肠道病毒71型（EV71）与柯萨奇病毒A组16型（CA16）单克隆抗体治疗的可行性评价

【摘要】肠道病毒71型(EV71)与柯萨奇病毒A组16型(CA16)是引起儿童手足口病(HFMD)的主要病原体。近些年来,手足口病在我国的发病率逐年上升,由手足口病导致的重症感染和死亡人数也明显增加,严重危害了儿童的生命安全,因此急需有效的治疗性药物来治疗并控制其感染与流行。单克隆抗体由于具有毒性低、特异性高等优点,是治疗病毒性感染的良好的候选药物。本研究的目的为优化EV71的小鼠攻毒模型同时建立稳定的CA16小鼠感染模型,并利用动物模型筛选和评价具有治疗潜力的EV71及CA16治疗性单抗,为开展EV71及CA16治疗性药物研制提供基础。本研究首先对原有的EV71动物模型的攻毒方式和攻毒剂量进行了优化,使该模型能够达到稳定的100%致死率。同时利用13株CA16临床分离株对1日龄新生鼠进行攻毒评价,结果发现大多数CA16病毒对小鼠表现出了强毒力,攻毒小鼠表现出瘫痪和肢体麻痹等神经症状。病理学检测显示攻毒小鼠的大脑和脊髓等部位出现了严重的坏死与炎症,与CA16在人体内的感染情况极为相似。基于上述结果,本研究建立了通过灌胃注射CA16感染1日龄BALB/c小鼠的CA16小鼠感染模型,为开展后续研究提供了重要基础。本研究应用所建立的CA16攻毒模型对CA16中和单抗的体内治疗效果进行评价,并根据体内外实验的结果确立了一株候选的CA16中和单抗14B10。通过评价感染CA16后不同治疗时间点及治疗策略的效果发现,14B10在攻毒后2天内进行单针治疗能够达到超过90%的治疗存活率,而利用三针治疗方案则能够在攻毒后第3天、即小鼠开始发病前1天有效治疗小鼠,从而证实了14B10对CA16的感染具有良好的体内治疗能力。本研究进一步应用EV71攻毒模型对13株EV71中和单抗的体内治疗能力进行筛选评价,从而确立了一株EV71中和单抗CT11F9。通过对攻毒EV71后不同治疗时间和治疗策略的评价发现,CT11F9在攻毒后三天内进行单针治疗能够达到100%的存活率及健康率,而利用三针治疗方案则能够在攻毒后第4天、即小鼠开始发病时有效提高小鼠的存活率,且对瘫痪小鼠具有一定的治疗能力。通过与人血清的阻断ELISA实验发现,CT11F9识别的表位在人血清中是免疫优势的。至此证实了CT11F9对EV71感染具有良好的体内治疗能力。综上所述,本研究优化了原有的EV71动物模型的攻毒参数并建立了稳定的CA16小鼠感染模型,利用该模型成功筛选并获得了对EV71或CA16感染具有良好治疗能力的中和单抗。这些研究为研发EV71及CA16治疗性抗体提供了重要的数据支持与理论基础。
【作者】李志群；
【导师】李少伟；
【作者基本信息】厦门大学，生物化学与分子生物学，2014，硕士
【关键词】肠道病毒71型；柯萨奇病毒A组16型；动物模型；治疗性抗体；

【参考文献】
[1]赵齐羽,蒋天安,陈芬,叶争渡,李琚,邓壮.肝内胆管细胞癌的超声造影表现分析[J].肿瘤影像学,2014,01:5-7.
[2]房秀兰.居民参与社区治理的理性思考[D].苏州大学,行政管理,2014,硕士.
[3]张传艳.变变位系数齿轮传动理论研究[D].江苏师范大学,机械设计及理论,2013,硕士.
[4]陈韩根.室温固化浇注型HTPB胶粘剂弹性体的制备及性能研究[D].中北大学,高分子化学与物理,2014,硕士.
[5]本刊编辑部.美国《情报科学与技术年度评论》近几年选题情况[J].情报理论与实践,2003,05:482.
[6]江敏.中英教育博士培养方案的比较研究[D].湖南师范大学,比较教育学,2014,硕士.
[7]薛锋.旋流燃烧器的数值研究[D].南昌航空大学,航空宇航推进理论与工程,2013,硕士.
[8]冯薇.毛乌素沙地生物结皮光合固碳过程及对土壤碳排放的影响[D].北京林业大学,复合农林学,2014,博士.
[9]边艳蕊.儿童声带小结嗓音声学参数分析及保守治疗效果评估[D].河北医科大学,耳鼻咽喉科学（专业学位）,2014,硕士.
[10]刘天子.中国食品饮料业上市公司融资结构对投资行为影响分析[D].辽宁大学,金融学,2012,硕士.
[11]孔祥纬.基于支持向量机的我国家电企业创新能力评价指标体系研究[D].北京交通大学,2009.
[12]孙月玲.中国学生的家庭诸因素对其英语学习成果的影响[D].安徽师范大学,英语语言文学,2004,硕士.
[13]葛宇.基于SOPC和SD卡的嵌入式存储系统设计与实现[D].东北大学,电路与系统,2010,硕士.
[14]龙胜春,龙军,袁锋.无线传感器网络中基于面积矢量的数据压缩算法[J].计算机应用与软件,2014,07:109-111+163.
[15]徐思文.摄影作品在平面设计中的应用研究[D].湖南师范大学,艺术设计学,2014,硕士.
[16]朱虹.十六大以来农村民主政治发展现状及其推进路径研究[D].扬州大学,马克思主义基本原理,2011,硕士.
[17]林凌青.Cks1、Cks2对人类肝癌细胞系HepG2增殖与凋亡的影响[D].福建医科大学,临床检验诊断学,2014,硕士.
[18]沈超.碲化铋纳米材料的分子束外延法制备与薄膜热电性能测试[D].上海大学,凝聚态物理,2013,硕士.
[19]汪璐.雾聚合制备功能性棉织物表面的研究[D].浙江理工大学,材料学,2014,硕士.
[20]李京琴.我国创业板上市公司融资质量研究[D].石家庄经济学院,会计学,2012,硕士.
[21]高媛.东方主义的建构与解构[D].武汉理工大学,英语语言文学,2012,硕士.
[22]孙聪.PBF在骨肉瘤组织中的表达及其对骨肉瘤细胞增殖和转移影响的研究[D].第四军医大学,外科学,2014,硕士.
[23]谭永锦.钙离子对高MMP-9状态下心肌成纤维细胞的影响[D].广东药学院,内科学,2013,硕士.
[24]王谦.ERP工程中信息平台与管理平台匹配理论及能力评测研究[D].天津大学,2004.
[25]李洁然.社会空间视角下的失地农民城市适应问题研究[D].西北大学,社会学,2013,硕士.
[26]黄艳飞.相干型衍射光栅激光探测技术研究[D].中北大学,精密仪器及机械,2014,硕士.
[27]石玉萍.电子商务视角下新疆特色林果产品销售平台的应用研究[D].新疆农业大学,农业经济管理,2012,硕士.
[28]高亮,罗奇,徐旸,蒋函珂,曲村.道床断面尺寸对道床横向阻力的影响[J].西南交通大学学报,2014,06:954-960.
[29]丁海燕,温丹妮,王苗全,钱海丰.水稻抗铝机制的研究进展[J].生命科学,2013,05:532-537.
[30]高宝军.内蒙古甜菜产业发展及对策研究[D].中国农业科学院,农村与区域发展（专业学位）,2012,硕士.
[31]许陈莹.应用于纺织品数码功能整理的蓝光引发自由基聚合固化体系研究[D].浙江理工大学,纺织化学与染整工程,2014,硕士.
[32]陈月.垃圾焚烧填埋场选址环境风险的法律规制[D].宁波大学,法律,2014,硕士.
[33]王艳冰.我国农村土地征收补偿制度研究[D].华侨大学,公共管理（专业学位）,2014,硕士.
[34]郝学军.铁路多经效益型物流组织理论与实践研究[D].北京交通大学,2011.
[35]张鑫淼.银行消费者权益保护问题研究[D].北京交通大学,法律,2013,硕士.
[36]李江涛.鞍山钢铁集团公司纳税筹划研究[D].辽宁科技大学,企业管理,2012,硕士.
[37]裘慰(厂廷).地震勘探新技术及典型地震剖面展览会介绍[J].石油地球物理勘探,1981,01:102.
[38]王雪缙.张爱玲与笔下人物的生存哲学及她的终极信仰[D].西南大学,中国现当代文学,2013,硕士.
[39]孟博,井元伟,刘晓平.基于奇异摄动理论的非仿射系统的输出调节问题[J].控制与决策,2009,02:259-263.
[40]黄山.被害人承诺能力判断因素初探[D].中国社会科学院研究生院,刑法学（专业学位）,2014,硕士.
[41]李志彦.高可靠TagTree编码VLSI研究[D].西安电子科技大学,通信与信息系统,2012,硕士.
[42]王红岩.体节发生相关通路的系统生物学建模研究[D].东北师范大学,细胞生物学,2014,博士.
[43]赵启明.唇形亚纲植物ANS基因结构与功能分析及分子进化研究[D].西南交通大学,生物化学与分子生物学,2013,硕士.
[44]马麒胜.市场经济下的西安兵器博物馆设计研究[D].西安建筑科技大学,建筑与土木工程,2013,硕士.
[45]达勇.大明宫国家遗址公园景观设计研究[D].陕西科技大学,设计艺术学,2013,硕士.
[46]夏正.基于供给视角的农民工就业问题研究[D].江西农业大学,农业经济管理,2012,硕士.
[47]姜建生.企业信息化初析[A].中国科学技术协会、吉林省人民政府.新世纪新机遇新挑战——知识创新和高新技术产业发展（上册）[C].中国科学技术协会、吉林省人民政府:,2001:1.
[48]梁建强.政府应对突发事件的舆论引导程序研究[D].华中科技大学,新闻学,2013,硕士.
[49]张旭东.基于小波分析的地方电网谐波检测方法研究[D].西安科技大学,应用数学,2014,硕士.
[50]贺浩.虚拟财产的刑法保护[D].山东大学,法律（专业学位）,2013,硕士.