剂量和给药频率相关的地塞米松诱导的小鼠腭裂发生率差异与凋亡及BMP-2之间的关系

剂量和给药频率相关的地塞米松诱导的小鼠腭裂发生率差异与凋亡及BMP-2之间的关系

作者:师大云端图书馆 时间:2020-12-27 分类:参考文献 喜欢:2893
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【摘要】研究背景:腭裂是我们在临床工作中最常见的颅面先天畸形之一,现如今已被认识到可能是由多种母亲的某些基因及所生活的环境因素所导致的,在世界各地每出生500至2500名新生儿中就有1名患儿出现唇腭裂,致病率达到0,2%-0.04%,这给患儿在日常的进食、与人交流等基本生活方面带来障碍,还会在患儿成长过程中带来极大的心理影响。在近20年的研究报告显示地塞米松是一种导致胚胎畸形较强的药物,但究竟是一次性大剂量给药产生畸形率高还是小剂量多次给药所产生的畸形率高并没有明确的解释。许多国内外学者在研究中发现地塞米松主要作用于腭突间充质细胞,在腭突发育过程中可抑制EPM细胞的增殖,但细胞的凋亡是否也与腭裂的形成存在某种关系尚不清楚,所以本实验通过建立动物模型观察不同剂量地塞米松诱导小鼠致畸率的高低及与细胞凋亡的关系。实验目的:探讨小鼠腭裂与不同剂量地塞米松的关系及在腭裂形成过程中与BMP-2和细胞凋亡的相关性。模型的建立和方法:随机选取生活环境相近并且健康的近交系小鼠,雌雄比例按2:1于晚18:00合笼饲养,所有小鼠均在光照及黑暗时间12h的同样环境下饲养。并于次日早7:30检查雌性小鼠的阴栓,见阴栓之日起为孕0d(0GD),并依次称体重作标记,于10GD上午7:30再依次称体重,若体重显著增加2g以上者可认为妊娠阳性。并取妊娠阳性小鼠随机选取45只分为三组,每组15只放于同笼饲养并做好标记分别为小剂量组于妊娠后11.5d、12.5d、13.5d连续三天腹腔注射6mg/kg地塞米松;大剂量组于妊娠后11.5d腹腔内一次性大剂量注射50mg/kg地塞米松;空白对照组孕鼠在正常情况下饲养,不给予任何特殊处理。所有小组均在14.5d以脱臼法依次处死,每组小孕鼠均在处死后立即放置于冰块上,并剖腹取出胎鼠,并观察各组孕鼠的上颚的大体形态及常规HE染色病理切片、免疫组化、透射电镜扫描。结果:各组小鼠在饲养过程中均未出现疾病或死亡现象。经过肉眼观察可得出小剂量组共怀孕175只孕鼠,其中发生腭裂胎鼠72只,未发生腭裂胎鼠103只,平均体重是0.31克,腭裂发生率是41.14%;大剂量组共怀孕103只,其中发生腭裂的胎鼠63只,未发生腭裂的胎鼠40只,平均体重是0.43克,腭裂发生率是61.17%;空白对照组共怀孕139只,其中发生腭裂的胎鼠是7只,平均体重是0.54克,腭裂发生率是5.04%,三组小鼠称重后之间进行统计学分析小鼠平均体重和腭裂发生率P<0.05,有统计学差异。经HE染色光镜下可看到腭裂胎鼠的上腭正中位置有一条纵行走向边缘不规整的裂隙,分析后可见大剂量组腭裂发生率明显高于小剂量组;经过TUNEL染色观察腭裂小鼠腭突出现大量凋亡细胞,经免疫组化观察三组BMP-2变化可看出不同剂量之间并没有明显差异,但表达情况均较空白对照组表达减少,并且在透射电镜下可见腭裂胎鼠的头部的腭突间充质细胞形态及细胞器结构与空白对照组明显不同。结论:1.一次大剂量注射地塞米松较多次少量注射地塞米松更易导致腭裂的发生。2.剂量依赖性的腭裂发生率变化与腭突间充质细胞的凋亡水平密切相关3.在地塞米松引起的腭裂胎鼠腭突处,BMP-2的表达较正常发育的小鼠明显减少。4.不同剂量地塞米松引起的腭裂腭突的BMP-2的表达未见明显差异。
【作者】陈哲;
【导师】张舵;
【作者基本信息】吉林大学,外科学,2014,硕士
【关键词】地塞米松;腭裂;BMP-2;凋亡;

【参考文献】
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