人诱导多能干细胞（iPS cells）微流控芯片培养体系的建立

【摘要】诱导多能干细胞(Inducedpluripotentstemcells,简称iPScells)是通过将特定的转录因子导入分化的体细胞重编程而成,它的出现是生命科学领域的一次革命。将iPS细胞置于具有微型化、集成化和便携化等优势的微流控芯片上进行研究,将大大加快iPS细胞的研究进程。本研究旨在在微流控芯片中建立稳定的人诱导多能干细胞培养体系,并初步研究了pH对二乙酸荧光素(FDA)进入细胞的影响。本论文主要工作如下：1、分离并培养了小鼠胚胎成纤维细胞,并将传至P3代的小鼠胚胎成纤维细胞用浓度为10μg/mL的丝裂霉素C处理2.5小时,获得了适合人诱导多能干细胞生长的饲养层细胞。2、通过摸索人诱导多能干细胞克隆的特性,在体外建立了稳定的人诱导多能干细胞培养体系,并将其冻存后成功复苏。3、设计并制作了玻璃-玻璃微流控芯片和PDMS玻璃微流控芯片,并在其上培养了小鼠胚胎成纤维细胞和人诱导多能干细胞,为在芯片上进行进一步的干细胞分化研究提供了基础。4、普通培养皿和微流控芯片中未分化的人诱导多能干细胞碱性磷酸酶(AKP)染色均呈阳性,说明在微流控芯片中能建立稳定的人iPS细胞培养体系。5、通过采用三种不同的pH溶液(pH4、pH5和pH6)及三种处理细胞的时间(10min、20min和30min)来研究pH对二乙酸荧光素(Fluoresceindiacetate,简称FDA)进入细胞的影响,间接表明pH对细胞膜通透性或酯酶活性的影响。
【作者】谭登；
【导师】彭兴跃；
【作者基本信息】厦门大学，细胞生物学，2014，硕士
【关键词】微流控芯片；诱导多能干细胞；细胞培养；

【参考文献】
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