薇甘菊中黄酮的提取分离及生物活性研究

【摘要】薇甘菊(MikaniaMicrantha)是菊科假泽兰属多年生藤本植物,也称小花蔓泽兰或小花假泽兰。作为一种外来入侵物种,薇甘菊严重破坏生态平衡而被称为“植物杀手”。因此,若能在对其进行综合治理的基础上对其进行有效开发利用则是一个很好的环保措施。对薇甘菊进行营养成分提取和生理活性物质发现就成为开发利用的关键。植物黄酮类化合物具有抗氧化、抑菌、降血脂等作用。研究表明,薇甘菊中含有黄酮在内的多种生物活性物质。然而到目前为止,对薇甘菊中的黄酮类化合物提取、分离纯化以及产品的生物活性研究等未见有系统的报道。本文对薇甘菊中黄酮类物质进行提取及初步分离,并多方面评价其生物活性,以期为薇甘菊的开发利用提供理论参考。主要研究内容及结果如下：1.采用超声波辅助提取薇甘菊不同器官叶、茎中的总黄酮,通过Al(NO3)3—NaNO2-NaOH法定量测定同时进行方法学考察,然后设计正交实验分别优化叶、茎黄酮提取的最佳条件。结果表明：以上方法用于薇甘菊黄酮的提取及定量测定稳定可靠；不同器官中黄酮含量及种类存在差异,带来最优工艺的不同,叶中总黄酮最佳提取条件为乙醇浓度50%、料液比1：30、超声频率50W、超声时间50min；茎中总黄酮最佳提取条件为乙醇浓度60%、料液比1：30、超声功率60W、超声时间40min；叶中黄酮含量(10.62%)约为茎中含量(6.20%)的2倍。2.通过颜色反应及紫外、红外图谱解析对最优工艺下的薇甘菊叶部黄酮提取液进行初步鉴定,推断提取物为黄酮类物质且主要为黄酮及黄酮醇类,然后采用系统溶剂萃取技术对其进行组分化分离,得到组分化提取物库,分别为：石油醚层,乙酸乙酯层,正丁醇层,萃余水层。经定量测定,各层黄酮含量比约为0.1：1：2.5：2。3.分别研究了薇甘菊叶部黄酮组分化提取物(弃去石油醚层)抑菌、清除自由基及体外抑瘤的活性。首先采用打孔法及试管二倍稀释法研究薇甘菊叶部组分化提取物(石油醚层忽略不考虑)对常见致病菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、志贺菌)的抑菌圈及最低抑菌浓度；然后通过三种化学模型(DPPH、羟基以及超氧阴离子自由基)来综合评价薇甘菊组分化提取物清除自由基活性；最后借助MTT法,选取人肺癌A549肿瘤细胞株,研究薇甘菊叶部黄酮组分化提取物体外抑瘤活性。结果表明,薇甘菊叶部黄酮组分化提取物均表现出显著的生物活性且存在一定的量效关系,可以用于天然抑菌剂、抗氧化剂、抑瘤药物的筛选。但是,不同萃取部位的生物活性存在差异,尤其以乙酸乙酯层生物活性最佳。4.通过建立小鼠高血脂症模型观察薇甘菊叶的黄酮提取液对小鼠血脂及健康的影响。结果表明：薇甘菊叶部黄酮提取液对于TC、TG、LDL-C及HDL-C均有一定的调节作用,对TG、HDL-C指标的调节作用更为显著；在调节血脂的同时,对于小鼠肝脏具有一定的保护作用。
【作者】张敏；
【导师】韩雅莉；
【作者基本信息】广东工业大学，生物化工，2014，硕士
【关键词】薇甘菊黄酮；提取；组分化；抑菌；清除自由基；抑瘤；降血脂；

【参考文献】
[1]陈小鑫.抗氧化剂原花色素对蘑菇酪氨酸酶活性的影响及机理研究[D].厦门大学,生物化学与分子生物学,2014,硕士.
[2]徐秀英.奇美电子公司中层管理者绩效管理体系优化研究[D].湖南大学,工商管理,2014,硕士.
[3]朱宏佳.重庆动步公园使用行为与空间环境的关系研究[D].重庆大学,城市规划与设计,2014,硕士.
[4]苗会,张翼,龙哲,冯占闯,刘彩明,黄名宗.接触面应力强度对微动裂纹萌生特性的影响[J].润滑与密封,2014,12:110-113.
[5]陶利江.抗战时期董必武统一战线思想与实践研究[D].吉林大学,中共党史,2013,硕士.
[6]王鹏.苝修饰钛氧功能材料的合成与组装[D].苏州大学,2014.
[7]刘超.安迪·穆雷硬地网球突破的技战术运用分析[D].北京体育大学,体育教育训练学,2013,硕士.
[8]蔡恒冰.日本ISDN从窄带向宽带的演变[J].现代电信科技.1994(05)
[9]张鸿飞.单片机控制同步器综合试验台研究[D].吉林大学,车辆工程,2013,硕士.
[10]司徒万德.毫火针配合康复训练治疗肱骨外上髁炎的临床观察[D].南方医科大学,中西医结合临床,2014,博士.
[11]李湘宜.非营利艺术表演团体社会导向研究[D].上海大学,艺术学,2013,硕士.
[12]贺娜.北碚创新点亮科技之城[N].重庆日报,2013-12-26010.
[13]邱小东.跨国银行在中国新设投资和并购比较研究[D].江西财经大学,金融学,2004,硕士.
[14]孙荣富,程林,孙元章.基于恶劣气候条件的停运率建模及电网充裕度评估[J].电力系统自动化,2009,13:7-12+88.
[15]刘泽海.中国上市公司关联交易法律问题研究[D].北方工业大学,经济法学,2004,硕士.
[16]姜涛.长江上游地区产业空间演进研究[D].重庆工商大学,区域经济学,2014,硕士.
[17]任力,侯泽照.供水企业信息系统建设探索[J].给水排水,2003,01:85-88.
[18]胡玉嫺.通络法—叶天士治疗中风特点及现代发展研究[D].广州中医药大学,中医临床基础,2013,硕士.
[19]郭海明,刘昆雄.数字图书馆个性化服务方式综述[J].津图学刊,2003,06:33-36.
[20]成煜民.高分子量聚丙烯腈纺丝液的流变“历史效应”及其工艺条件的研究[D].北京化工大学,材料科学与工程,2013,硕士.
[21]张硕.考虑地表覆盖的气温遥感估算及对空间插值数据的改进[D].首都师范大学,地图学与地理信息系统,2014,硕士.
[22]曲佳.南海局部海洋沉积物中真菌多样性及产酶活性初步研究[D].陕西理工学院,植物学,2014,硕士.
[23]陈亚慧.建国初期广州市工矿企业民主改革运动研究[D].中共广东省委党校,中共党史,2013,硕士.
[24]李丽肖.基于沪深300的股指期货定价与实证分析研究[D].南京理工大学,金融学,2013,硕士.
[25]邢效瑞.榆耳（Gloeostereum incarnatum）发酵产物的抗菌及免疫增强作用研究[D].吉林农业大学,预防兽医学,2012,硕士.
[26]郭继峰,高存臣.滞后离散广义不确定系统的变结构控制[J].控制与决策,2007,01:95-99.
[27]邓立博.MANET入侵检测系统研究与实现[D].哈尔滨工程大学,计算机技术（专业学位）,2012,硕士.
[28]何伟.基于ANSYS/LS-DYNA的船舶与冰碰撞分析研究[D].大连海事大学,航海科学与技术,2013,硕士.
[29]刘涛.RT-PCR检测非小细胞肺癌外周血LUNX和MAGE-1基因的表达及意义[D].广西医科大学,心胸外科学,2013,硕士.
[30]陈立江.蓓萨罗丁纳米混悬剂释药系统的构建与评价[D].山东大学,天然药物化学,2014,博士.
[31]王卉.玩家身份“同质异构”现象的分析与设计研究[D].华中师范大学,设计学,2014,硕士.
[32]钟文华.幼儿园集体教学活动中教具的运用研究[D].湖南师范大学,学前教育（专业学位）,2014,硕士.
[33]彭坤.基于聚合物光纤液体折射率的测量研究[D].吉林大学,光学,2013,硕士.
[34]席裕庚,耿晓军.连续非线性系统预测控制的次优性分析[J].自动化学报,1999,05:673-676.
[35]李纹,穆文英,崔宝同.切换非线性系统的分布式模型预测控制[J].控制与决策,2014,04:599-604.
[36]杨红菊.关联规则挖掘算法研究[D].山西大学,计算机软件与理论,2004,硕士.
[37]唐萍.城轨交通再生制动仿真计算与逆变回馈式节能方案研究[D].华中科技大学,电力系统及其自动化,2013,硕士.
[38]汪震龙.基于复杂系统动态贝叶斯模型的我国上市公司资本结构影响因素的研究[D].厦门大学,统计学,2014,硕士.
[39]孙玉生.军区科技论文管理系统的设计与安全性研究[D].东北大学,计算机技术,2011,硕士.
[40]刘秉峰.YHFT-Matrix编译器向量化技术的研究与实现[D].国防科学技术大学,软件工程,2013,硕士.
[41]秦光明.Cyclin E和Bcl-2在直肠癌中的表达及意义[D].兰州大学,内科学,2013,硕士.
[42]冯雪.电针结合刺血方法治疗三叉神经痛的临床观察[D].黑龙江中医药大学,针灸推拿学（专业学位）,2013,硕士.
[43]杨素会.幼儿园美术材料投放的个案研究[D].湖南师范大学,学前教育学,2013,硕士.
[44]刘志飞.大黄鱼follistatin基因时空表达分析[D].宁波大学,生物化学与分子生物学,2014,硕士.
[45]刘元新.快速冷冻与慢速冷冻对复合组织血管内皮生物活性的影响[D].辽宁医学院,外科学,2012,硕士.
[46]张红军.某药店管理系统的设计与实现[D].厦门大学,软件工程,2014,硕士.
[47]夏鹏.武汉CJ土地整理储备分中心薪酬体系再设计[D].华中科技大学,工商管理,2013,硕士.
[48]乔江.面向服务的企业应用集成在“南京油运”中的研究与应用[D].南京航空航天大学,计算机应用技术,2004,硕士.
[49]程志君.TiO_2氧缺陷退火机制的研究[D].上海理工大学,凝聚态物理学,2011,硕士.
[50]黄中开.ZBTB8A多克隆抗体制备及其相关信息的初步研究[D].苏州大学,生物化学与分子生物学,2012,硕士.