人工合成的纳豆激酶基因转化甜瓜的研究

【摘要】纳豆激酶(nattokinase,NK)是日本学者从其传统食品纳豆中发现的一种具有溶血栓功能的蛋白激酶,是在纳豆发酵过程中枯草杆菌产生的一种丝氨酸蛋白酶。本研究对枯草杆菌纳豆激酶基因进行优化设计,利用植物偏爱密码子设计并人工合成纳豆激酶基因(sNK),应用花粉管通道法将其转入甜瓜中,转sNK基因的T0代植株(265)进行PCR检测,检测结果表明26株扩增出阳性,阳性率为9.8%,PCR检测外源基因sNK已整合到甜瓜基因组中。琼脂糖-纤维蛋白平板法测定纳豆激酶活性。结果表明135株转基因甜瓜里30株有纳豆激酶活性,随着果实贮存时间的延长其活性逐渐降低,而未转基因对照果实中未检测到纳豆激酶活性。RT-PCR法检测纳豆激酶基因转录水平上的表达,结果表明经RT-PCR检测有30颗甜瓜植株在mRNA水平得到表达。纳豆激酶基因在甜瓜中获得表达,为进一步研究甜瓜果实作为具有溶.血栓功能的保健食品奠定了基础。
【作者】满达呼斯琴；
【导师】哈斯阿古拉；
【作者基本信息】内蒙古大学，生物化学与分子生物学，2014，硕士
【关键词】甜瓜；转基因；纳豆激酶；表达；酶活性；

【参考文献】
[1]韩艳丽.低温溶液法制备氧化锌微纳米结构及其性能表征[D].郑州大学,材料学,2013,硕士.
[2]王雪莹.内蒙古民族题材话剧的发展历程及美学内涵[D].内蒙古大学,艺术学,2014,硕士.
[3]杨倩.中外语言学学术论文英文摘要的体裁对比分析[D].华中师范大学,外国语言学及应用语言学,2014,硕士.
[4]王芳.政府公共工程绩效审计指标体系构建研究[D].河北经贸大学,行政管理,2013,硕士.
[5]杨阳.无位置传感器PMSM电机系统可靠性研究[D].吉林大学,无线电物理,2014,硕士.
[6]邢清华,雷英杰,刘付显.一种按比例分配冲突度的证据推理组合规则[J].控制与决策,2004,12:1387-1390.
[7]龚田.中西帝王肖像画比较[D].苏州大学,美术学,2014,硕士.
[8]吴禹.高温质子交换膜燃料电池仿真与设计[D].浙江大学,控制工程,2014,硕士.
[9]孔德志.核壳结构纳米复合材料的制备及其电化学性能研究[D].信阳师范学院,2013.
[10]胡国卿.思想政治课情境教学研究[D].辽宁师范大学,学科教学（专业学位）,2012,硕士.
[11]边晓龙.波纹钢腹板PC组合梁抗弯强度及塑性铰长度研究[D].北京交通大学,2015.
[12]孙文潇.山东两周编钟的音乐考古学研究[D].中国艺术研究院,音乐学,2012,硕士.
[13]周夫荣,刘乃瑜.任正非最看好的产业能否爆发[J].中国企业家,2014,24:106-109+11.
[14]武雅薇.我国上市商业银行财务风险评价与控制研究[D].天津财经大学,会计学,2012,硕士.
[15]卢玺.生产系统有效性的评价研究[D].沈阳工业大学,管理科学与工程,2003,硕士.
[16]李英毅.ZH公司CRM系统构建研究[D].电子科技大学,2005.
[17]蔡结生.在语文研究性学习中培养自主学习能力初探[D].福建师范大学,教育,2003,硕士.
[18]杨良.若干碳团簇固体的理论研究[D].中国科学技术大学,2014.
[19]鲁正毅.一种功能较强的示波器自动校准系统[J].宇航计测技术.1990(01)
[20]袁恺杰.英、澳教师专业标准比较研究[D].宁波大学,教育经济与管理,2013,硕士.
[21]曾勇,唐小我.购买行为分析与新产品最优广告和价格策略[J].控制与决策,1994,02:136-140.
[22]何协欢.拉萨公共建筑设计参数与建筑节能关系研究[D].重庆大学,供热、供燃气、通风及空调工程,2014,硕士.
[23]曾科豪.交通基础设施相互依赖性分析及其应用研究[D].清华大学,交通运输工程,2013,硕士.
[24]吴振锋.基于FPGA的Camera Link相机图像采集及处理技术研究[D].哈尔滨工业大学,仪器科学与技术,2013,硕士.
[25]关富敏.基于双定位模块的超宽屏交互式电子白板系统设计[D].广东工业大学,控制理论与控制工程,2014,硕士.
[26]杨艳旭.铝对大鼠学习记忆能力影响的相关机制及年龄性别差异的研究[D].山西医科大学,劳动卫生学,2002,硕士.
[27]明健.17-β雌二醇在TAO成纤维细胞氧化应激中的保护作用研究[D].第二军医大学,眼科学（专业学位）,2013,硕士.
[28]沈亮.聚烯烃嵌段共聚物的特性及其在热熔压敏胶中的应用[D].广东工业大学,化学工程,2014,硕士.
[29]杜来景.脑钠肽前体N端片段对心功能评价的作用——与心脏超声心动图的比较[D].浙江大学,内科学,2004,硕士.
[30]上官沁丽.高校马克思主义大众化的研究[D].燕山大学,马克思主义中国化研究,2013,硕士.
[31]张亚娟.几种化合物对虾类抗氧化酶系统的影响与毒性作用[D].河北大学,水生生物学,2003,硕士.
[32]刘晓培.我国城市低龄老年人力资源开发研究[D].华东师范大学,行政管理,2013,硕士.
[33]张俊英.天津市种业现状与对策研究[D].中国农业大学,种植业,2004,硕士.
[34]胡博.2011世乒赛王皓发球与接发球技战术运用特点分析[D].东北师范大学,体育（专业学位）,2012,硕士.
[35]袁瑞雪.检察环节刑事被害人救助制度研究[D].吉林大学,法律,2014,硕士.
[36]杨海清.以左旋芳樟醇为主要原料复方精油的配制及其功效研究[D].中南林业科技大学,食品科学,2013,硕士.
[37]王赫男.基督教对美国废奴运动的推动作用[D].西安外国语大学,英语语言文学,2013,硕士.
[38]乔彩霞.禽白血病劳斯肉瘤病毒衣壳蛋白p27基因的克隆、表达及免疫学诊断方法的建立[D].中国农业科学院,预防兽医学,2004,硕士.
[39]王乐.CEO声誉定量评价研究[D].浙江大学,2004.
[40]袁团.利用CO_2制备脲类化合物的研究[D].中北大学,材料工程,2014,硕士.
[41]刁利军,刘志刚,郝荣泰,沈茂盛.能量回馈式PWM整流器并网的工程设计方法[J].电工技术学报,2005,11:75-79.
[42]于倩倩.慢性咳嗽病因及治疗的回顾性分析[D].吉林大学,临床医学,2014,硕士.
[43]常高歌.概念整合理论视角的委婉语研究[D].山东财经大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[44]王倩.超晶格中应变与光电特性耦合行为的第一性原理研究[D].哈尔滨工业大学,材料加工工程,2013,硕士.
[45]于佳宁.城管暴力执法成因及其对策研究[D].浙江财经学院,行政管理,2013,硕士.
[46]谢德芳,徐霞.攀钢建成企业统计管理系统[J].冶金自动化,2006,03:67-68.
[47]林凯.AZ31+Y+Sr镁合金板材超塑气胀成形性能研究[D].哈尔滨理工大学,材料加工工程,2012,硕士.
[48]陈栋.劳务派遣工问题的社会工作介入[D].华中师范大学,社会工作,2013,硕士.
[49]谢绪恺.推荐一本好书[J].控制与决策,2002,01:76.
[50]杨永斌.数据挖掘技术在证券业中的应用[J].重庆工商大学学报(自然科学版),2005,05:41-43.