特发性男性不育患者Y染色体微缺失检测及家系研究

【摘要】研究背景据世界卫生组织评估，世界上平均每7对夫妇中就有一对夫妇存在生殖障碍，在我国约有10%～15%的夫妇受到不孕不育的困扰，其中男方因素引起的不育约占50%，半个多世纪以来，人类精液质量显著下降，精子生成障碍已成为男性不育最常见的病因。在精子生成障碍患者中大约有30%是由于遗传因素引起，主要包括染色体异常、Y染色体微缺失以及相关基因的变异等。1976年Tiepolo等发现在Y染色体长臂1区1带（Yq1.1）存在着控制精子生成的基因—无精子因子AZF（AzoospermiaFactor,AZF），现已将AZF区划分为AZFa、AZFb及AZFc三个区。其中以AZFc区缺失率最高，且临床表型多样，介于无精子症到严重少精子症之间，AZFa区缺失常表现为唯支持细胞综合征（Sertolicellonlysyndrome,SCOS），AZFb区表现为生精阻滞。当前，对于Y染色体微缺失检测，在STS位点选择上，大多数实验室选用欧洲男科协会(EAA)和欧洲分子遗传实验质控协作网(EMQN)推荐的6个位点，然而，许多特殊病例及部分缺失的发现需进一步扩大筛查位点，以明确判断Y染色体微缺失断点位置及缺失模式。在精子浓度上，当前的研究主要集中于无精子症及严重少精子症(精子浓度<5×106/ml)，而未将精子浓度进一步细分，如对极重度少精子症（0<精子浓度<1×106/ml）和轻中度少精子症（5×106/ml<精子浓度<15×106/ml）的研究。在家系研究上，主要集中于通过辅助生殖技术后子代的生育情况，而对自然生育情况报道少见。同时由于研究人群的地理位置和种族不同，以及研究群体的数量、入选标准以及检测方法不同，Y染色体微缺失在不同国家及地区的发生率存在差异。本论文针对以上问题进行探讨，旨在明确东北地区不同精子浓度下特发性不育患者Y染色体微缺失发生率及缺失类型，确认自然生育下Y染色体微缺失来源，同时增加筛查位点，明确断点位置及缺失模式。最终，为中国东北地区男性不育患者的遗传咨询提供重要的理论基础和实验依据。研究方法研究对象为2008～2013年期间于吉林大学各临床医院因特发性无精及少精就诊的东北地区男性不育患者1601例，包括无精子症1184例，年龄29±5岁，少精子症417例，年龄30±6岁，对研究对象采用问卷调查、常规查体，利用染色体G显带技术分析染色体核型，电化学发光法检测血清生殖激素，多重PCR扩增技术检测Y染色体微缺失，同时对缺失患者进行家系随访研究。研究结果1.1601例受检样本共检出139例Y染色体微缺失，缺失率为8.68%，其中精子浓度0～1×106/ml组缺失率最高（20.83%），其次为无精子症组(8.87%)、精子浓度1～5×106/ml组（8.51%）及精子浓度5～15×106/ml组（1.11%）。在缺失类型上，以AZFc区缺失所占比率最高（75.34%）。2.不同类型的Y染色体微缺失患者中，生殖激素呈现高FSH、LH及低T水平，尤其以AZFc区缺失及AZFb+c区缺失较典型。3.共招回26例Y染色体微缺失家系，2例AZFa、4例AZFb及3例AZFb+c区缺失家系均为新生突变；17例AZFc区缺失家系中，4例为自然遗传，遗传率为23.53%，突变率为76.47%（13/17），且新生突变患者与自然遗传患者睾丸体积，生殖激素水平无明显差别。4.通过断点序列比对分析，共发现6种AZFc区缺失模式，其中模式B：sY1161(+)、sY1197(+)、sY1191(-)、sY1291(-)、sY152(-)、sY254(-)、sY255(-)、sY1206(-)、sY1054(-)、sY157(+)、sY1201(+)所占比率最高，近远端缺失断点分别位于b2扩增子及b4扩增子。5.发现2例AZFb+c区部分缺失的少精子症患者，近端断裂点位于扩增子u1内，远端断裂点分别定位于回文结构P1及P2的远端，缺失模式分别为IR4/diatalP2及IR4/diatalP1。研究结论1.东北地区特发性男性不育患者中，精子浓度0～1×106/ml组Y染色体微缺失率最高，缺失类型以AZFc区缺失为主。2.特发性男性不育患者若呈现高FSH、LH水平和低T水平，建议行Y染色体微缺失检测。3.AZFc区完全缺失患者可自然生育，并将缺失垂直遗传；AZFc区部分缺失存在扩大为全缺失的风险，进一步加重生精障碍。4.在AZF各区近远端新增筛查位点，可以明确部分缺失和完全缺失，有助于临床上对生精障碍程度的评估及治疗。
【作者】李琳琳；
【导师】朱玉琢；
【作者基本信息】吉林大学，遗传学，2014，硕士
【关键词】Y染色体微缺失；家系研究；断点序列分析；同源重组；

【参考文献】
[1]敖娟.产业集聚效应与湖北汽车产业再造[D].广西大学,政治经济学,2004,硕士.
[2]解爱红.合作学习模式在高中英语阅读教学中的应用[D].首都师范大学,学科教学,2014,硕士.
[3]王秋分.钢管高水材料短柱轴心受压力学性能研究[D].中国矿业大学,结构工程,2014,硕士.
[4]刘天义.齐鲁银行理财产品管理系统设计与实现[D].山东大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[5]刘学坤.基于支持向量机和油液检测的船舶柴油机故障诊断研究[D].大连海事大学,轮机工程,2013,硕士.
[6]才凡.锦州市凌河区公务员激励机制研究[D].东北大学,公共管理,2009,硕士.
[7]张芳.商场第三方火灾隐患排查模式研究[D].中国地质大学（北京）,安全技术及工程,2013,硕士.
[8]边久松.中外联营体实施非洲某机场跑道扩建项目的管理研究[D].吉林大学,工业工程,2013,硕士.
[9]孙文强.两线制温度变送器芯片的研究与设计[D].沈阳工业大学,微电子学与固体电子学,2013,硕士.
[10]蒋坤.芪苈强心对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心脏成纤维细胞转分化的影响及其机制研究[D].川北医学院,内科学,2014,硕士.
[11]李莉莉.手机电池的选购[J].电信网技术.2000(06)
[12]姜光宝.政府信息公开视野下的部门预算改革[D].江西财经大学,经济法,2013,硕士.
[13]王灏睿.再社会化创业教育在轻邢犯教育矫治中的应用[D].北京交通大学,2014.
[14]刘娟.基于SOA的钢铁企业质量管理系统的设计与实现[D].湖南大学,软件工程,2011,硕士.
[15]吉旭,李忠明,朱立嘉.数据挖掘技术在共混材料制备的工艺研究中的应用[J].高分子材料科学与工程,2004,03:29-32.
[16]陈永凌.重磁位场转换的研究及应用[D].成都理工大学,固体地球物理学,2013,硕士.
[17]王昕.浙南畲族婚姻形态变迁研究[D].温州大学,民俗学,2012,硕士.
[18]戎元元.术侧肺辅助小潮气量IPPV对周围型肺癌开胸患者氧合及炎性因子的影响[D].河北医科大学,麻醉学,2014,硕士.
[19]曹可力,李平双,何希杰.关于《潜水电泵试验方法》标准中性能判定的讨论[J].农业机械学报.2006(05)
[20]郑凯.芯片级封装互连体在电流作用下的损伤行为[D].沈阳航空航天大学,材料学,2013,硕士.
[21]邱圣辉.基于3D-HEVG下的帧内预测快速算法的研究与实现[D].北方工业大学,电路与系统,2014,硕士.
[22]孙同瑜.非小细胞肺癌肿瘤新生血管密度的临床意义及与PD-L1表达水平的相关性研究[D].苏州大学,胸心外科学,2013,硕士.
[23]金岩.2012年欧洲杯与中超联赛犯规情况的对比分析[D].河北师范大学,体育教育训练学,2014,硕士.
[24]刘宁.发酵豆乳对大鼠溃疡性结肠炎的防治作用及机制研究[D].山西医科大学,营养与食品卫生学,2013,硕士.
[25]李文斌.山西省基层党组织建设研究[D].山西财经大学,马克思主义中国化研究,2014,硕士.
[26]潘有能.基于XML的多文种Web挖掘研究[J].情报杂志,2005,02:10-12.
[27]璩超奕.基于语料库的中美英文岛屿争议新闻报道的批判性话语分析[D].河南科技大学,外国语言学及应用语言学,2014,硕士.
[28]赵坤.城轨交通车载超级电容储能系统能量管理及容量配置研究[D].北京交通大学,2013.
[29]张翠莲.PTPN2基因rs2542151及rs7234029多态性与广西壮族人群炎症性肠病的相关性研究[D].广西医科大学,消化内科（专业学位）,2013,硕士.
[30]戴礼豪.通用代码安全系统的研究[D].福州大学,计算机应用技术,2004,硕士.
[31]马文石,周俊文.一种可分散性石墨烯的制备[J].高等学校化学学报,2010,10:1982-1986.
[32]鲁文勇.城市社区卫生服务发展障碍因素研究[D].浙江大学,2008.
[33]季超平,董明飞,王志恒,鲍官军,杨庆华.颤振冷挤压降载机理与仿真研究[J].机电工程,2014,04:420-424+436.
[34]孙意.家电产品逆向物流管理研究[D].复旦大学,物流工程,2012,硕士.
[35]林煜东,和红杰,陈帆,尹忠科.基于轮廓几何稀疏表示的刚性目标模型及其分级检测算法[J].自动化学报,2015,04:843-853.
[36]冯玉才,宋恩民,刘宏,孙小薇,韩力.地图自动化识别系统中识别车站标记的环界算法[J].自动化学报,1996,06:758-760.
[37]陈乐.高温烟气在炉内辐射传热与流动特性研究[D].浙江大学,能源环境工程,2013,硕士.
[38]叶婉秋.模具制造车间生产调度的研究与开发[D].浙江工业大学,2010.
[39]王祥.基于症状可靠度既有网架结构维护策略及寿命预测研究[D].浙江大学,结构工程,2013,硕士.
[40]潘红卫,杨力,郭增虎.松辽盆地中南部中浅层岩性圈闭地震识别技术[J].石油地球物理勘探,2008,S1:127-131+196+12.
[41]钟晓鸣.论软件形成的知识生产中人-机分工与合作[J].学术界,2005,03:167-174.
[42]闫丽琴.铁磁形状记忆合金CoNiGa的制备与性能研究[D].河北工业大学,材料物理与化学,2004,硕士.
[43]徐泽水.基于不同类型残缺判断矩阵的群决策方法[J].控制与决策,2006,01:28-33.
[44]柳毅琨,邱志成,刘静,金剑.易染色聚酯熔体的流变性能[J].纺织学报.
[45]王燕.基于石墨烯纳米复合材料的增敏效应构建高灵敏电化学适体传感器的研究[D].西南大学,无机化学,2013,硕士.
[46]朱连文.具有环境修复功能的纳米复合结构的设计合成[D].苏州大学,2013.
[47]刘霜.艾灸中脘神阙涌泉结合针刺治疗急性缺血性中风临床研究[D].广州中医药大学,针灸推拿学（专业学位）,2013,硕士.
[48]莎米拉.《吉檀迦利》孟加拉原版与英泽比较研究[D].浙江大学,比较文学与世界文学,2012,硕士.
[49]潘娣.幼儿健美操对幼儿身体素质和执行功能影响的实验研究[D].北京体育大学,运动人体科学,2013,硕士.
[50]孙运达.多视点非接触式人体运动捕捉的研究[D].北京交通大学,2006.