芒萁皂苷的提取分离纯化及其生物活性的研究

【摘要】药用蕨类植物因其分布广泛,资源丰富,历年来为民间所习用。芒萁是一种酸性土壤指示蕨类植物,在我国分布广泛,廉价易得。本文以芒萁为研究对象,分别采用了传统的乙醇水浴浸提、超声波提取和微波提取三种不同的方法提取芒萁皂苷,并对提取工艺用响应面优化,优化得到的提取工艺是：乙醇水浴浸提时水浴温度49.51℃、浸提时间4.79h、乙醇体积分数62.87%；超声波提取时超声波功率为204.17W、超声波处理时间为189s、乙醇浓度为64.32%；微波提取时微波功率为616.78W、微波处理时间为7.51min、乙醇浓度为40.38%。三种不同的方法提取芒萁总皂苷的结果比较为超声波提取(12.49%)>微波提取(11.17%)>乙醇水浴提取(10.45%)。在最佳提取工艺的基础上探讨了4种不同的树脂对芒萁皂苷静态吸附和解吸效果的比较研究,结果表明,D-101型大孔吸附树脂是一种比较理想的树脂,吸附量大,解吸率高,比较适合于芒萁皂苷的分离纯化；D-101型大孔吸附树脂的最佳吸附条件为：流速为2BV/h时,料液浓度20.50mg/mL,料液pH值5；最佳洗脱条件为：流速为2BV/h,洗脱溶剂为3BV70%乙醇。纯化后总皂苷含量为64.90%。通过研究在最佳芒萁皂苷提取工艺的基础上过硅胶柱的27个组分对前列腺癌PC-3细胞的抗癌效果。结果显示,不同组分对前列腺癌PC-3细胞的抑制效果不同,有的组分抑制效果很好,在浓度为80mg/ml时,组分1和组分2对前列腺癌PC-3细胞的抑制率分别达到了74.01%和91.40%；有的组分抑制率很小,还有的出现了负值,说明有的组分对前列腺癌PC-3细胞的生长起促进作用。另外,前三个组分对DPPH自由基的清除效果表明芒萁皂苷对DPPH自由基有很好的清除效果,随着样品浓度的增大,清除率也随之增大。可见芒萁提取物可以作为治疗前列腺癌的有效药物来源,同时也是一种有效的抗氧化剂。用不同极性的溶剂对提取液萃取分层,进一步用硅胶,反相硅胶,SephadexLH-20等柱层析的方法进行分离。经TLC层析结果可以看出,物质组分比较单一的是：乙酸乙酯层萃取物,将其先过硅胶柱,再过反相硅胶柱得到的组分A和组分B,通过质谱,红外和核磁共振对组分A的结构进行探讨,发现组分A是槲皮苷,同时用HPLC测得芒萁中槲皮苷的含量为1.87%。说明芒萁中黄酮的含量很高。
【作者】余姣；
【导师】丁利君；
【作者基本信息】广东工业大学，食品科学，2014，硕士
【关键词】芒萁；皂苷；提取；分离纯化；生物活性；

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