青岛文昌鱼DMRT2基因的克隆与表达研究

【摘要】DMRT(double-sexandmab3-relatatedtranscriptionfactor)基因家族是一个与性别决定有关的基因家族，它编码的转录因子具有一个保守的DM(double-sexandmaleaberrant-3relativedomain)结构域，靠特殊的锌指结构连接DNA。目前研究表明，DMRT基因家族主要参与胚胎的性别分化、性腺的发育、配子的形成，并且参与神经发育等其他功能。本论文主要从DMRT2基因的cDNA、DNA碱基序列、组织表达等方面对DMRT2基因进行研究。文昌鱼（Branchiostoma）属于脊索动物门头索动物亚门，是连接无脊椎动物与脊椎动物的过渡生物，是现存最接近脊椎动物的无脊椎动物类型。由于文昌鱼具有脊椎动物的部分形态及发育模式，且基因组没有大量倍增，因此常用来作为研究脊椎动物起源和无脊椎动物进化的模式生物。因此，研究文昌鱼的性别分化就具有重要研究价值，其中DMRT家族作为重要的参与性别分化与性腺发育的基因家族，其研究就具有了指导性意义。本论文以DMRT基因家族具有保守DM结构域为突破口，通过比对与文昌鱼亲缘关系较近的物种的DMRT2基因发现保守序列，在保守序列的基础上获得文昌鱼DMRT2基因cDNA片段，通过RACE（rapidamplificationofcDNAends）的方法得到该基因的完整的1550bp的cDNA序列。在cDNA序列的基础上设计引物，得到DMRT2基因的DNA片段451bp，在此片段基础上通过染色体步移的方法得到该基因对应的DNA碱基序列，拼接得到了2210bp的DNA碱基序列。在完成了DMRT2基因的序列测序后，运用组织原位杂交的方法对该基因的组织表达进一步研究，发现DMRT2基因在文昌鱼性腺中有表达，但在成熟个体中鳃和肌肉组织内未见表达。
【作者】张月圆；
【导师】王昌留；
【作者基本信息】鲁东大学，细胞生物学，2014，硕士
【关键词】文昌鱼；DMRT；RACE；染色体步；ISH；

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