P16-D淀粉样多肽促进逆转录病毒感染以及在流感免疫中的应用

P16-D淀粉样多肽促进逆转录病毒感染以及在流感免疫中的应用

作者:师大云端图书馆 时间:2020-12-27 分类:参考文献 喜欢:3683
师大云端图书馆

【摘要】提高基因治疗的效率需要合适的基因载体系统和逐渐发展的用于增强基因转导化合物的使用。逆转录病毒载体使外源基因在宿主细胞内实现稳定、长期的表达而占有很大的优势。病毒与靶细胞表面的负电荷产生的静电斥力大大限制了基因转导的效率。用于增强基因转导的化合物从最初的阳离子化合物Poly-L-lysine等发展至今,商品化的DEAEdextran和polybrene仍被人们广泛应用于基因转导的实验中。最近的研究表明,淀粉样纤维多肽在促进基因转导过程中具有突出的优势,如SEVI和EF-C,已经被人们证实可以提高逆转录病毒基因转导的效率,而且显著强于DEAE和polybrene。最近我们发现合成的HIV-14E10表位多肽P13(Ac-671NWFDITNWLWY-IK683-NH2)及其衍生肽P16(Ac-671NWFDITNWLWYIK683KKK-NH2),P16在P13序列C末端增加三个赖氨酸,也能够形成淀粉样纤维结构促进HIV-1感染,并且效率强于SEVI。对P13和P16促感染机理的研究表明,芳香族氨基酸色氨酸和碱性氨基酸赖氨酸对P16的促感染活性很重要。由它们的作用方式来看,淀粉样纤维和正电性是多肽多聚物行使功能的必要条件。本文的研究主要是在有利于淀粉样纤维结构形成的前提下,对P16序列中的酸性氨基酸–天冬氨酸进行突变或增加序列中碱性氨基酸的数目,以期获得促感染活性更好的多肽。实验中合成的多肽有P16-D、P16-K、P16-N、P16-2W和P16-W3K。对合成的多肽进行MS和HPLC的质量检测无误后,按照P16发挥最佳感染增强效果的条件,即在无血清条件下感染4h后再补加血清或更换为完全培养基,我们对合成的P16衍生肽的促感染活性进行了研究。综合考虑促进病毒感染的效率和细胞毒性两个因素,选用P16-D(Ac-671NWFAITNWLWYIK683K-KK-NH2)为研究对象。病毒感染实验结果表明P16-D与P16增强病毒感染的倍数分别是13.9和7.5,充分说明改造后的P16-D的促感染活性在P16基础上提高将近100%,同时与最适作用浓度DEAE和polybrene相比,促感染过程中细胞存活率分别是90%与80%左右,P16-D对靶细胞的毒性更低。TEM、Tht特异性结合实验及EGCG实验表明P16-D经过低速搅拌形成典型的淀粉样纤维结构,能够有效地捕获靶细胞和病毒颗粒,同时也使病毒颗粒通过简单地低速离心就可以达到浓缩的目的。P16-D淀粉样纤维的促感染活性对HIV-1以外的包膜病毒—流感病毒及FIV载体系统也适用。鉴于P16-D淀粉样多肽也能有效地捕获流感病毒颗粒;在P16-D存在时,流感病毒的血凝效价比不加多肽组提高4倍;流感病毒感染MDCK细胞后,检测上清里的病毒量,加肽组明显高于不加肽组,预示着P16-D淀粉样多肽将在流感病毒免疫中发挥特殊的作用。理想的病毒抗原经免疫后应该既能引起体液免疫,又能引起细胞免疫。考虑到P16-D纤维能够有效地结合流感病毒颗粒,在细胞水平上促进流感病毒的感染,我们选择降低剂量的流感病毒配合P16-D淀粉样纤维一起使用后,经鼻腔接种小鼠后,特异性IgG抗体水平低于正常剂量病毒组,但是分型抗体IgG1的水平比后者要高,IgG2a的水平则与之相当,表明降低剂量的减毒流感病毒配合P16-D淀粉样多肽使用,也能够刺激机体产生有效的免疫应答。综上,P16-D优越的促感染活性预示着它将在逆转录病毒感染和基因治疗中具有广阔的应用前景,同时,它在减毒的流感免疫中的应用不仅帮助人们优化免疫方案,降低生产成本,而且推动了对淀粉样纤维多聚物的深入认识。
【作者】张华艳;
【导师】单亚明;
【作者基本信息】吉林大学,生物化学与分子生物学,2014,硕士
【关键词】基因转导;P16衍生肽;淀粉样纤维;正电性;减毒流感;降低剂量的;免疫应答;

【参考文献】
[1]张青丽.科学发展观视角下的产业结构调整研究[D].西安科技大学,马克思主义理论,2013,硕士.
[2]麦立强,陈丹丹,赵康宁,陈施谕,魏湫龙,陈伟.纳米线电化学储能材料与器件[J].功能材料信息,2014,03:8-23.
[3]尹纪栋.我国养老服务业发展问题的多中心治理研究[D].山东财经大学,社会保障学,2014,硕士.
[4]张倩倩.抗战时期卢斯和《生活》杂志对华报道研究[D].山东大学,新闻学,2013,硕士.
[5]J.F.克雷尔伯特.地球物理资料处理基础[J].石油地球物理勘探,1979,02:113-129.
[6]陈欣欣.河北省企业技术创新政策效果评价研究[D].石家庄经济学院,企业管理,2012,硕士.
[7]刘文霞,刘流,赵天阳.变电站区域充电桩接入控制模式及策略[J].电力系统自动化,2013,16:66-72.
[8]钟秀玉,凌捷.计算机动态取证的数据分析技术研究[J].计算机应用与软件,2004,09:26-27+92.
[9]母美荣.(2+1)-维薛定谔方程的Lie对称、一维优化系统及约化[D].内蒙古大学,应用数学,2014,硕士.
[10]汪晋宇.重庆高速公路服务区功能扩展及管理研究[D].重庆交通大学,工程项目管理,2012,硕士.
[11]刘银泉.基于GTN损伤的铝合金管内高压成形的破裂预测[D].哈尔滨工业大学,材料加工过程,2013,硕士.
[12]王博文.工微所改制为技术中心是产研结合的重要途径[J].上海轻工业.1999(03)
[13]管鑫.喷油规律对双燃料发动机燃烧过程的影响[D].吉林大学,动力工程,2014,硕士.
[14]王琳,赵立峰,程涛,孙淮.热传导系数的分子动力学模拟[A].中国化学会计算机化学专业委员会.第十届全国计算(机)化学学术会议论文摘要集[C].中国化学会计算机化学专业委员会:,2009:1.
[15]张荔.大连电信中高端用户流失案例研究[D].大连理工大学,工商管理(专业学位),2012,硕士.
[16]李蓓蓓.置换在符号空间的实现[D].华中科技大学,基础数学,2013,硕士.
[17]李胜.儿童气管支气管异物的临床研究[D].苏州大学,儿科学,2014,硕士.
[18]薛雪.山东省公立医院管办分开改革研究[D].山东大学,公共管理(专业学位),2013,硕士.
[19]彭涛.GIS视景仿真系统设计与实现[D].大连理工大学,软件与理论,2004,硕士.
[20]孙世杰.体育场上的高科技神器[J].第二课堂(B),2014,Z2:4-10.
[21]岳宗峤.商业银行产品绩效评价研究[D].山东大学,工业工程(专业学位),2012,硕士.
[22]姜霁青.论中国特色社会主义权力运行机制建设[D].福建师范大学,马克思主义理论与思想政治教育,2004,硕士.
[23]陈建梁.基于OPC及EJB的企业生产信息服务平台的研究[D].浙江工业大学,计算机应用技术,2004,硕士.
[24]谭丕强,胡志远,楼狄明,孔桂香,杨辉.非道路用直喷式柴油机排放性能改进[J].农业机械学报.2007(05)
[25]郝德昌.安钢人力资源管理信息系统设计及实施研究[D].南京理工大学,工业工程,2012,硕士.
[26]陈治国.金融自由化进程中的政府角色分析[D].吉林大学,世界经济,2004,硕士.
[27]曾昭敏.子宫内膜息肉99例临床分析[D].广西医科大学,妇产科(专业学位),2013,硕士.
[28]刘丽丽.英语公共演讲中的词汇衔接[D].青岛大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[29]张宇.IP承载网网络管理优化系统的研究与实现[D].吉林大学,软件工程,2013,硕士.
[30]黄丽婧.江苏省生产建设项目水土保持措施研究[D].南京农业大学,农业资源利用,2013,硕士.
[31]陈状.考虑填充墙影响的RC框架连续倒塌分析[D].武汉理工大学,结构工程,2013,硕士.
[32]王建斌.石楼三趾马红土隧道围岩分级与稳定性研究[D].西北大学,地质工程,2014,硕士.
[33]张锦辉.基于Agent的网格计算及其应用技术研究[D].南京航空航天大学,2004.
[34]熊军.富氢气体中CO选择性甲烷化新型催化剂研究[D].华南理工大学,2012.
[35]孙午涵.模块化天气指数保险产品的设计与定价[D].大连理工大学,金融管理,2013,硕士.
[36]吴福朝,胡占义.多平面多视点单应矩阵间的约束[J].自动化学报,2002,05:690-699.
[37]郑潇雨.基于GIS的复杂地形下直升机救援飞行路径优化[D].中国民用航空飞行学院,交通运输规划与管理,2013,硕士.
[38]李志红.水利工程合同管理模式比较研究[D].浙江大学,建筑与土木工程,2004,硕士.
[39]刘康平,朱海萍,李增智.告警关联与故障诊断专家系统研究与实现[J].计算机工程,2002,06:11-12+68.
[40]孙宗智.计算机在问题解答领域中理解自然语言的一个实例——SSH系统[J].自动化学报,1982,04:264-268.
[41]王道勇.论社会关系资源在城市反贫困中的运用[D].河北大学,人口学,2003,硕士.
[42]王磊.论人体活体器官移植的法律规范[D].华中科技大学,法律,2013,硕士.
[43]杨倩.潦而不倒的赫索格——《赫索格》主人公心理研究[D].吉林大学,英语语言文学,2004,硕士.
[44]王莹.西北地区农村学校“学生营养改善计划”实施情况调查研究[D].西北师范大学,教育学原理,2013,硕士.
[45]缪兰.神话与历史的融合[D].湖北大学,英语语言文学,2011,硕士.
[46]贺尔娜.基于NASBA技术检测细菌耐药性方法的建立[D].宁波大学,内科学,2014,硕士.
[47]苏豪.教师文化对教师专业发展影响的研究[D].东北师范大学,高等教育学,2012,硕士.
[48]记者张国栋.“万能材料”石墨烯之困:尚处于产业化实践前期[N].第一财经日报,2014-08-08A14.
[49]田瑞雪.碳量子点表面基团调控及性能的研究[D].中北大学,2014.
[50]王振国.吉20井稠油热采动态监测效果[J].石油地球物理勘探,1995,S2:132-137+182.

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