有丝分裂期纺锤体可塑性的调控机制研究

有丝分裂期纺锤体可塑性的调控机制研究

作者:师大云端图书馆 时间:2016-06-04 分类:期刊论文 喜欢:4433
师大云端图书馆

【摘要】有丝分裂过程中最核心的事件是染色体的运动和分离,它主要是由纺锤体微管和定位于染色体着丝粒区域的动点之间的相互作用来调节的。着丝粒相关蛋白E(CENP-E)是一个在稳定动点与微管的连接方面以及维持纺锤体检验点功能中均有重要作用的马达蛋白。我们的目的旨在寻找与其有相互作用的蛋白,从而搭建一个完善的CENP-E相关的蛋白网络系统。通过酵母双杂交和串联亲和层析的技术,我们鉴定了两个新的CENP-E结合蛋白:SKAP和SEPT7。我们前期的工作主要是围绕这两个蛋白与CENP-E之间的相互作用展开的。而在本文中,我主要研究了这两个蛋白本身的生化特性和功能,从而去解析纺锤体可塑性的调控机制。我第一部分工作的重点是SKAP,它是一个纺锤体和微管相关的蛋白质。我们之前的研究证明:SKAP可以和CENP-E形成复合物,并协同作用调控微管与动点的连接以及染色体的排列和分离,但是我们仍然不清楚SKAP的动点定位以及具体调控纺锤体可塑性的机制。结合酵母双杂交实验与体外的pull-down实验,我们发现SKAP通过它的C端与Mis13有直接的相互作用,并且这一相互作用稳定了SKAP在动点的定位。如果用siRNA抑制Mis13的表达,SKAP在动点的定位将会受到很大的影响。同时,我们还证实SKAP参与调控动点的正常“震荡”和微管正末端的动态性。当我们用SKAP的siRNA抑制它的表达,动点原本具有的在赤道板附近持续震荡的行为受到了影响,并且微管正末端的动态性也有减弱。此外,我们还发现SKAP与微管的正末端蛋白Clasp1有相互作用,负责招募它上动点,而这又与微管正末端的动态性紧密关联。这些结果揭示了SKAP在纺锤体可塑性的调控方面发挥了至关重要的作用。我第二部分的工作则是围绕SEPT7展开的。Septin(SEPT)是细胞内第四类骨架蛋白体系,我们之前的研究结果揭示了SEPT7通过与CENP-E的相互作用,连接了septin纤维和动点,并参与调控动点和微管的连接。而在我的研究工作中,通过质谱学鉴定的方法和详尽的生化分析,我们首次发现了人源的septin蛋白具有乙酰化的修饰,并且证明了Tip60是一个负责SEPT7乙酰化的乙酰转移酶,它可以乙酰化SEPT7的第175位和201位氨基酸。通过体外的pulldown实验和体内的荧光共振能量转移(FRET)实验,我们证实了SEPT7的乙酰化改变了它与SEPT2/6/7复合物中各组分分子间的相互作用,影响了septin纤维结构的形成。联系到SEPT7在有丝分裂过程中发挥的作用,我们还进行了免疫荧光分析和活细胞成像去评估SEPT7的乙酰化在有丝分裂中的作用,发现SEPT7的乙酰化参与调控细胞周期的进程和后续染色体的排列和分离。我们的研究对进一步解析septin骨架组装的分子机制以及翻译后修饰在此过程中发挥的作用具有很重要的意义。
【作者】王茜玮;
【导师】姚雪彪;
【作者基本信息】中国科学技术大学,细胞生物学,2012,博士
【关键词】动点;微管;CENP-E;SKAP;Mis13;spindleplasticity;oscillation;SEPT7;乙酰化;

【参考文献】
[1]杨海明.扬州鹅繁殖的光照调控及下丘脑基因差异表达研究[D].扬州大学,特种经济动物饲养,2014,博士.
[2]周雷.BC(上海)公司营销策略改进的探讨[D].厦门大学,工商管理(EMBA),2014,硕士.
[3]杨明玮.基于FGS的拥塞控制机制的研究[D].合肥工业大学,计算机软件与理论,2004,硕士.
[4]王伟.基于小波变换的OFDM调制解调特性研究[D].哈尔滨理工大学,导航、制导与控制,2012,硕士.
[5]王钊.视频会议系统中对象分割的研究与实现[D].大连海事大学,信号与信息处理,2004,硕士.
[6]杜盼盼.衍生金融工具的应用对上市公司经营业绩的影响研究[D].天津财经大学,会计学,2012,硕士.
[7]王凯旋.洛阳宏进农副产品批发市场营销策略研究[D].河南科技大学,工商管理(专业学位),2013,硕士.
[8]马莎莎.智力障碍儿童的社会适应能力研究[D].华东师范大学,特殊教育学,2013,硕士.
[9]华林森.中文文本情感分类研究[D].重庆大学,计算机系统结构,2014,硕士.
[10]徐首良.上市公司关联交易的法律规制[D].首都经济贸易大学,经济法,2004,硕士.
[11]吴振华.基于区位码和多重加密的农产品追溯编码的设计[D].河南农业大学,农业信息化技术,2012,硕士.
[12]彭文延.试论我国合同法上的情势变更原则[D].吉林大学,法律,2012,硕士.
[13]禹建逊.结果加重犯罪过形式研究[D].郑州大学,刑法学,2013,硕士.
[14]李梨.基于GARCH模型的国际金价分析与预测[D].重庆大学,应用统计(专业学位),2014,硕士.
[15]杨晓瑞.省级党报官方微博问题与对策研究[D].渤海大学,新闻学,2014,硕士.
[16]孟圆.我国“小产权房”合法化问题研究[D].重庆大学,法律(专业学位),2014,硕士.
[17]王晓璐.五藤痛风饮对急性痛风性关节炎模型大鼠SUA、IL-8、TNF-α的影响[D].黑龙江中医药大学,方剂学,2013,硕士.
[18]陈奇.对外汉语口语课中的文化教学渗入研究[D].苏州大学,汉语国际教育(专业学位),2013,硕士.
[19]朱瀛.商品搜索系统中商品名称分析子系统的设计与实现[D].南京大学,软件工程(专业学位),2013,硕士.
[20]徐小倩.贝利尼艺术歌曲的特点及演唱分析[D].云南艺术学院,声乐表演,2014,硕士.
[21]马庆华.冬枣实生后代主要性状遗传变异规律及枣实生苗抗寒性研究[D].河北农业大学,果树学,2004,硕士.
[22]刘晓媛.余华小说的审美性及其在消费社会中的传播学研究[D].四川省社会科学院,文艺学,2014,硕士.
[23]沈文婷.中国物流低碳化发展的机理研究[D].浙江理工大学,区域经济学,2014,硕士.
[24]杨保军.水闸CAD软件研制(SluiceCAD)[D].大连理工大学,结构工程,2004,硕士.
[25]厉旭云,梅汝焕,叶治国,富丽琴,夏强,陆源.高校实验教学研究的发展及趋势[J].实验室研究与探索,2014,03:131-135+197.
[26]刘嫚,陈梦东.新一代组织干部管理决策支持系统的研究[J].计算机应用与软件,2005,08:69-71.
[27]杜玉龙.基于POD基年龄结构传染病模型数值方法研究[D].宁夏大学,运筹学与控制理论,2014,硕士.
[28]叶舒醒.带有周期边界条件的耦合Dirac方程特征值问题的特征展开定理[D].郑州大学,应用数学,2013,硕士.
[29]梁正.生产性服务业对工业集聚的影响研究[D].重庆工商大学,产业经济学,2014,硕士.
[30]孙雁涛.快速底盘圆形坑槽铣刨车铣刨装置设计及负载理论研究[D].长安大学,机械工程(专业学位),2014,硕士.
[31]李亚辉.偏心注水井监控系统的研究与设计[D].哈尔滨理工大学,电力电子与电力传动,2012,硕士.
[32]庞玉辉.八倍体小滨麦与硬粒小麦杂交后代的分子细胞学研究[D].西北农林科技大学,作物遗传育种,2014,博士.
[33]张伟.教学评估系统中组件重用的研究[D].河北大学,2002.
[34]蒋珩珺.银/壳聚糖复合物的制备及抗氧化、抑菌性能研究[D].浙江工商大学,食品工程,2013,硕士.
[35]王亚敏.和谐社会视域下农民利益表达问题研究[D].燕山大学,思想政治教育,2013,硕士.
[36]郭岩,白硕,杨志峰,张凯.网络日志规模分析和用户兴趣挖掘[J].计算机学报,2005,09:1483-1496.
[37]杜芳.地铁机车建模及直流牵引供电系统故障分析[D].北京交通大学,2010.
[38]伊望(EvansAgoTetteh).加纳到中国东南沿海最优原油运输航线评价[D].大连海事大学,物流工程与管理,2013,硕士.
[39]白静.现代汉语“走”字的组合状况及其历史来源研究[D].四川外国语大学,汉语言文字学,2013,硕士.
[40]彭小兰.有机热载体炉积碳检测技术及安全评价研究[D].中南大学,安全技术及工程,2014,博士.
[41]谭红英.国际与国内车联网专利知识图谱对比分析[D].重庆大学,图书馆、情报与档案管理,2014,硕士.
[42]高娃.拉西东日布及其编辑出版活动研究[D].内蒙古大学,新闻学,2014,硕士.
[43]刘益剑.模糊控制系统设计及参数PSO优化研究[D].浙江大学,控制理论与控制工程,2004,硕士.
[44]金艳菲.IT企业员工激励制度及流失管理[D].浙江工业大学,2010.
[45]陈端计.我国市场经济中的供给问题研究[D].厦门大学,2003.
[46]朱明冬.变质处理和热处理对Al-Si合金组织及性能的影响[D].哈尔滨工业大学,材料加工工程,2013,硕士.
[47]刘晓亮,类延达,郭宝春,贾德民.离子液体改性炭黑增强丁腈橡胶的研究[J].弹性体,2009,05:1-5.
[48]陈丽英.Cf公司供应商管理研究[D].西南交通大学,工商管理,2013,硕士.
[49]陈志盛,孙克辉,李勇刚,张泰山.基于模糊Lyapunov函数的离散模糊时滞系统H∞控制[J].控制与决策,2006,05:546-549+558.
[50]汪闽,周成虎,裴韬,骆剑承.一种带线性约束的最小生成树聚类方法[J].模式识别与人工智能,2002,04:494-497.

相关推荐
更多