溴苯腈降解菌的分离筛选、降解特性及其固定化细胞研究

溴苯腈降解菌的分离筛选、降解特性及其固定化细胞研究

作者:师大云端图书馆 时间:2018-09-10 分类:硕士论文 喜欢:2492
师大云端图书馆

【摘要】溴苯腈(Bromoxynil)是具有一定内吸性的触杀型除草剂,对动物和人类有潜在的危害。本论文使用农药厂废水处理池中的活性污泥,经过多次富集转接,通过紫外扫描检测,得到溴苯腈降解效果明显的富集液。通过稀释涂布、平板划线,从富集液中分离得到一株能降解溴苯腈的菌株,命名为XBJ,该菌为革兰氏阴性菌,在LB平板上生长良好。根据菌株形态、生理生化特性以及16SrRNA基因序列同源性比较,将XBJ菌株初步鉴定为中间苍白杆菌(Chrobactrumintermediu)。菌株XBJ接种于LB液体培养基中,6h后菌株进入生长对数期,13h后进入稳定生长期;其最适生长温度为30℃,最适pH7.0,装液量越少,溶解氧越多,对菌株的生长越有利;菌株在NaCl浓度为0-10g·L-1范围内生长很好,超过15g·L-1后,NaCl浓度的增加导致菌株生长量减少,菌株生长明显受到了抑制。菌株XBJ对有机氮源的利用率较高,当碳源为葡萄糖时,菌体生长最好,菌株XBJ对氨苄青霉素和氯霉素有抗性,对其它抗生素均比较敏感,生长受到严重影响。菌株XBJ能以溴苯腈为碳、氮源生长,培养72h后可将100mg·L-1溴苯腈完全降解。该菌株降解溴苯腈的最适宜温度是30℃、最适pH为7.0。在25-35℃的范围内,菌株对溴苯腈的降解率都在70%-95%;通气量对降解的影响很小,随着溴苯腈浓度的提高,降解速率减缓;提高接种量,菌体数量增加,可以加快对溴苯腈的降解。经质谱分析检测,初步确定溴苯腈的降解途径为:溴苯腈在腈水解酶的作用下水解生成3,5-二溴-4-羟基苯甲酸;3,5-二溴-4-羟基苯甲酸发生脱溴反应,生成3-溴-4-羟基苯甲酸。细胞固定化是在固定化酶技术的基础上发展起来的,通过物理或化学方法把游离细胞或酶固定在某些不溶于水的载体上,保持细胞的原有活性并且可以重复利用的技术。对XBJ降解菌的细胞固定化条件进行研究表明,海藻酸钠溶液和CaCl2溶液浓度均为2%,包菌时接入的种子液量为5mL,于4℃冰箱中交联12h,此条件下制得的固定化小球具有适当的机械强度和结构,不易破裂;小球中的细菌密度适中,活性高,对溴苯腈的降解率较高。与游离细菌相比较,固定化菌体对pH和温度的耐受范围更广。
【作者】苏昱;
【导师】蔡天明;
【作者基本信息】南京农业大学,环境科学,2013,硕士
【关键词】溴苯腈;微生物降解;中间苍白杆菌XBJ;固定化;

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