葡萄黑色芽变品种巴西（Brazil）果皮颜色突变的分子机制初探

【摘要】本研究以白色品种意大利(Italia)、红色品种红高(Benitaka)和黑色品种巴西(Brazil)为试验材料,检测了VvmybA1的基因型以及VvmybA1和UFGT基因在不同着色时期的表达量,克隆了意大利、红高和巴西中的VvmybA1完整的启动子和编码区序列,并进行功能验证,以期探究黑色芽变品种巴西果皮颜色变化的原因。具体研究结果如下：1.为了鉴定意大利、红高和巴西之间的亲缘关系,筛选了22对多态性较好的SSR引物进行SSR分析。结果表明：22对SSR引物在三种葡萄中扩增出的等位基因条带大小完全一致,表明意大利、红高和巴西之间的亲缘关系极为紧密,从而验证了红高和巴西均为意大利的芽变品种。2.PCR结果发现在VvmybA1位点,意大利含有纯和的VvmybA1a(1559bp)、红高和巴西含有杂合的VvmybA1a和VvmybA1BEN(926bp)。采用荧光定量技术分析VvmybA1和UFGT在三种材料中的相对表达情况,发现二者在白色品种意大利中几乎检测不到,在有色品种中表达模式一致,即从着色后开始表达,并且在黑色品种中表达量高于红色品种。3.从三个品种中克隆了VvmybA1完整的启动子和编码区序列,用BioXM2.6同已知序列进行比对,并且利用PlantCare和Place在线分析软件进行启动子预测,发现在红高和巴西的启动子区域存在一个碱基的差异,且差异位点恰好在3-AF1bindingsite这个光响应原件中。将三种材料的VvmybA1启动子和编码区连接到PYH4215植物表达载体中,并且切除35S启动子,使用农杆菌介导法介导重组载体转化汤普森无核(CentennialSeedless)(葡萄体细胞胚,弱光培养7-10天后,导入巴西与红高VvmybA1的体细胞胚有红色斑点产生,导入意大利VvmybA1的体细胞胚无变化。说明特异性等位基因VvmybA1BEN能够恢复VvmybA1的转录功能。
【作者】江楠；
【导师】陶建敏；
【作者基本信息】南京农业大学，果树学，2013，硕士
【关键词】巴西；红高；颜色突变；VvmybA1BEN；

【参考文献】
[1]张俊.抗肿瘤药物盐酸埃罗替尼的合成研究[D].浙江理工大学,有机化学,2013,硕士.
[2]杨玲玲,章云,陈贞丰.基于输出反馈的双线性控制系统[J].控制与决策,2011,10:1549-1552+1561.
[3]齐波.生态补偿机制的法律分析[J].中国地质大学学报(社会科学版),2014,s1:106-107+125.
[4]何建建.原发性高血压患者室性心律失常发生机制的探讨[D].河北医科大学,内科学,2013,硕士.
[5]王乐勋.变革型领导与员工创造力的关系研究[D].浙江理工大学,企业管理,2013,硕士.
[6]王瑾.局域掺杂光子晶体缺陷模透射峰的仿真及分析[D].中北大学,凝聚态物理,2014,硕士.
[7]陈小虎.钢材表面HVOF热喷涂WC-Co涂层的制备及其性能研究[D].南京航空航天大学,材料学,2014,硕士.
[8]俞伦鹏,刘世昌.材料红外辐射特性的评价方法[J].宇航计测技术.1997(06)
[9]董玉卓.马克思主义哲学视域下的堕胎问题研究[D].哈尔滨工业大学,马克思主义哲学,2013,硕士.
[10]张立勇.开孔泡沫铝孔结构及力学性能研究[D].合肥工业大学,材料加工工程,2004,硕士.
[11]张晶.跨国垄断对我国大豆市场价格影响的研究[D].浙江大学,国际商务（专业学位）,2013,硕士.
[12]丁健.乡镇政府执行力研究[D].西北农林科技大学,农村与区域发展,2012,硕士.
[13]徐仲夫.基于可重构技术的车载电子系统设计[D].哈尔滨理工大学,仪器仪表工程,2013,硕士.
[14]王莉莉.公租房换租决策模型研究[D].重庆大学,管理科学与工程,2014,硕士.
[15]晋龙兴,李银红,石东源,杨增力,王友怀.基于虚拟阻抗矩阵和边界节点迁移的在线校核分区方法[J].电力系统自动化,2013,06:96-101.
[16]鱼爱梅.新时期中国廉政文化建设研究[D].延安大学,马克思主义哲学,2014,硕士.
[17]刘瑞强.基于切换的一类网络控制系统鲁棒指数稳定性分析[D].东北大学,控制理论与控制工程,2010,硕士.
[18]魏国财.塔北塔中地区志留系剥蚀厚度恢复及古构造分析[D].中国地质大学（北京）,石油与天然气工程,2014,硕士.
[19]王飞.内热式蒸汽回转干燥机内流场温度场数值模拟[D].东北大学,机械电子工程,2011,硕士.
[20]江术新.MW级风电机组变桨系统动力学及结构仿真分析[D].重庆大学,机械设计及理论,2014,硕士.
[21]陈一飞.数据挖掘和神经网络在生产成本决策系统中的应用研究[D].南京航空航天大学,2003.
[22]王洋.城镇化背景下的农村居民点用地布局研究[D].中国地质大学（北京）,土地资源管理,2013,硕士.
[23]陶明山.双羧基甜菜碱型两性表面活性剂的合成及性能研究[D].安徽大学,有机化学,2014,硕士.
[24]杜文娟.光频超衍射传输人工材料设计和表征分析方法研究[D].中国科学院研究生院（光电技术研究所）,光学工程,2014,硕士.
[25]孙君武.预报式模糊控制在热处理电阻炉温控中的应用[J].控制与决策,1999,03:85-89.
[26]张少杰.无线网络中的多信道MAC协议和带宽自适应技术研究[D].国防科学技术大学,军事通信学,2012,硕士.
[27]郝雅莉.案例教学法在《美术教学论》课程中的理论研究与运用[D].华南师范大学,美术教育学,2004,硕士.
[28]赵慧慧.Fe_2O_3-AgBr纳米纤维光催化剂的设计、合成和光催化性能研究[D].东华大学,2015.
[29]赵彦伟.以联二萘酚和苯甘氨酸衍生物为手性源制备手性微孔和介孔二氧化硅[D].苏州大学,有机化学,2012,硕士.
[30]王杰志.阜新市城市绿地系统规划[D].辽宁工程技术大学,建筑与土木工程,2004,硕士.
[31]唐童.几类可压缩流体方程组研究[D].南京师范大学,应用数学,2014,博士.
[32]杨炳忻.香山科学会议第367—371次学术讨论会简述[J].中国基础科学,2010,04:29-34.
[33]叶涛锋,达庆利.批量到达及不完美信息条件下损失系统的准入控制[J].控制与决策,2011,07:1041-1045+1050.
[34]金炜凯.基于用户行为的住宅卫浴产品设计研究[D].浙江工业大学,2012.
[35]李丹芝.生产服务业与制造业的互动关系[D].广东外语外贸大学,世界经济,2013,硕士.
[36]李雨聪.油罐车运输过程视频监控技术研究[D].河南科技大学,计算机应用技术,2013,硕士.
[37]张文.从语义—句法和语篇—句法界面看中国学习者对英语空宾语结构的习得[D].中国海洋大学,外国语言学及应用语言学,2014,硕士.
[38]阮兢青.民营企业治理结构模式研究[D].西南交通大学,工商管理（专业学位）,2014,硕士.
[39]胡月月.一项基于语料库的英汉“给予类”双及物构式对比研究[D].安徽大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[40]吕华军.A房地产公司薪酬体系设计[D].山东大学,项目管理（专业学位）,2012,硕士.
[41]梁雪.从关联理论的视角研究英语笑话中的言语幽默[D].辽宁大学,外国语言学及应用语言学,2012,硕士.
[42]王刚.陕西省人力资本与经济增长关系研究[D].西北大学,西方经济学,2014,硕士.
[43]高山.组件化FMS远程诊断系统研究与应用[D].西北工业大学,机械电子工程,2004,硕士.
[44]甘海军.浙江省城市污泥的处置对策与资源化利用研究[D].浙江大学,2006.
[45]吴作君.钢铁厂自备电厂孤网稳定运行研究[D].安徽大学,检测技术与自动化装置,2013,硕士.
[46]王月,安明喆,余自若,韩松.活性粉末混凝土冻融循环前后NaCl溶液的吸入特性[J].哈尔滨工业大学学报,2015,04:71-75.
[47]梁汉坚.黄芪桂枝五物汤治疗桡神经深支损伤术后的疗效观察[D].广州中医药大学,中医骨伤科学（专业学位）,2013,硕士.
[48]芦伟,贾玉萍,林菁菁,陈莲莲,郭丽伟,陈小龙.SiC(000-1)面上外延石墨烯的特征[A].中国物理学会X-射线衍射专业委员会、中国晶体学会粉末衍射专业委员会、国家自然科学基金委员会工程与材料科学部、北京市硅酸盐学会、中国科学院物理研究所、InternationalCentreforDiffractionData,USA.第十一届全国X射线衍射学术大会暨国际衍射数据中心（ICDD）研讨会论文摘要集[C].中国物理学会X-射线衍射专业委员会、中国晶体学会粉末衍射专业委员会、国家自然科学基金委员会工程与材料科学部、北京市硅酸盐学会、中国科学院物理研究所、InternationalCentreforDiffractionData,USA:,2012:1.
[49]陈晓琴.基于概率神经网络的潜在客户数据挖掘应用研究[D].重庆交通大学,管理学,2011,硕士.
[50]贾爱梅.我国企业的顾客资本管理研究[D].哈尔滨工程大学,2004.