蒿甲醚对舌鳞癌Tca8113细胞的生长抑制和凋亡诱导的研究

【摘要】目的：蒿甲醚是青蒿素的衍生物之一,是抗疟药物,近年来的研究显示,蒿甲醚有抗肿瘤作用。本课题旨在探讨蒿甲谜(artemether,ART)对人舌鳞癌Tca8113细胞的生长抑制和凋亡诱导作用及可能机制。方法：1人舌鳞癌Tca8113细胞株购于南京凯基生物科技有限公司,进行实验。2实验分组：分为正常对照组、不同浓度蒿甲醚药物浓度组。正常对照组用10%FBS的1640培养液培养舌鳞癌细胞；蒿甲醚组分别用10%FBS的1640培养液配制成的终浓度为100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml的蒿甲醚处理细胞。3采用四唑盐比色(MTT)方法,观察蒿甲醚作用的人舌鳞癌细胞增殖活性的影响。4采用流式细胞技术观察蒿甲醚作用的人舌鳞癌细胞的细胞早期凋亡的影响。5采用流式细胞技术观察蒿甲醚作用的人舌鳞癌细胞的细胞凋亡(亚倍体峰)的影响。6采用免疫细胞化学法观察蒿甲醚作用的人舌鳞癌细胞Survivin蛋白的表达情况。7采用蛋白印迹(Western-blot)技术检测人舌鳞癌细胞Survivin蛋白的表达情况。8数据处理采用SPSS11.5统计学软件进行,采用单因素方差分析和LSD-t检验,P<0.05和P<0.01表示差异有统计学意义。结果：1蒿甲醚对舌鳞癌细胞增殖活性的影响。100μg/ml、200μg/ml和300μg/m1浓度的ART分别处理24h、48h和72h后,舌鳞癌细胞的生长受到明显的抑制,呈现时间依赖性和剂量依赖性,经过统计学分析,各组之间差异均具有统计学意义(P<0.05)。2蒿甲醚对舌鳞癌细胞早期凋亡(AnnexinV)的影响。100μg/ml、200μg/ml和300μg/ml浓度的蒿甲醚作用于舌鳞癌细胞48h,经流式细胞仪检测,其早期凋亡率与对照组比较逐渐增加,但是其中100μg/ml和200μg/ml组比较,差异无统计学意义(P>0.05),其它各组差异具有统计学意义(P<0.05)。3蒿甲醚对舌鳞癌细胞凋亡(亚倍体峰)的影响。100μg/ml、200μg/ml和300μg/ml浓度的蒿甲醚作用于舌鳞癌细胞48h,经流式细胞仪检测,其凋亡率(亚倍体峰)与对照组比较逐渐增加,但是其中对照组和100μg/ml组、100μg/ml和200μg/ml组比较差别无统计学意义(P>0.05),其它各组差别具有统计学意义(P<0.05)。4蒿甲醚对舌鳞癌细胞中Survivin的表达的影响。100ng/ml、200μg/ml、300μg/mlART作用于Tca8113细胞48h后,采用免疫细胞化学染色,显微镜下观察细胞胞浆着的棕黄色逐渐减弱而对照组细胞浆着色很深,胞浆呈现清晰的棕黄色,经过统计学分析,各组之间差异具有统计学意义(P<0.05)。5Survivin蛋白表达的结果Western-Blot检测显示：对照组和100μg/ml、200μg/ml的ART作用于Tca8113细胞48h后,Survivin蛋白的表达依次递减,经过统计学分析,各组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)结论：蒿甲醚对舌鳞癌细胞的生长有抑制作用且对其具有凋亡诱导作用,其作用机制可能与肿瘤细胞Survivin蛋白表达的下调有关。
【作者】韩峰楼；
【导师】葛志华；
【作者基本信息】承德医学院，病理学与病理生理学，2011，硕士
【关键词】蒿甲醚；Tca8113细胞；凋亡；Survivin蛋白；

【参考文献】
[1]王彦辉,刘海超,高雷,郭立伟,李书昌,谷友侠.轧制力优化对20辊冷轧硅钢厚度精度的影响[J].冶金自动化,2014,05:68-72.
[2]吴晓明.高校综合信息发布系统的设计与实现[D].中南大学,2002.
[3]朱金华.基于信息融合的目标跟踪算法研究[D].南京理工大学,控制理论与控制工程,2013,硕士.
[4]刘霞.基于Petri网的客机装配线建模方法研究[D].南京航空航天大学,机械电子工程,2013,硕士.
[5]陈超伟.柔性张拉整体结构振动最优控制及作动器优化配置[D].西安电子科技大学,机械设计及理论,2012,硕士.
[6]张鹏.腹围＜90cm患者上腹部增强CT低剂量检查：低电压自动管电流调节技术与图像质量的相关性研究[D].福建医科大学,临床医学,2014,硕士.
[7]王满生,杨威,赵作周,刘辉,陈俞,朱尔玉.两种农村砖木结构模型振动台试验比较分析[J].世界地震工程,2014,04:151-157.
[8]王英明.基于工作搜寻理论的大学生工作搜寻能力研究[D].河北经贸大学,行政管理,2012,硕士.
[9]刘有生.内蒙古地勘行业全面预算管理研究[D].内蒙古大学,公共管理,2013,硕士.
[10]施祝君.基于经济增加值的物流公司价值评估模型及应用研究[D].浙江工业大学,2011.
[11]王文明.2ZT-2型甜菜移栽机栽植过程的计算机辅助分析[D].内蒙古农业大学,农业机械化工程,2004,硕士.
[12]程冉冉.WDM光网络中基于节能的分段保护算法研究[D].大连海事大学,信息与通信工程,2013,硕士.
[13]刘德富,陈环宇,程广焕,邓经友,胡宝兰,楼莉萍.堆肥过程中胡敏素的变化及其对五氯苯酚(PCP)吸附能力的影响[J].浙江大学学报(理学版),2014,05:545-552.
[14]郝天天.电动汽车异步电机高效快响应控制策略的研究[D].长安大学,控制理论与控制工程,2014,硕士.
[15]刘晨熙.基于成本控制的预制节段梁生产运输方案决策研究[D].江苏科技大学,管理科学与工程,2013,硕士.
[16]祁凤燕.积雪草苷对NMDA诱导兴奋性神经毒性的保护作用及其机制研究[D].第四军医大学,药理学（专业学位）,2014,硕士.
[17]李思佳.河北秦皇岛市妇女小额贷款问题研究[D].云南财经大学,金融（专业学位）,2014,硕士.
[18]赵晓龙.安防系统中的基于稀疏表示的人脸识别研究[D].西北大学,计算机软件与理论,2014,硕士.
[19]吴晔,潘德惠.连续加热炉炉温自校正控制的实现[J].自动化学报,1993,01:111-114.
[20]张国富,温馨,王涌,莫卫民,丁成荣.氧化脱肟研究新进展[J].化学进展,2012,Z1:361-369.
[21]吴晓波.高中生“导数及其应用”学习障碍的探究[D].山东师范大学,教育（专业学位）,2013,硕士.
[22]瞿耀良.有关蔡伦发明造纸术的学术观点综述——对《30年代以来西汉纸张和纸质档案的重大发现综述》一文的一些质疑[J].档案学研究.1993(04)
[23]IssaBrownMpalla.钢丝网增强超高性能混凝土—混凝土组合柱轴压性能[D].哈尔滨工业大学,结构工程,2014,硕士.
[24]王佳.露井联采下边坡体变形机制的研究[D].北方工业大学,岩土工程,2014,硕士.
[25]杜春娟.战略资源国际化——我国石化企业的发展思路[D].吉林大学,国际贸易学,2004,硕士.
[26]吴美云.寒亭禹王台村狐仙信仰探究[D].山东大学,民俗学,2013,硕士.
[27]邱孟栋.MIMO-OFDM系统中PAPR降低算法的研究[D].扬州大学,信号与信息处理,2012,硕士.
[28]魏峰.亚铜配合物的光物理性质与电致发光性能研究[D].内蒙古大学,化学,2014,硕士.
[29]罗冰.王元化近40年学术思想研究[D].安徽师范大学,文艺学,2004,硕士.
[30]吕炯.跨文化传播视角下的大学英语教学模式探析[D].中国科学技术大学,传播学,2013,硕士.
[31]王青.基于神经网络的汉语语音情感识别的研究[D].浙江大学,2004.
[32]肖晨.拓展训练对少年排球队团队凝聚力影响的实验研究[D].首都体育学院,体育教学,2013,硕士.
[33]刘政凯.非均匀反投影重建方法[J].自动化学报,1989,03:278-281.
[34]于德海.虚拟手术系统中力反馈技术的设计与实现[D].山东大学,计算机软件与理论,2013,硕士.
[35]方勇,龙建忠,王勇,李军,策翁龙布.多媒体教学课件与教学改革创新[J].西南民族大学学报(人文社科版),2004,12:405-407.
[36]邱兴.骨质疏松性腰椎骨折骨水泥注入前后有限元分析[D].遵义医学院,骨外科学（专业型学位）,2012,硕士.
[37]阮钦杰.基于压缩感知技术的快速动态磁共振成像技术研究[D].杭州电子科技大学,控制工程,2014,硕士.
[38]吕宝中.兰石国民油井公司生产安全事故控制体系研究[D].兰州大学,国有企业管理,2012,硕士.
[39]李欣.求解线性方程组的总体（拟）极小向后扰动方法[D].南京航空航天大学,计算数学,2004,硕士.
[40]李越.表见代理理论及其司法实践问题研究[D].大连海事大学,法学,2013,硕士.
[41]武国帅.呼和浩特市建设服务型政府研究[D].内蒙古师范大学,公共管理（专业学位）,2013,硕士.
[42]于谨凯,刘世青.基于综合多样性指数的生物多样性安全评估及预警机制分析——以黄海近海海域为例[J].中国渔业经济,2013,04:153-160.
[43]黄妍.英国中世纪军事合同制的兴起[D].山东大学,世界史,2013,硕士.
[44]陈小兰.我国继承法上归扣制度研究[D].华侨大学,法律,2014,硕士.
[45]宋俊波.西南丘陵区乡村景观规划研究[D].西南大学,土地资源管理,2014,硕士.
[46]姜北北.基于全三维模型工艺设计技术[D].沈阳理工大学,机械工程,2013,硕士.
[47]阎秀峰,孙国荣,肖玮.生长不同年数星星草光合能力的比较研究[J].植物生态学报,1998,03:40-45.
[48]邱春丽,许宏丽.一种散乱点云空间直接剖分算法[J].计算机科学,2014,02:157-160+173.
[49]谭烁.2011年全国语文高考试卷语文知识类试题比较分析[D].东北师范大学,学科教学,2012,硕士.
[50]杨倩.基于EFDC的密云水库水环境及应急处理模型研究[D].中国地质大学（北京）,地下水科学与工程,2014,硕士.