大豆疫霉和棉花黄萎菌几个效应因子的分泌和转录激活活性的验证与靶标蛋白鉴定

【摘要】大豆疫霉菌(Phytophthorasojae)是卵菌的重要模式种,引起的大豆疫霉根腐病是世界上广泛分布的毁灭性病害。研究大豆疫霉与植物的互作机制,对于防治植物卵菌病害意义重大。棉花黄萎病由大丽轮枝菌(Verticilliumdahliae)引起,是棉花生产上危害最为严重的世界性病害之一,在世界各主要产棉区均有发生,极大地限制着棉花产量和质量的提高,也是困扰我国棉花生产的重大难题。卵菌和真菌植物病原物分泌的效应因子会被转运到植物细胞中在病害扩展和植物抗病反应中起作用。大豆疫霉菌的PsISO基因和大丽轮枝菌的VdISO基因都可以编码异分支酸水解酶蛋白。PsCRN108和PsCRN78是大豆疫霉的CRN家族效应因子。这四个蛋白是否分泌还尚不清楚,本文应用酵母分泌系统对PsISO,VdISO,PsCRN108和PsCRN78四个基因的分泌功能进行了检测,结果证明它们在酵母中具有分泌功能,说明它们在病原物侵染植物中也具有分泌能力,为进一步研究这几个效应蛋白在致病过程中发挥作用奠定了基础。转录因子是在基因表达过程中对基因的转录起激活或抑制的作用的反式作用因子。本实验室应用生物信息学的方法研究大豆疫霉的效应因子的功能,发现Avh138,Avh256,Avh454,Avh62,CRN108几个效应因子可能具有转录激活活性,实验通过酵母细胞测试几个的效应因子的转录激活活性,但在酵母中没有检测到几个基因的转录激活活性。本实验采用酵母双杂交技术,以大豆疫霉P6497菌株中的CRN115为诱饵蛋白,在大豆cDNA文库中进行寄主靶标的筛选,并验证了本实验室前期应用免疫共沉淀的方法筛选到的互作蛋白。结果表明PsCRN115可能与a-tublin、CAT1a互作。通过对PsCRN115.PsCRN63和烟草和大豆中的CAT三者的互作关系的研究,发现PsCRN115与PsCRN63不互作,PsCRN115与烟草中的CAT1a互作,PsCRN63与烟草中的CAT1a、CATlb互作,这为研究相关效应因子的功能提供了线索。
【作者】刘沛菡；
【导师】窦道龙；
【作者基本信息】南京农业大学，植物病理学，2013，硕士
【关键词】大豆疫霉；黄萎菌；效应因子；酵母双杂交；转录因子；蛋白质分泌；

【参考文献】
[1]赵丹阳.加油站埋地储油罐爆炸数值模拟[D].长安大学,结构工程,2014,硕士.
[2]孙男男.农村土地整治项目社会评价[D].南京农业大学,土地资源管理,2012,硕士.
[3]薛英林,徐政,李普明,黄莹,黎小林.高压直流输电双调谐滤波器阻尼电阻的选取原则[J].电力系统自动化,2011,13:92-97.
[4]王照,任雁铭,高峰,张阳志.IEC61850客户端应用程序的实现[J].电力系统自动化,2005,19:76-78.
[5]马静花.乡镇层面的新农村建设模式研究[D].山西师范大学,自然地理学,2013,硕士.
[6]李俊.水质型缺水地区水资源短缺预警模型研究[D].扬州大学,水文学及水资源,2011,硕士.
[7]郭希.后勤保障管理信息系统[D].重庆大学,2005.
[8]王宇静.转企改制下能源类行业报发展策略探讨[D].南京大学,新闻学,2013,硕士.
[9]吴礼平.网络购物中服务补救与顾客满意关系研究[D].浙江工商大学,企业管理,2013,硕士.
[10]靳少华,李忠厚,闫志强.我国机车修制改革的新突破[J].中国铁路.2002(11)
[11]包琼琼.基于复杂曲面的超精密金刚石切削技术研究[D].浙江理工大学,机械设计及理论,2013,硕士.
[12]吴明丽.营口化学纤维厂质量管理系统分析和优化[D].大连理工大学,工商管理,2003,硕士.
[13]朱晓林.国内传统中小型服装零售店铺现状调查及未来发展模式研究[D].吉林大学,服装设计与工程,2014,硕士.
[14]刘晓蕾.肺癌EGFR基因突变检测方法的建立及临床应用[D].辽宁医学院,临床检验诊断学,2012,硕士.
[15]张秀玲.中粮肇东公司物资储运实施5S现场管理的研究[D].吉林大学,工业工程,2014,硕士.
[16]马雪.5d过渡金属二氮化物力学性能和电子结构的第一性原理计算[D].东北师范大学,凝聚态物理,2012,硕士.
[17]张丽娟.刘崧与元明之际台阁文学[D].首都师范大学,中国古代文学,2013,硕士.
[18]祝淑君.图书馆活体资源-Human Library发展研究[D].安徽大学,图书馆学,2014,硕士.
[19]徐继刚.ZXSS10A200内存数据库快速索引算法的实现[D].南京理工大学,2004.
[20]徐波.延迟线型SAW传感器的相位提取算法研究[D].重庆大学,通信与信息系统,2014,硕士.
[21]叶绍兴.关联交易下小股东权利保护与公司内部治理[D].南京大学,法律（专业学位）,2012,硕士.
[22]陶本苞.几种复杂拉深零件工艺方法的选择[J].航空工艺技术.1993(05)
[23]巩冰.感性加载的小型化天线和极宽带天线分析与设计[D].西安电子科技大学,电磁场与微波技术,2013,博士.
[24]顾伟.云计算在电子商务行业的应用研究[D].上海外国语大学,工商管理,2012,硕士.
[25]孟瑶.当代中国艺术资本化运作策略研究[D].浙江理工大学,美术学,2014,硕士.
[26]李汉清,刘振宇,赵霞.石墨烯技术产业现状及发展建议[J].情报探索,2014,02:52-56.
[27]蔡忠福.基于2011年肺腺癌国际多学科分类探讨EGFR突变在病理亚型的分布及其与EGFR-TKIs疗效相关性研究[D].福建医科大学,肿瘤学,2014,硕士.
[28]冯赫.关于战略性新兴产业发展的若干思考[J].经济研究参考,2010,43:62-68.
[29]刘静.乙二胺四乙酸铁铵固体盐的制备与应用研究[D].天津大学,化学工程,2003,硕士.
[30]聂海英.湿性敷料在糖尿病足溃疡换药中的应用[D].吉林大学,护理学,2014,硕士.
[31]王小艳.中国荷斯坦奶牛泌乳相关营养代谢组学研究[D].东北农业大学,基础兽医学,2013,硕士.
[32]赵永光.新型掺钕钒酸盐与硅酸盐晶体光谱及全固态激光特性研究[D].山东大学,凝聚态物理,2014,博士.
[33]吴志玲.基于CAN总线的数据采集节点设计与实现[D].中北大学,通信与信息系统,2013,硕士.
[34]陈淦.克拉玛依-百口泉油田砾岩油藏剩余油分布的控制因素[J].新疆石油地质.1993(04)
[35]李冰.基于DSP的新型发变组故障录波器的研究[D].华北电力大学（河北）,电力系统及其自动化,2004,硕士.
[36]赵燕峰.风电变流器中IGBT的可靠性研究[D].西南交通大学,电气工程,2012,硕士.
[37]李罗君.新生代员工心理资本与敬业度的关系研究[D].杭州电子科技大学,企业管理,2014,硕士.
[38]张小凤,王孝洪,田联房,孙万里.基于分数阶PI~λ控制器的有源电力滤波器直流侧电压控制[J].电力系统自动化,2013,16:108-113+124.
[39]赵昂彬.基于SCP范式的舟山市休闲渔业市场分析[D].宁波大学,农村区域领域（专业学位）,2014,硕士.
[40]石亮.新型吸波剂的制备与表征[D].湖南工业大学,2014.
[41]郭素娴.智慧城市评价指标体系的构建及应用[D].浙江工商大学,统计学,2013,硕士.
[42]布音吉尔格丽.论第三人侵害债权制度[D].新疆大学,法律,2013,硕士.
[43]刘智鹏.聚苯胺—碳纳米管内修饰复合材料的制备及气体传感器的应用[D].苏州大学,高分子化学与物理,2014,硕士.
[44]张磊.高中英语写作教学中的教师反馈调查研究[D].首都师范大学,学科教学,2013,硕士.
[45]张振峰.小鼠肝脏耐热蛋白的初步研究[D].华东师范大学,生物化学与分子生物学,2004,硕士.
[46]柳进,胡政,唐降龙.OLAP数据仓库在电网调度决策中的研究与应用[J].计算机工程与设计,2005,02:296-298+311.
[47]王衬,毛黎娟,惠非琼,章初龙,楼兵干,林福呈,刘萍萍,陈霞,周会娜.不同氮素水平下内生真菌印度梨形孢定殖对烟草生长发育及物质代谢的影响[J].烟草科技,2014,05:76-81+98.
[48]章策珉.无线射频接收前端的分析和设计[D].浙江大学,物理电子,2004,硕士.
[49]刘文霞,张蕾蕾,刘宗歧,贺健.城市纯电动汽车发展模式论证方法[J].电力系统自动化,2014,24:34-40.
[50]秦静.公共图书馆社会责任的内涵及评价体系研究[D].安徽大学,图书馆学,2013,硕士.