长链非编码RNA在青少年特发性脊柱侧凸椎旁肌中的表达差异性研究

【摘要】研究背景：特发性脊柱侧凸（IdiopathicScoliosis,IS）是一种发病率高（发病率1-3%）[1],严重影响生命质量的疾病,大约占脊柱侧凸发病总数的80%。根据发病年龄的不同分为婴幼儿特发性脊柱侧凸（InfantileIdiopathicScoliosis,IIS）（0-3岁）、少儿特发性脊柱侧凸（JuvenileIdiopathicScoliosis,JIS）（3-9岁）、青少年特发性脊柱侧凸（AdolescentIdiopathicScoliosis,AIS）（10-16岁）。其中AIS在特发性脊柱侧凸患病人群中占约80%。AIS的病因学尚未明确,目前对其发病机制的描述有多种假说,但都无法很好地解释AIS的发生。已有的研究表明AIS的发生具有明显的遗传倾向[2]。国内外在对其基因组学的、蛋白质组学等方向的大量研究虽己取得一定的成绩,但结论并不一致,无法很好地对AIS的发生、进展做出满意的解释。在对人类庞大的基因信息不断认识之中,别于传统编码蛋白的基因,非编码基因序列逐渐被人们所认识,并开始呈现在一些疾病机制中的重要作用。长链非编码RNA（longnon-codingRNAs,lncRNAs）就是其中的一种,它是真核细胞中一类转录本长度超过200nt的不具有蛋白编码功能RNA分子[3]。目前的研究不断发现lncRNA复杂的作用机制与功能,其通过作为基因信息与其产物之间调控者,对人类的众多疾病的发生发展起着重要作用。本研究以lncRNA为主要研究对象,通过运用基因芯片技术在外周血中所挑选的lncRNA,对其在肌肉组织中进行实时定量PCR检测表达水平,从长链非编码RNA这一新视角进行探索,期待对AIS的发病机制有一些新的认识。研究目的：通过对从AIS外周血中用基因芯片技术所挑选的lncRNA在AIS患者及对照组椎旁肌中表达水平的进行分析,研究lncRNA在椎旁肌中转录水平上的差异性,探讨其可能的发病机制。研究方法：1.通过对4例青少年特发性脊柱侧凸患者以及4例年龄、性别匹配的正常对照人群的外周血。利用gilenthumanlncRNA+mRNAArrayV3.0微阵列芯片技术筛选出有表达水平差异性的并且在功能上可能影响肌肉、骨骼系统的lncRNA。2.通过收集AIS患者（21例）及对照组（4例）的椎旁肌肉,对所筛选出来的lncRNA进行qPCR检测其在椎旁肌中表达水平。研究结果：1.通过基因芯片技术及Pathway分析、GO（Geneontology）分析、及lncRNA和mRNA的共表达网络构建,筛选了ENST00000602322.1、HIT000067310、ENST00000440778.1、ENST00000414894.1、TCONS00028768共5条在AIS患者外周血中存在差异性表达且在功能上与肌肉、骨骼相关的lncRNA。2.在AIS患者及对照组椎旁肌中对所筛选出来的lncRNA进行表达水平的检测,发现在AIS患者中ENST00000602322.1、HIT000067310、ENST00000440778.1、ENST00000414894.1、TCONS00028768共5条lncRNA的表达水平较对照组均有不同程度的降低（P<0.05）；3.在病例组及对照组自身椎旁肌的左侧与右侧的对比中,发现ENST00000602322.1.HIT000067310、ENST00000440778.1、ENST00000414894.1、TCONS00028768共5条lncRNA表达水平无明显差异性（P<0.05）；4.在对AIS患者组通过月经初潮年龄、Risser征分度、Cobb角分组后,发现ENST00000440778.1及TCONS00028768在月经较早组（≤12岁）椎旁肌的表达水平较低（P<0.05）;ENST00000602322.1在骨骼发育较程度较高组（Risser>I）中的表达水平低（P<0.05）。HIT000067310在Cobb角<47的患者中表达水平较低（P<0.05）。研究结论：1.本研究发现ENST00000602322.1、HIT000067310、ENST00000440778.1、ENST00000414894.1、TCONS00028768在AIS患者椎旁肌中的表达水平降低；2.上述lncRNA在AIS患者自身椎旁肌凹凸侧的表达水平不存在差异性；3.在AIS不同的临床表现人群中,上述lncRNA在椎旁肌中的表达水平存在差异性
【作者】杨世伟；
【导师】王以朋；
【作者基本信息】北京协和医学院，临床医学，2014，博士
【关键词】特发性脊柱侧凸；青少年；长链非编码RNA；椎旁肌；

【参考文献】
[1]陈卓.我国上市公司现金股利政策与公司绩效相关性研究[D].湖北工业大学,产业经济学,2014,硕士.
[2]王维华.荧光假单胞菌毒蛋白的分离纯化与松材线虫的无异培养[D].南京林业大学,森林保护学,2004,硕士.
[3]胡国文.角度传感器在边坡监测中的应用研究[D].重庆大学,通信与信息系统,2014,硕士.
[4]张在丽.CYP3A4/5和MDR1基因多态性的HRM检测及与西罗莫司健康人药动学的关系研究[D].复旦大学,药剂学,2012,硕士.
[5]张宁.高校研究生管理系统的设计与实现[D].辽宁科技大学,计算机技术,2012,硕士.
[6]车茂丰.XML与DAM及网络化跨媒体出版[J].出版与印刷,2001,02:10-13.
[7]叶玉辉.基于控制顶点调整的B样条曲面孔洞修补方法[D].杭州电子科技大学,计算机应用技术,2011,硕士.
[8]张莹,耿茂鹏,张庭芳,王艳春,谢水生.模糊控制在半固态镁合金板带双辊连续铸轧系统中的应用[J].冶金自动化,2004,06:65-67.
[9]张刘正.Android系统下软件的自动化测试框架（本地化平台）的研究与实现[D].西南交通大学,软件工程,2012,硕士.
[10]樊蓉.物流配送中车辆调度算法的比较研究[D].南京农业大学,物流工程,2013,硕士.
[11]杜光会.S医院医疗技术对口指导业务发展战略研究[D].西南交通大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[12]石景鹤.拉莫三嗪对癫痫大鼠学习记忆及Bax、Bcl-2表达的影响[D].新乡医学院,儿科学,2012,硕士.
[13]冯雪.政治教育生活化研究[D].河北师范大学,思想政治教育,2012,硕士.
[14]聂鸿刚.全面质量管理在东北煤炭建设工程总公司的应用[D].吉林大学,工商管理,2004,硕士.
[15]谢桂.煤系地层油气资源评价信息系统[D].中国矿业大学,地图学与地理信息系统,2014,硕士.
[16]侯建鲁.从《上海》看横光利一军国主义的坠落[D].四川外国语大学,日语语言文学,2013,硕士.
[17]陈剑雄.抽放射性气体涡旋真空泵主要零件的有限元分析[D].东北大学,机械电子工程,2010,硕士.
[18]周晔,杨天奇.一种基于置信度的异常检测模型与设计[J].计算机仿真,2005,01:167-169.
[19]姜静,梁意文.文件安全性血统的演变方法[J].计算机工程与应用,2005,15:48-50+65.
[20]张小博.胆道感染患者胆汁中病原菌的分布及对药物的敏感性变化分析[D].吉林大学,外科学,2014,硕士.
[21]丁翔.黄土区露天煤矿排土场坡度坡向对植被盖度影响研究[D].中国地质大学（北京）,地质工程,2014,硕士.
[22]忻健,朱景德,王翼飞.网络数据挖掘及其在生物信息学中的应用[J].自然杂志,2004,05:269-273.
[23]梁晓宇.基于Pentacene层厚对C_(60)有机场效应晶体管功能调控的研究[D].天津理工大学,凝聚态物理,2013,硕士.
[24]赵建军,王春莉.2014年国际大电网会议学术动态系列报道大会主题与热点讨论[J].电力系统自动化,2014,23:1-5.
[25]张晓娟.基于CRM的信用卡业务开发和风险控制[D].四川大学,2004.
[26]王国一.基于Alpha波的脑—机接口技术研究[D].东北大学,机械电子工程,2009,硕士.
[27]尹航.功能翻译理论视角下的英语电影片名翻译[D].东北师范大学,英语语言文学,2012,硕士.
[28]连梅.清能集团财务控制优化设计研究[D].中国地质大学（北京）,工商管理,2014,硕士.
[29]赵立宪.豪森药业有限公司销售人员流失问题研究[D].大连理工大学,工商管理（专业学位）,2012,硕士.
[30]杨增杰.腭裂语音声学特性分析及临床应用研究[D].北京协和医学院,外科学（专业学位）,2014,博士.
[31]王淑红.服务业模块化组织设计研究[D].山东财经大学,企业管理,2013,硕士.
[32]周强.基于嵌入式的大功率开关电源[D].广东工业大学,仪器仪表工程（专业学位）,2014,硕士.
[33]胡丽婷.性灵的合奏——一曲真挚而悲凉的歌[D].江西师范大学,美术学,2004,硕士.
[34]张雷.工业企业节能服务采纳影响因素实证研究[D].浙江工商大学,技术经济及管理,2014,硕士.
[35]王亚楠.基于动态平衡计分卡的中外合作办学高校绩效评价研究[D].燕山大学,管理科学与工程,2013,硕士.
[36]杨翌.铁路阔大货物运输安全分析[D].西南交通大学,交通运输工程,2012,硕士.
[37]马永军.丁坝回流尺度控制方法和减少回流淤积的实验研究[D].清华大学,水力学及河流动力学,2003,硕士.
[38]刘丽娟.中国商业银行对外直接投资模式选择研究[D].河北经贸大学,国际贸易学,2014,硕士.
[39]李小钦.海岛居民小气道阻塞危险因素的病例对照研究[D].福建医科大学,内科学,2014,硕士.
[40]安毅.基于GSM网络的分布式数据采集系统[D].大连理工大学,控制理论与控制工程,2004,硕士.
[41]王明慧.无人值守监控系统[D].杭州电子科技大学,电子与通信工程,2013,硕士.
[42]聂伟华,和冠慧,杨玉辰,欧书刚,刘峰,张鹏超.BGP美洲地区地震采集技术的改进[J].石油地球物理勘探,2008,S2:29-32+177+9+8.
[43]王晓萌.食品安全监管对策探究[D].贵州财经大学,行政管理,2013,硕士.
[44]孙玥.论文化遗产保护的公益诉讼制度[D].西北大学,诉讼法学（专业学位）,2014,硕士.
[45]何如.基于凹凸棒为载体的几种光催化剂的制备及其性能研究[D].南京理工大学,2014.
[46]孔恒,王梦恕,张德华.隧道底板隆起的成因、分类与控制[J].中国安全科学学报.2003(01)
[47]张碧云.肌萎缩侧索硬化的磁共振结构与功能成像研究[D].复旦大学,影像医学与核医学,2013,博士.
[48]肖京.复方中药软膏在猪断层皮创面愈合中作用的实验研究[D].郑州大学,整形外科,2013,硕士.
[49]彭亚龙.高考文言文阅读试题比较研究[D].华中师范大学,语文学科教学,2014,硕士.
[50]李月国,邱振民.TSH512/TSH511红外HiFi立体声发射/接收器[J].世界电子元器件.2002(11)