NDRG1基因在宫颈癌细胞及组织中的表达及意义

【摘要】目的观察人类N-myc下游调节基因1（NDRG1）、COX-2及VEGF在宫颈鳞癌组织中的表达及意义；建立稳定转染含NDRG1的宫颈癌SiHa细胞株,探讨NDRG1对SiHa细胞增殖与凋亡的影响及其可能的分子机制，为宫颈鳞癌的诊治和判断预后提供依据。方法应用免疫组织化学方法检测15例正常宫颈组织和80例宫颈癌组织中NDRG1、COX-2及VEGF蛋白的表达情况，并分析其表达与临床病理因素及患者预后的关系；运用Spearman秩相关观察三者蛋白表达的相关性；运用Kaplan-Meier生存曲线分析其表达与患者预后的关系。经脂质体介导将含有NDRG1真核表达质粒转染人宫颈癌SiHa细胞株，采用G418筛选阳性细胞克隆及逆转录聚合酶链式反应法（RT-PCR）、Westernblot；RT-PCR和Westernblot检测阳性细胞克隆COX-2及VEGF表达的改变；噻唑盐（MTT）比色法检测稳定高表达NDRG1的阳性细胞克隆N12的增殖活性；流式细胞仪检测阳性细胞克隆N12的凋亡率。结果（1）80例宫颈鳞癌组织中NDRG1阳性表达率为52.2%，显著低于正常宫颈组织中表达水平（P<0.01）；COX-2与VEGF阳性表达率分别为91.2%及77.5%，显著高于正常宫颈组织中表达水平（P<0.01）；NDRG1、COX-2及VEGF蛋白的阳性表达与宫颈鳞癌患者的年龄及肿瘤大小无关（P>0.05），而与肿瘤组织病理学分级、FIGO分期及淋巴结转移密切相关（P<0.01）。（2）Kaplan-Meier生存分析显示，宫颈鳞癌组织中NDRG1表达阳性者生存期较长，COX-2及VEGF表达阳性者生存期较短。结论(1)宫颈鳞癌组织中NDRG1表达降低，而COX-2及VEGF表达增加，联合检测宫颈鳞癌组织中NDRG1、COX-2及VEGF的表达可能对判断预后具有重要价值。（2）上调SiHa细胞NDRG1表达后，细胞凋亡增加而细胞增殖降低，其作用机制可能与COX-2、VEGF表达下降有关。
【作者】袁冬兰；
【导师】黄沁；
【作者基本信息】苏州大学，妇产科学，2014，硕士
【关键词】N-myc；下游调节基因1；环氧合酶-2；血管内皮生长因子；免疫组化；

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