去甲肾上腺素β2受体参与慢性异源性应激诱导的内脏痛觉过敏

去甲肾上腺素β2受体参与慢性异源性应激诱导的内脏痛觉过敏

作者:师大云端图书馆 时间:2018-04-24 分类:参考文献 喜欢:2434
师大云端图书馆

【摘要】目的1.探讨去甲肾上腺素在慢性异源性应激导致的内脏痛觉过敏中的作用;2.研究参与慢性异源性应激诱导的内脏痛觉过敏的肾上腺素能受体亚型;3.研究电压门控性钾离子通道在慢性异源性应激诱导的慢性内脏痛觉过敏中的作用。方法1.使用三种不同的应激方法(强迫游泳、冷束缚、孤岛)对6~8周龄SD雄性大鼠进行持续9天的异源性慢性应激(HIS)从而诱导大鼠结直肠慢性痛觉过敏。运用腹壁撤回评分(AWRscore)的方法评测腹腔注射不同的肾上腺素能受体拮抗剂对HIS大鼠痛行为的影响。2.在结直肠壁注射逆行标记荧光素(DiI)来标记结直肠特异性的背根神经节(DRG)神经元,运用全细胞膜片钳的方法研究肾上腺素能受体拮抗剂对HIS模型大鼠结直肠相关DRG神经元的兴奋性及对电压依赖的钾离子通道特性的影响。3.运用WesternBlotting方法检测对照组和HIS模型组大鼠结直肠肌及结直肠相关DRG中肾上腺素能β2受体表达情况。4.运用Elisa的方法检测对照组和HIS模型组大鼠血清中去甲肾上腺素的浓度。结果1.腹腔注射NE受体的拮抗剂发现肾上腺素能β受体非选择性拮抗剂,而不是α受体拮抗剂,可以明显翻转由HIS诱导的大鼠结直肠痛觉过敏。进一步的研究发现,肾上腺素能β2受体拮抗剂可以明显翻转由HIS诱导的大鼠结直肠痛觉过敏,而β1和β3受体拮抗剂对应激导致的结直肠痛觉过敏没有明显作用。2.全细胞膜片钳记录发现,与生理盐水组相比,肾上腺素能β2受体拮抗剂能明显翻转由HIS应激诱导的大鼠结直肠相关DRG神经元兴奋性的升高。3.电压钳模式下记录发现,与生理盐水组相比,肾上腺素能β受体拮抗剂能明显翻转由HIS应激诱导的大鼠结直肠相关DRG神经元钾电流密度的降低。4.行为学实验发现,肾上腺素能β2受体拮抗剂可以明显翻转NE鞘内注射模拟的内脏痛觉过敏,NE灌流DRG神经元亦可以明显提高其兴奋性。5.Elisa检测结果发现,大鼠血清中的NE浓度在HIS6h后明显升高,在一周后恢复。WersternBlottin检测发现,在应激前后大鼠结直肠肌和相关DRG中的β2受体蛋白表达水平没有变化。结论慢性异源性应激可以引起大鼠血清中去甲肾上腺素浓度升高,可能激活了大鼠初级感觉神经元上的肾上腺素能β2受体,从而升高了结直肠特异性DRG神经元的兴奋性进而产生内脏痛觉过敏;延迟整流型钾电流(IK)密度的降低可能参与了慢性异源性应激导致的结直肠特异性DRG神经元兴奋性的增加。因此,本实验研究在一定程度上揭示了功能性胃肠疾病如IBS病人慢性内脏痛产生的分子机制,从而可能为慢性内脏痛的治疗提供更有效的治疗靶点。
【作者】芮云云;
【导师】徐广银;
【作者基本信息】苏州大学,神经生物学,2014,硕士
【关键词】肠易激综合症;内脏痛觉过敏;背根神经节;肾上腺素能受体;电压门控性钾离子通道;慢性异源性应激;

【参考文献】
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