自噬特异性基因beclin-1在胃癌血管生成拟态中的表达及作用机制

【摘要】目的：研究自噬特异性基因beclin1在胃癌细胞SGC7901体外血管生成拟态(vasculogenicmimicry,VM)形成过程中表达情况及其对VM形成的作用机制。方法：选择未经处理的胃癌SGC7901细胞为空白组，稳定转染beclin1SiRNA结合质粒的胃癌SGC7901细胞为抑制组，转染空质粒的SGC7901细胞为阴性对照组，检测三组细胞饥饿诱导下生存与侵袭能力变化，同时分别在体外三维培养下构建血管生成拟态模型后观察三组细胞血管生成拟态形成（管状结构数目，长度，交点）变化，并检测VM形成前后三组细胞干性基因（c-myc，oct-3/4，sox-2，notch-1）和拟态血管形成调控基因（MMP-2,9，E-cad）的表达变化。结果：胃癌SGC7901体外三维培养构建拟态血管模型，VM形成后beclin-1基因表达水平显著高于VM形成前水平（P<0.05）。当利用RNA干扰技术抑制beclin-1表达后，VM管样结构形成受阻：空白组，阴性对照组及beclin-1抑制组的VM管样结构数目分别为（37.6±4.5，37.8±1.9，15.4±1.1），beclin-1抑制组VM管样结构数目少于其余两组，差异具有统计学意义（P<0.05）。beclin-1抑制组干性基因（c-myc）的表达均较空白组及阴性对照组明显下降，空白组，阴性对照组及beclin-1抑制组基因灰度值为（7475±174.1,7433.3±150.1,3366.3±109.2），差异具有统计学意义（P<0.05）。transwell实验结果也显示：空白组，阴性对照组及beclin-1抑制组侵袭细胞数目分别为（248.0±28.9，232.3±28.0及43.2±16.4），beclin-1抑制后胃癌细胞侵袭能力显著下降，与其余两组相比差异具有统计学意义（P<0.05）。MTT实验结果则显示：在饥饿诱导下beclin-1抑制组胃癌细胞增殖能力较其余两组下降。结论：自噬特异性基因在胃癌血管生成拟态形成过程中高表达，并是VM形成重要的调节因素，其作用机制为通过维持肿瘤细胞内基因的稳定表达，加强饥饿环境下细胞生存及侵袭能力帮助肿瘤VM形成，从而为肿瘤组织提供供氧通道，使其在不利环境下得以生存。
【作者】丁云鹏；
【导师】邢春根；
【作者基本信息】苏州大学，普通外科学，2014，硕士
【关键词】自噬；血管生成拟态（Vasculogenicmimicry,VM）；三维培养；多潜能基因；

【参考文献】
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