腺苷酸活化蛋白激酶在冬凌草甲素诱导结肠癌细胞凋亡中的作用及机制研究

【摘要】背景：研究腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）在冬凌草甲素体外诱导结肠癌细胞凋亡中的作用及机制。方法：浓度为1-50μmol／L的冬凌草甲素分别作用结肠癌HT-29细胞，组蛋白-DNAELISA法检测冬凌草甲素诱导的结肠癌细胞凋亡率。分光光度法检测作用后的结肠癌细胞Caspase-3活性，Westernblot测定冬凌草甲素作用的肿瘤细胞AMPK及其他凋亡相关蛋白表达。结果：不同浓度冬凌草甲素作用于结肠癌HT-29细胞后，结肠癌细胞发生凋亡。随着药物浓度增加，细胞凋亡率也逐渐增加（p<0.05），且结肠癌细胞Caspase-3的活性也逐渐增加（p<0.05）。随着作用时间增加，肿瘤细胞p-AMPKa蛋白条带逐渐变深变粗。冬凌草甲素作用的转染AMPKαsiRNA的细胞凋亡率（26.33±5.03）％低于转染错义siRNA的细胞凋亡率（84.4±9.7）％，随着冬凌草甲素浓度的增加，p53蛋白磷酸化激活增加。冬凌草甲素作用于转染AMPKαsiRNA的结肠癌HT-29细胞，p-p53（Ser15）的蛋白条带变深变粗，但较转染错义siRNA（sc-shRNA）的蛋白表达明显变浅。差异有统计学意义（p<0.05）。结论：本研究明确冬凌草甲素作用于结肠癌细胞后会导致结肠癌细胞凋亡，凋亡机制与AMPK磷酸化激活有关。AMPK激活以后导致p53磷酸化激活，并导致S6K、S6抑制，进而导致Caspase-3凋亡蛋白磷酸化激活导致肿瘤细胞凋亡。
【作者】许隽颖；
【导师】陶敏；
【作者基本信息】苏州大学，肿瘤学，2014，硕士
【关键词】腺苷酸活化蛋白激酶；冬凌草甲素；结肠癌；

【参考文献】
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