利他林在大鼠前额叶皮层的新作用机制

【摘要】利他林(哌醋甲酯；Methylphenidate,MPH)是治疗注意力缺损多动症(ADHD)的临床治疗常用药物。前人研究表明,利他林通过抑制儿茶酚胺(多巴胺DA和去甲肾上腺素NE)的转运体,引起突触间隙DA和NE浓度升高而产生治疗效应。本研究中,我们首先采用全细胞膜片钳记录方法,在大鼠内侧前额叶皮层(mPFC)第5-6层锥体神经元,检测利他林如何调节谷氨酸受体介导的兴奋性突触传递。实验结果显示：灌流给予50μM的利他林显著增强non-NMDA受体和NMDA受体介导的eEPSC;在儿茶酚胺被耗竭的脑片上,利他林依然显著增强NMDA受体介导的eEPSC,但对non-NMDA受体介导的eEPSC没有影响,提示利他林可能通过突触后机制直接增强NMDA受体电流。接下来,我们使用NMDA诱发内向电流来验证利他林的突触后作用机制。结果显示：在药理学分离的锥体细胞上,利他林显著增强NMDA诱发的内向电流,但对谷氨酸诱发的non-NMDA受体电流没有影响；利他林对NMDA受体电流的易化效应不被D1/5或α2受体拮抗剂阻断,但可被sigma-1受体拮抗剂所阻断。进一步的实验发现,利他林对NMDA受体电流的易化效应需要胞内磷酯酶C(PLC)和蛋白激酶C(PKC)的介导,但不需要蛋白激酶A(PKA)；而且,这种易化效应依赖于胞内Ca2+但不依赖于胞外Ca2+,因为胞内Ca2+被螯合或IP3诱发胞内Ca2+库释放被阻断后,利他林对NMDA受体电流的易化效应不再出现,但L-型钙离子通道被阻断后,利他林的效应依然存在。免疫组织化学和免疫印迹实验显示,sigma-1受体在大鼠mPFC有大量分布,并且主要表达在细胞质。因此,本实验首次证明,在大鼠内侧前额叶皮层锥体细胞,利他林通过作用于sigma-1受体易化NMDA受体介导的兴奋性突触传递,这种易化效应是由胞内PLC/IP3/PKC/Ca2+信号通路来介导,揭示了利他林在前额叶皮层的一种新的作用机制。此外,我们还进行了放射性配体受体结合实验。初步结果表明,利他林能够与sigma-1受体结合,且有较高的亲和性。行为药理学实验显示,高剂量利他林导致小鼠多动,这种效应可被sigma-1受体特异性拮抗剂BD1063阻断。而且,预先给予BD1063使高剂量利他林致多动的剂量效应曲线显著右移。这些结果进一步说明,利他林可作用于sigma-1受体。
【作者】张春雷；
【导师】李葆明；
【作者基本信息】复旦大学，神经生物学，2010，博士
【关键词】利他林；兴奋性突触传递；NMDA受体电流；内侧前额叶皮层；Sigma-1受体；大鼠；

【参考文献】
[1]刘刊.云制造资源语义发现关键技术研究[D].太原科技大学,机械制造及其自动化,2013,硕士.
[2]王京京.桔小实蝇对常用杀虫剂的敏感性及其3种解毒酶酶学特性研究[D].西南大学,农业昆虫与害虫防治,2013,硕士.
[3]桑瑶烁.选择性输出双离合自动变速器的换挡品质研究[D].合肥工业大学,机械制造及其自动化,2013,硕士.
[4]郑力文.氮掺杂有序介孔碳材料的制备及应用研究[D].兰州理工大学,应用化学,2014,硕士.
[5]杨国才.硫酸生产空塔进口压力控制系统简介[J].冶金自动化,1988,03:40-43.
[6]李宴君.基于时序分析的直接空冷系统空气侧流动特性及表征方法研究[D].中国科学院研究生院（工程热物理研究所）,工程热物理,2014,博士.
[7]陈伟东.基于分析型CRM的信用销售管理[D].广东工业大学,2003.
[8]陆江威.我国公立医院信息披露质量评价研究[D].华中科技大学,会计,2013,硕士.
[9]李慧.基于Web的图形数据交换的研究[D].青岛大学,计算机软件与理论,2004,硕士.
[10]朱青峰.武钢5号高炉提高煤比的措施[J].炼铁.2001(S2)
[11]杨旭洲.新形势下高中道德教育问题分析与对策研究[D].杭州师范大学,思想政治教育,2013,硕士.
[12]吴骏,齐郑,刘栋梁,高梯才.基于故障录波数据的小电流接地故障管理信息系统应用[J].现代电力,2005,06:65-68.
[13]曹争利.质子辐照TiO_2/PI自由基演化及其光学性能退化研究[D].哈尔滨工业大学,空间材料与加工,2013,硕士.
[14]周亚林.企业境外投资内部控制研究[D].华中科技大学,会计学,2012,硕士.
[15]傅红.梁朝萧氏家族文学活动研究[D].湖南师范大学,中国古代文学,2013,硕士.
[16]孙志刚,沈西挺,张强,赵新海.基于数据挖掘的客户关系管理系统[J].兵工自动化,2005,04:47-48.
[17]鲁燕.强磁场作用下碳在纯铁中的扩散行为及其机理研究[D].东北大学,材料学,2011,硕士.
[18]李珍.核酸与三磷酸腺苷检测的荧光生物传感新方法研究[D].湖南大学,2014.
[19]范戌辉.部分肋软骨切取器的研制及在唇裂术后鼻畸形整复中的应用[D].河北医科大学,口腔医学（专业学位）,2013,硕士.
[20]王媞.许学东扬琴音乐作品与演奏技巧浅析[D].中央民族大学,音乐学,2012,硕士.
[21]葛媛媛.现代汉语中的多称谓并用现象[D].华中师范大学,语言学及应用语言学,2014,硕士.
[22]金雪松.基于人工神经网络的J-TEXT锁模破裂预言编码[D].华中科技大学,电气工程,2012,硕士.
[23]张丽华.抗血小板药物在中国急性心肌梗死患者中的应用变化趋势调查2001-2011[D].北京协和医学院,内科学,2014,博士.
[24]苏晓娥.中学英语写作教学现状的初步调查及建议[D].福建师范大学,教育,2003,硕士.
[25]吴林林.秦岭川金丝猴（Rhinopithecus roxellana）成年雄性的亲缘偏向行为[D].西北大学,生态学,2013,硕士.
[26]蔡伟斌.Monte Carlo模拟在Wilcoxon秩和检验样本量估计中的应用及其SAS实现[D].华中科技大学,流行病与卫生统计学,2012,硕士.
[27]李永富.内置LED光源的新型平板式光生物反应器用于微藻高效固定CO_2[D].中国海洋大学,环境科学,2014,博士.
[28]王哲,杨林,杨群.论客户智能在企业中的应用[J].物流技术,2004,09:35-37.
[29]朱金利.中国政府官员问责制研究[D].辽宁大学,中外政治制度,2012,硕士.
[30]陈万明.无碱液体速凝剂的综合效益评价[D].长安大学,技术经济及管理,2014,硕士.
[31]肖敏.高校图书馆网站可用性研究[D].山东大学,图书馆学,2013,硕士.
[32]张方园.中医医院药剂空间建筑设计研究[D].西安建筑科技大学,建筑学,2013,硕士.
[33]崔伟.基于SuperMap Objects的焉耆盆地地下水信息管理与分析系统研究[D].新疆农业大学,农业机械化工程,2012,硕士.
[34]黄川.在华外企劳资冲突危机管理研究[D].云南财经大学,公共管理,2013,硕士.
[35]苏晨,张玉洁,郭振,徐金安.使用源语言复述知识改善统计机器翻译性能[J].北京大学学报(自然科学版),2015,02:342-348.
[36]田苗苗.数据挖掘之决策树方法概述[J].长春大学学报,2004,06:48-51.
[37]许俊臣.船舶加筋结构的运行模态分析及动力减振优化[D].大连理工大学,船舶与海洋结构物设计制造,2013,硕士.
[38]薛冰.一种基于知网的社会化问答系统研究与实现[D].西安电子科技大学,计算机系统结构,2011,硕士.
[39]曹鲁东.卷烟销量应用研究[D].云南财经大学,应用统计,2013,硕士.
[40]白雪.现代铁路客运站站前广场景观设计的地域性表达[D].湖北工业大学,设计艺术学,2013,硕士.
[41]徐子闻.信息可视化在互联网用户体验中的运用研究[D].西南交通大学,工业设计工程,2014,硕士.
[42]楚红丽.MDQ信用社基层社员工薪酬方案优化设计[D].山东大学,工商管理（专业学位）,2012,硕士.
[43]查小飞.元系统跃迁理论及其哲学意义[D].华南师范大学,科学技术哲学,2004,硕士.
[44]周邠鹏.水平荷载下桩基工作性状的数值分析[D].西安理工大学,结构工程,2003,硕士.
[45]赵泽茂,何坤金,胡友进.基于距离的异常数据挖掘算法及其应用[J].计算机应用与软件,2005,09:105-107.
[46]毕刚.混沌理论在高速列车故障诊断中的应用[D].西南交通大学,控制工程,2014,硕士.
[47]刘静.基于Moodle虚拟学习环境的混合式学习模式的构建与研究[D].东北石油大学,教育技术学,2013,硕士.
[48]徐晓风.商业保险公司参与农村合作医疗研究[D].中南林业科技大学,农村与区域发展,2013,硕士.
[49]刘伟川.风力发电系统先进控制研究[D].北方工业大学,控制理论与控制工程,2013,硕士.
[50]邵静.资本充足性对商业银行经营风险的影响研究[D].西北大学,金融学,2014,硕士.