联合用药对前列腺癌细胞的作用及其机制研究

【摘要】前列腺癌是发生于男性前列腺组织中的恶性肿瘤,近年来我国前列腺癌发病率迅速上升。在病情进展上,前列腺癌逐步从雄激素依赖型发展恶化到晚期的非雄激素依赖型。由于化疗效果差毒性大,这些患者往往无法救治。在现代医学尤其是肿瘤的治疗中,联合用药已成为一种趋势。采用单药治疗时,不可能通过无限增加剂量而提高疗效,因为随之而来的必然是毒副作用的增加,相当一部分抗肿瘤药都有可能危及病人生命的毒副作用。而选用副作用不相重叠的药物联合治疗则有可能通过药物的协同作用而增加疗效。本论文选择前列腺癌细胞PC-3细胞株为主要研究对象,联合不同临床药物及天然药物作用于前列腺癌细胞,比较了其与单独给药的作用效果。具体研究内容包括三个部分：(1)使用MTT方法及台盼蓝拒染法,筛选联合他汀类降胆固醇药阿托伐他汀和系列非甾体抗炎药抑制前列腺癌PC-3细胞生长的作用,选出最佳药物组合,并探讨了其可能的作用机制；(2)以天然产物姜黄素为先导化合物,比较了其单独及联合金属离子化合物以及姜黄素单独及联合由其合成的金属配合物对前列腺癌PC-3细胞的生长抑制作用；(3)将阿托伐他汀和临床使用的抗高血压药物氢氯噻嗪单独及联合给药,初步测定其对前列腺癌VCaP-N细胞、PC-3细胞、CWR细胞,胰腺癌Panc-1细胞和结肠癌HT-29细胞生长的抑制作用。研究结果显示：(1)联合阿托伐他汀和双水杨酸酯给药对前列腺癌PC-3细胞的生长抑制作用比其它联合用药组效果明显,单独给药阿托伐他汀(5μM)诱导PC-3细胞凋亡率是20%,单独给药双水杨酸酯(5μM)诱导PC-3细胞凋亡率是19%,而联合给药组(5μM＋5μM)诱导细胞凋亡的比例是43.9%；免疫印迹实验结果显示,联合给药阿托伐他汀和双水杨酸酯对PC-3细胞处理24h后细胞内相关蛋白Akt表达水平显著下降；(2)由姜黄素所合成的金属配合物对PC-3细胞的生长抑制率实验结果显示,CurV、CurZnl:2和CurBi表现出很强的抑制作用,很好的抑制了前列腺癌PC-3细胞的生长,其IC50值分别为0.5、5.8和5.1μM；(3)单独给药阿托伐他汀(10μM)和氢氯噻嗪(10μM)对PC-3细胞生长抑制率(%对照组)分别是11.8%和5.7%,联合给药组是34.7%；单独给药组的CWR细胞生长抑制率分别是33.1%和28.1%,联合给药组是80.7%；单独给药组的Panc-1细胞生长抑制率分别是27.5%和17.3%,联合给药组是62.3%;单独给药组的HT-29细胞生长抑制率分别是20.8%和15.1%,联合给药组是58.0%；单独给药阿托伐他汀(10μM)和单独给药氢氯噻嗪(10μM)组的PC-3细胞荧光素酶活性(%对照组)分别是89.2%和90.3%,而联合给药组(阿托伐他汀(10μM)+氢氯噻嗪(10μM)组)是66.5%,荧光素酶活性有明显降低。由此得出以下结论：联合用药对实验细胞的生长抑制作用和诱导细胞凋亡的作用优于两种药物单独作用时的叠加效果,呈协同效应,其作用机制可能与Akt蛋白表达的下调有关。阿托伐他汀联合氢氯噻嗪给药对多种癌细胞生长均有良好的抑制效果,比两种药物单独给药能更有效地抑制前列腺癌细胞、胰腺癌细胞以及结肠癌细胞的生长。由于阿托伐他汀、双水杨酸酯、氢氯噻嗪等都已经是临床上广泛使用的药物,本课题的研究可望为前列腺癌细胞的相关研究提供一定的科学依据及关键的参考数据。
【作者】苏博云；
【导师】杜志云；郑希；郭新东；
【作者基本信息】广东工业大学，化学工程（专业学位），2014，硕士
【关键词】联合用药；前列腺癌；阿托伐他汀；MTT；台盼蓝；Westernblot；

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