【摘要】piggyBac转座子属于DNA型转座子,具有插入并且精确切离靶位点特性,是目前转基因研究中应用最广泛的工具之一,目前对于piggyBac类转座子的研究主要集中在不同生物体中新型转座子及其应用范围的探索,而对于转座子结构与活性关系的研究却较少。本文试图在不同细胞寄主与活体寄主中利用不同组合重组载体探索亚末端对piggyBac转座活性的影响,现将结果总结如下：1、以来自棉铃虫HnPLE和来自 […]

【摘要】在转基因研究和基因治疗中,将每个全长基因准确的导入哺乳动物和人类基因组中是必需的。然而现有基因转移系统携带基因片段的局限性、基因拷贝数的不可控性和整合位点的不确定性成为在转基因和基因治疗中的最大障碍。我们研究发现改造的piggyBac(PB)转座子能有效的将超过200kb的完整大片段基因转移到人类和小鼠细胞中,以及小鼠体内。PB介导的转基因使单拷贝的全长基因稳定的整合到基因组中,并且转基因 […]

【摘要】临18基因是C类Vps基因家族的一员,在进入溶酶体的膜泡运输中发挥着重要作用。但是Vps18在哺乳动物中的生理功能目前尚无报道。应用基因打靶技术,我们在小鼠中剔除了Vps18基因。我们发现Vps18全身性基因剔除导致胚胎死亡或早期新生儿死亡。而神经细胞特异性剔除小鼠,Vps18FI/FI;Nestin-Cre(Vps18CKO),呈现出明显的生长迟缓,并且在出生后12天内全部死亡。我们的研 […]