表面出现白斑,阴道口红斑、有白色分泌物,双部位真菌镜检均见大量菌丝,双部位可分离较高的真菌载量,可达105~106cfu/g,组织病理学显示粘膜表面有较多菌丝覆盖,部分侵入上皮引起上皮结构破坏以及炎症细胞浸润。接种后第7天上述表现较接种后第4天有所消退。单独使用雌激素或泼尼松龙组的造模效果不及联合用药组。结论(1)泼尼松龙联合雌激素可成功构建小鼠口腔和阴道双部位念珠菌病感染模型;(2)泼尼松龙和雌激素联合用药的造模效果优于单独使用泼尼松龙或雌激素的方法。第二节泼尼松龙联合雌激素构建小鼠口腔和阴道双部位白念珠菌感染模型的动态研究目的观察泼尼松龙联合雌激素构建小鼠口腔和阴道双部位白念珠菌感染模型在不同时间的感染变化情况方法采用泼尼松龙联合雌激素的方法,对接种后1、3、5和7天进行连续观察,观察指标选取小鼠体重变化、口腔临床表现、双部位局部真菌载量以及组织病理学。结果接种后第1天开始,小鼠体重即呈现逐渐下降趋势,在第1-3天下降最为明显。舌背粘膜在接种后第2-3天开始出现白斑,第3-5天最为明显,白斑平均面积接近舌背面积的90%。双部位的菌量自接种后第1天开始上升,第3-5天最高(105~106cfu/g),之后下降。病理学检查显示接种后第1天舌背和阴道管腔中有酵母细胞,少见菌丝侵入上皮,第3-5天舌背可见有较厚菌丝团覆盖,菌丝较长并侵入上皮组织,伴随上皮结构对破坏和炎症细胞浸润。第7天时双部位菌丝明显减少,对上皮的破坏减轻,上皮开始恢复正常。结论泼尼松龙联合雌激素构建的小鼠双部位白念珠菌感染模型在接种后第3-5天最为明显,此后则渐恢复正常。第三节不同糖皮质激素联合雌激素构建不同品系小鼠的口腔和阴道双部位白念珠菌感染模型目的比较不同糖皮质激素联合雌激素构建不同品系小鼠口腔和阴道双部位白念珠菌感染模型的效果差异。方法设置泼尼松龙联合雌激素处理组、可的松联合雌激素处理组以及地塞米松联合雌激素组,通过对两种品系的小鼠接种后不同时间的体重变化以及3天时的组织真菌载量比较三种不同方法的建模效果。结果泼尼松龙联合雌激素组ICR小鼠的体重在接种后1天持续下降至7天,而可的松和地塞米松联合雌激素处理组在第3-5天时体重稳定并有轻度回升。泼尼松龙联合雌激素组真菌载量最高,在此条件下ICR小鼠感染ATCC62342(口腔1.05×106cfu/g,阴道5.50×105cfu/g)后的真菌载量较SC5314高(口腔4.79×10Scfu/g,阴道4.07×105cfu/g),BALB/c小鼠感染ATCC62342(口腔1.92x106cfu/g,阴道1.33×106cfu/g)后的真菌载量亦较SC5314高(口腔7.57×105cfu/g,阴道2.58×105cfu/g)。结论(1)泼尼松龙较可的松和地塞米松造模效果更佳:(2)白念珠菌/TCC62342较SC5314造模效果更好;(3)ICR小鼠和BALB/c小鼠均能成功构建模型,后者真菌载量略高。第四节环磷酰胺和糖皮质激素联合雌激素构建小鼠口腔和阴道双部位白念珠菌感染模型目的比较环磷酰胺和糖皮质激素联合雌激素构建小鼠口腔和阴道双部位白念珠菌感染模型的效果差异。方法设置泼尼松龙联合雌激素处理组、环磷酰胺联合雌激素处理组以及泼尼松龙和环磷酰胺联合雌激素用药组,通过对两种品系的小鼠接种后3天时的体重变化和组织真菌载量比较三种不同方法的建模效果。结果两种品系的小鼠在接种白念珠菌后第3天,体重均出现明显下降(低于接种当天体重的90%),其中BALB/c小鼠下降更为明显,联合用药组小鼠体重甚至不足接种当天的75%。在不同的处理因素中,联合用药组在不同品系小鼠和不同菌株条件下,体重下降均最明显。真菌载量方面,泼尼松龙联合雌激素组、泼尼松龙联合环磷酰胺以及雌激素组真菌载量最高,但后者在接种3天以后小鼠的死亡率较高。结论(1)泼尼松龙较环磷酰胺造模效果更佳;(2)泼尼松龙联合环磷酰胺以及雌激素造模效果亦较好,但该条件下小鼠死亡率较高。第五节小鼠口腔和阴道双部位感染白念珠菌模型的应用初探目的评价小鼠口腔和阴道双部位白念珠菌感染模型在药效学以及免疫学研究方面的应用。方法首先选用ICR小鼠通过泼尼松龙联合雌激素构建双部位感染模型。(1)通过在小鼠饮水中添加一定浓度的氟康唑进行治疗,在接种后第3天和第5天测定双部位的真菌载量,评价治疗效果;(2)在接种后不同时间点采集小鼠的口腔和阴道组织,匀浆后使用Elisa方法测定组织中IL-17和IL-23的含量,观察其感染过程中的动态表达水平。结果(1)接种SC5314的ICR小鼠和BALB/c小鼠经氟康唑治疗3天即出现菌量明显下降,至第5天可完全清除真菌;而接种ATCC62342的两个品系小鼠经氟康唑治疗无效,接种后的菌量变化与未治疗组无差异;(2)在感染建立后,口腔组织中IL-17的表达水平开始升高,以第3~-5天达到高峰,而阴道组织中的IL-17仅在接种后1天升高,此后即恢复正常水平;口腔和阴道双部位中的IL-23含量自感染开始即明显升高,且维持较高的表达水平可达接种后2周。结论本实验构建的小鼠口腔和阴道双部位白念珠菌感染模型可用于药效学及宿主-真菌相互作用等免疫学研究。第二章不同感染部位来源的白念珠菌毒力相关性状研究第一节不同感染部位来源的白念珠菌胞外水解酶毒力研究目的探索不同部位来源白念珠菌胞外水解酶的差异。方法收集64株来自于血液、阴道、口腔和支气管肺泡灌洗的白念珠菌菌株。菌株在YEPD培养基中37℃培养48h。制备1×107CFU/mL的白念珠菌菌悬液,分别取51μl点滴于卵黄培养基、胎牛白蛋白培养基、吐温-80培养基、溶血素培养基表面。前三种常态37℃培养,最后一种培养基在5%C02环境下培养。分别于第5天、5天、10天、2天观察酶活力。结果口腔、阴道来源的白念珠菌产生蛋白酶的能力强于血液来源。血液、口腔来源的白念珠菌产生磷脂酶的能力最强,阴道株最弱。白念珠菌血液株分泌酯酶的能力最强,阴道来源分泌最低。口腔、阴道来源的白念珠菌溶血素分泌能力强于血液来源株。结论不同部位来源的白念珠菌在产生毒力因子蛋白酶、磷脂酶、酯酶和溶血素方面存在着一定的差异。第二节不同感染部位来源的白念珠菌药物敏感性研究目的探索不同部位来源白念珠菌对抗真菌药物敏感性的差异性。方法收集分别来自于血液、阴道、口腔和支气管肺泡灌洗的白念珠菌菌株,参照CLSIM27-A2方案对上述菌株进行药物敏感性实验。实验药物包括两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、特比萘芬、卡泊芬净和米卡芬净。结果两性霉素B对血液、口腔、阴道、支气管肺泡灌洗液来源的64株白念珠菌的MIC50、MIC90分别为0.25μg/ml、0.5μg/ml,0.5μg/ml、1.0μg/ml,0.25μg/ml、0.5μg/ml,0.25μg/ml、0.5μg/ml。伏立康唑对血液、口腔、阴道、支气管肺泡灌洗液来源的白念珠菌的MIC50、MIC90分别为0.03μg/ml、0.03μg/ml,0.125μg/ml、1μg/ml,0.03μg/ml、0.03μg/ml,0.03μg/ml、0.03μg/ml。伊曲康唑对血液、口腔、阴道、支气管肺泡灌洗液来源的白念珠菌的MIC50、MIC90分别为0.03μg/ml、0.03μg/ml,0.06μg/ml、0.125μg/ml,0.06μg/ml、2μg/ml。氟康唑对血液、口腔、阴道、支气管肺泡灌洗液来源的白念珠菌的MIC50、MIC90分别为0.25μg/ml、0.25μg/ml,0.5μg/ml、32μg/ml,1μg/ml、8μg/ml,0.25μg/ml、0.25μg/ml。特比萘芬对血液、口腔、阴道、支气管肺泡灌洗液来源的白念珠菌的MIC50、MIC90分别为0.125μg/ml、0.5μg/ml,0.03μg/ml、0.125μg/ml,0.125μg/ml、4μg/ml,0.03μg/ml、0.125μg/ml。卡泊芬净对血液、口腔、阴道、支气管肺泡灌洗液等来源的64株白念珠菌的MIC50、MIC90分别为0.03μg/ml、0.125μg/ml,0.03μg/ml、0.03μg/ml,0.03μg/ml、0.06μg/ml,0.03μg/ml、0.125μg/ml。米卡芬净对血液、口腔、阴道、支气管肺泡灌洗液等来源的64株白念珠菌的MIC50、MIC90分别为0.03μg/ml、0.03μg/ml,0.03μg/ml、0.03μg/ml,0.03μg/ml、0.03μg/ml,0.03μg/ml、0.03μg/ml。结论不同抗真菌药物对不同部位来源菌株的药物敏感性存在着一定的差异,口腔、阴道来源的白念珠菌相对血液、肺泡灌洗液来源的白念珠菌出现耐药的频率更高。
【作者】王乐;
【导师】刘维达;
【作者基本信息】北京协和医学院,皮肤病与性病学,2014,博士
【关键词】白念珠菌;阴道感染;鼠口;泼尼松龙;载量;真菌感染;药物敏感性;candidiasis;中国医学科学院;卡泊芬净;

【参考文献】
[1]卞姗姗.山东省自主品牌银行CI体系研究[D].山东财经大学,金融学,2012,硕士.
[2]孙铭蔚.从认知语言学角度分析外向型汉语学习词典中文化词的释义状况[D].鲁东大学,汉语国际教育(专业学位),2013,硕士.
[3]陈国彰.广东省ZS市药品质量监督管理信息系统的设计与实现[D].电子科技大学,软件工程(专业学位),2013,硕士.
[4]盛煜.我国农村商业银行效率评价及其影响因素[D].山东大学,金融学,2013,硕士.
[5]陈太明.哈贝马斯“道德证立”逻辑研究[D].山东大学,外国哲学,2014,博士.
[6]刘晓.农村中小金融机构监管问题研究[D].河北经贸大学,金融学,2013,硕士.
[7]刘开勇.梯级水电站短期发电计划研究与应用[D].华中科技大学,系统分析与集成,2013,硕士.
[8]崔金春.我国银行高管薪酬与经营绩效的相关性研究[D].山西财经大学,金融学,2014,硕士.
[9]杨杰.大理白族合院式住宅在现代居住模式下的环境设施研究[D].东华大学,设计艺术学,2004,硕士.
[10]陈安丽.论新民主主义革命理论的创新机制及其启示[D].华东师范大学,马克思主义理论与思想政治教育,2003,硕士.
[11]何孝清.主元分析及在故障传感器数据重构的应用[D].东北大学,控制理论与控制工程,2010,硕士.
[12]饶玲一.尚贤堂研究(1894-1927)[D].复旦大学,专门史,2013,博士.
[13]朱拥建.宽带数字信道化接收机的设计与研制[D].复旦大学,电子与通信工程,2012,硕士.
[14]魏晓磊.氧化石墨烯对蛋白质和DNA的构象和功能的影响[D].天津大学,2013.
[15]陈雪松.桡骨远端骨折不同部位X线灰度测量的对比研究[D].北京中医药大学,中医学,2013,硕士.
[16]李霞.阿司匹林联合双嘧达莫对卒中二级预防疗效与安全性的荟萃分析[D].山东大学,神经病学(专业学位),2013,硕士.
[17]张莉莉.载脂蛋白E的基因多态性与冠心病的关系及对阿托伐他汀调脂消斑的影响[D].第四军医大学,内科学,2004,硕士.
[18]孙彦龙.大规模火电机群送出系统次同步谐振特性与阻尼控制策略研究[D].中国电力科学研究院,电力系统及其自动化,2013,硕士.
[19]宫春燕.图示教学法在初中历史教学中的应用研究[D].山东师范大学,教育,2012,硕士.
[20]屈乾沁.云制造模式下汽车制造企业制造资源组合配置研究[D].北京交通大学,工业工程(专业学位),2013,硕士.
[21]张丹丹.基于SMP机群的层次化编程模型的设计及实现[D].曲阜师范大学,计算机技术(专业学位),2013,硕士.
[22]韩春.西安市城镇化质量及其协调性发展实证研究[D].吉林大学,社会医学与卫生事业管理,2013,硕士.
[23]苏馨.结直肠癌中K-ras基因突变及VEGF表达的临床意义[D].山西医科大学,病理学与病理生理学,2013,硕士.
[24]郭肜.对外汉语初级班新手教师与学生互动的初步考察[D].西安外国语大学,汉语国际教育,2013,硕士.
[25]韩雪莹.虚拟汽车4S店的数字实现与文化研究[D].哈尔滨工业大学,设计学,2014,硕士.
[26]刘辉.阅读任务对大学生词汇附带习得影响的研究[D].沈阳师范大学,外国语言学及应用语言学,2014,硕士.
[27]赵和兵.基于自主学习理论的初中化学学案导学研究[D].广西师范大学,教育(专业学位),2013,硕士.
[28]李潇.以工业炉管离心铸造生产过程监测数据为基础的产品质量早期识别[D].北京化工大学,化学工程与技术,2013,硕士.
[29]刘建科.掺杂对氧化锌电阻特性的影响[D].陕西科技大学,材料物理与化学,2014,博士.
[30]王珏.基于.Net技术的数据多维分析系统[D].北方工业大学,2005.
[31]李甲贵.我国葡萄酒产品差异化策略研究[D].西北农林科技大学,2004.
[32]司瑞.空心板桥拓宽结构受力分析[D].长安大学,桥梁与隧道工程,2013,硕士.
[33]戚东坡.基于软交换技术的区域交换中心的设计与实现[D].西安电子科技大学,交通信息工程及控制,2012,硕士.
[34]徐亚东.探析“梁陈方案”及其对中国现代城市规划实践的影响[D].宁波大学,人文地理学,2014,硕士.
[35]许程明.基于C/S和B/S结构的研究生就业管理信息系统开发[D].西安电子科技大学,信号与信息处理,2003,硕士.
[36]鲍金明.增值税链条“断点”问题分析[D].山东大学,公共管理(专业学位),2012,硕士.
[37]李伟.马克思主义中国化视域中的农民问题研究[D].安徽大学,马克思主义发展史,2013,硕士.
[38]江鉴行.基于MOS数据库的图像质量评价的度量方法[D].安徽大学,电磁场与微波技术,2014,硕士.
[39]孙峰.18例妊娠合并重症胰腺炎患者临床分析[D].大连医科大学,外科学,2012,硕士.
[40]杨欢.自噬在大鼠重症急性胰腺炎肠粘膜屏障中的表达及意义[D].河北医科大学,内科学,2014,硕士.
[41]王海辰.基于J2EE的ERP系统设计与实现[D].电子科技大学,软件工程(专业学位),2012,硕士.
[42]张玲玲.基于HSMM的非侵入式家庭电力负荷分解算法研究[D].太原科技大学,控制理论与控制工程,2014,硕士.
[43]江道灼,申屠刚,李海翔,吴志力,杨贵玉.基础信息的标准化和规范化在智能电网建设中的作用与意义[J].电力系统自动化,2009,20:1-6.
[44]刘花.可转换NIDV不可否认签名方案[D].西南大学,计算数学,2013,硕士.
[45]张颖.酶促氧化制备茶黄素及其性质研究[D].天津科技大学,营养与食品卫生学,2010,硕士.
[46]王德胜.城市温室气体测度的方法与实证研究[D].天津大学,公共管理,2013,硕士.
[47]谷雨.阜阳市返乡农民工创业支持体系研究[D].内蒙古农业大学,农业推广,2013,硕士.
[48]梅庆玲.数据流中频繁项挖掘算法的研究[D].扬州大学,计算机应用技术,2012,硕士.
[49]王雪.延安时期青年知识分子的成长历程及当代价值[D].渤海大学,马克思主义中国化研究,2013,硕士.
[50]王培柱.吉港公司预算管理体系研究[D].吉林大学,会计,2014,硕士.

相关推荐
更多