紧密连接蛋白CLDN6对结肠癌细胞SW1116恶性表型的抑制作用

【摘要】目的：研究紧密连接蛋白CLDN6对结肠癌细胞SW1116恶性表型的抑制作用。方法：RT-PCR和Westernblot法检测人正常结肠上皮细胞NCM460和人结肠癌细胞SW1116中CLDN6的表达；采用脂质体法转染pIRES2-EGFP-CLDN6真核表达载体至结肠癌细胞SW1116，经过G418筛选获得表达CLDN6的稳定克隆；采用RT-PCR、Westernblot和细胞免疫荧光法鉴定转染效率及稳定克隆中CLDN6的表达和定位；CCK8实验法绘制细胞生长曲线；二维克隆形成实验检测细胞增殖能力；DAPI法和DNALadder实验检测细胞凋亡情况；细胞划痕和Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力；裸鼠成瘤实验和免疫组织化学法检测细胞在裸鼠体内成瘤能力和裸鼠肿瘤组织中CLDN6的表达和定位。结果：获得3个过表达CLDN6的稳定克隆；RT-PCR和Westernblot法结果显示，克隆组CLDN6表达明显高于空载组；免疫荧光实验结果显示，CLDN6主要表达于细胞膜和细胞质；CCK8实验结果显示，克隆组细胞生长能力明显低于空载组；二维克隆形成实验结果显示，克隆组细胞增殖能力明显低于空载组；划痕实验和Transwell小室实验结果显示，克隆组细胞迁移和侵袭能力明显被抑制；DAPI法实验结果显示，克隆组凋亡细胞显著多于空载组，DNALadder实验结果显示克隆组细胞凋亡多于空载组；裸鼠成瘤实验结果显示，克隆组肿瘤形成率、成瘤体积和肿瘤重量均低于空载组；免疫组化结果显示，裸鼠肿瘤组织CLDN6主要表达于细胞膜和细胞质，空载组CLDN6几乎无表达。结论：紧密连接蛋白CLDN6明显抑制结肠癌细胞SW1116的细胞增殖、迁移和侵袭能力，诱导SW1116细胞凋亡及降低SW1116细胞在裸鼠体内成瘤能力。
【作者】王敏；
【导师】全成实；
【作者基本信息】吉林大学，病理学与病理生理学，2014，硕士
【关键词】结肠癌；CLDN6；紧密连接；恶性表型；

【参考文献】
[1]田萱.基于Internet的信息检索若干问题的研究[D].山东师范大学,2003.
[2]吕雯玲.针对农民的农业信息推送平台构建探讨[D].华中师范大学,农业信息化,2013,硕士.
[3]解仑,王志良,任冬淳,滕少冬.简化路况模式下驾驶员情绪模型的研究[J].自动化学报,2010,12:1732-1743.
[4]范英明.鸡西市地税局管理信息系统设计与实现[D].吉林大学,软件工程（专业学位）,2014,硕士.
[5]宣旻.课题一 基因多态性与原发免疫性血小板减少症激素疗效间的关系 课题二 单中心血友病患者临床特征的回顾性分析[D].北京协和医学院,内科学（专业学位）,2014,博士.
[6]李春生,王耀南,鄂加强.一阶纯滞后智能非线性PI控制器优化设计[J].控制与决策,2007,03:341-344+348.
[7]廖广军,李致富,刘屿,胡跃明.基于深度信息的弱光条件下人脸检测[J].控制与决策,2014,10:1866-1870.
[8]胡凯.《美国第一夫人米歇尔.奥巴马演讲》口译报告[D].中南民族大学,翻译（专业学位）,2013,硕士.
[9]黎典.“两型社会”背景下长株潭城市土地利用效益评价研究[D].湖南师范大学,土地资源管理,2014,硕士.
[10]赵衢.中美就业拒绝信函研究中的礼貌策略[D].安徽大学,英语语言文学,2014,硕士.
[11]张璐.长春市市区小学健美操教学开展现状及发展对策研究[D].东北师范大学,体育（专业学位）,2012,硕士.
[12]贾德旭.阿列卡中后期人物画研究[D].中国艺术研究院,美术学,2014,硕士.
[13]孙巨峰.RNAi沉默CXCR4基因对胃癌细胞SGC7901侵袭和转移的影响及其机制的研究[D].辽宁医学院,外科学,2012,硕士.
[14]王晓宁.幼儿不完美焦虑与抚养方式、抚养者人格倾向的关系研究[D].中国地质大学（北京）,应用心理学,2014,硕士.
[15]周子元.围垦工程对福建省水资源可持续利用影响性研究[D].福建农林大学,农村与区域发展,2012,硕士.
[16]朱挺,汤友福.线阵列CCD摄像技术在铁路电力接触线高速检测方面的应用[J].上海铁道科技.2004(03)
[17]周子龙.基于Android智能手机平台的便携式心电监护仪的设计[D].中南民族大学,生物医学工程,2013,硕士.
[18]范菁.~(60)Co-γ辐射对茭白生长和生理特性的影响[D].浙江大学,蔬菜学,2012,硕士.
[19]闫西章.近红外无创血糖检测的随机森林模型及实验系统的设计[D].吉林大学,光学,2014,硕士.
[20]吴元华.武乡县城新区控规中的低碳思考[D].西安建筑科技大学,城市规划与设计,2013,硕士.
[21]李淑淑.国内外小学科学课程标准目标和内容的比较研究[D].西南大学,课程与教学论,2013,硕士.
[22]史芳丽,吴士敏.金融信息化与网络金融相关性研究[J].华南金融电脑,2005,10:2-4.
[23]杨继凯.TiO_2基多孔微球的制备表征及光催化性质研究[D].东北师范大学,2012.
[24]郭硕.高发区同时性食管贲门多原发早期癌及癌前病变人群与内镜特征分析[D].河北医科大学,肿瘤学,2013,硕士.
[25]姜吉生.双城市工程建设层三维工程地质结构与地基工程适宜性研究[D].吉林大学,水利工程,2013,硕士.
[26]朱晔男.Lindqvist型和Keggin型多酸化合物氧化还原性质的理论研究[D].东北师范大学,物理化学,2012,硕士.
[27]黄伟,何亨,李涛,曾朋,董新华.基于SDS架构的多级DDoS防护机制[J].计算机工程与应用.
[28]SEANSOKPOEU（高森）.ACLEDA银行商业贷款的评估分析[D].北京交通大学,2014.
[29]莫一平,褚有群,钱晓峰,马淳安.低碱比H_2O_2的电化学合成[J].浙江工业大学学报,2012,04:374-378.
[30]兀威.体外抑制哮喘患者炎性细胞因子生成作用的研究[D].第四军医大学,内科学,2004,硕士.
[31]景宇宽.初中生地理学习兴趣的培养研究与实践[D].新疆师范大学,课程与教学论,2013,硕士.
[32]管培.N-杂环卡宾在镍催化C-S偶联及CO_2活化中的应用[D].江苏师范大学,有机化学,2013,硕士.
[33]冯华,黄凌鹤.后危机时代国外文化产业发展的趋势、经验和启示[J].当代世界与社会主义,2011,06:32-35.
[34]贺娟红.F集团基层主管培训评估体系优化研究[D].吉林大学,项目管理,2014,硕士.
[35]金磊.Φ720mm无缝钢管工业炉自动化控制及监控[D].天津大学,软件工程,2013,硕士.
[36]王云,史浩山.一种基于网络的智能远程学习系统的研究[J].情报杂志,2005,03:27-28+26.
[37]刘玲.虚拟机内存轻量级检查点的研究[D].华中科技大学,计算机技术,2013,硕士.
[38]吕梅.光山方言语音研究[D].山西师范大学,语言学及应用语言学,2014,硕士.
[39]张天星.养阴清热法治疗绝经后膝骨关节炎的理论及临床研究[D].北京中医药大学,中医学,2014,硕士.
[40]张羽.无线温湿度监控及预警系统的设计与实现[D].东北大学,软件工程,2011,硕士.
[41]苏德莫日根.草原生态补偿法律制度的构建[D].内蒙古大学,法律,2013,硕士.
[42]刘艾莉.我国商业银行国际化决定因素的实证研究[D].浙江大学,2007.
[43]余罗钊.我国商品期货市场羊群行为的实证分析[D].华中科技大学,应用统计,2013,硕士.
[44]孙鹤瑜.口译语境的动态顺应性研究[D].吉林大学,翻译（专业学位）,2013,硕士.
[45]邱阳.水稻类受体蛋白激酶OsRPK1参与生长素信号传导和极性运输的转录组学研究[D].南京农业大学,生物化学与分子生物学,2012,硕士.
[46]谷跃胜.基于稀疏表示的可见光目标检测研究[D].西安电子科技大学,电路与系统,2012,硕士.
[47]曹卉.中学思想政治课教学的创新教育研究[D].鲁东大学,学科教学（专业学位）,2014,硕士.
[48]彭思敏.原位法制备两种碳材料/聚酰亚胺纳米复合薄膜[D].湖北大学,材料学,2011,硕士.
[49]吴健.胸腔镜乳晕切口与常规腋下切口治疗手汗症临床效果比较[D].苏州大学,临床医学（专业学位）,2014,硕士.
[50]李乃乾,沈钧毅.量化关联规则挖掘及算法[J].小型微型计算机系统,2003,12:2275-2277.