TLR2、TLR4在铜绿假单胞菌慢性肺部感染中的免疫损伤机制

【摘要】背景与目的铜绿假单胞菌是（Pseudomonasaeruginosa,PA）是一种临床上常见的机会致病菌，也是肺部感染常见的病原菌。由于其极强的适应能力和适时多变的毒力，常使得肺部炎症迁延难易治愈。Toll样受体（TolllikereceptorsTLRs）是一类病原模式识别受体(patternrecognitionreceptors，PRRs)，可识别病原体相关分子模式(pathogen-associatedmolecularpatterns，PAMPs)，其中TLR2（Toll-likereceptor2），TLR4（Toll-likereceptor4）可识别革兰阴性杆菌的特异成分脂多糖（lipoolysaccharide,LPS），但它们在铜绿假单胞菌慢性肺部感染的免疫损伤中机制并不明确。长期低剂量大环内酯类抗生素可改善PA慢性感染患者的肺功能和临床症状，但其对PA慢性肺部感染后TLR2，TLR4的免疫机制尚未见报道。为此，本文将拟从分子水平、细胞水平、器官水平研究Toll样受体在PA慢性肺部感染中的免疫病理损伤机制，及低剂量阿奇霉素相关免疫机制调节。方法：1.Balb/c小鼠随机气道接种含有铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa,PA）琼脂糖珠（PA组）和无菌琼脂糖珠（对照组）。于接种后第1、3、5、7、14天处死小鼠，行肺组织细菌培养、肺泡灌洗液白细胞计数和肺组织病理检查，ELISA检测肺泡灌洗液（bronchoalveolarlavagefluid，BALF）中白介素（interleukin,IL）-6和白介素(interleukin,IL)-17的含量，用real-timePCR检测TLR2mRNA及TLR4的mRNA表达。探讨TLR2mRNA,TLR4mRNA在铜绿假单胞菌慢性感染小鼠肺内的动态改变及其作用。2.采用气道接种含铜绿假单胞菌（PseudomonasaeruginosePA）的琼脂糖Balb/c小鼠，感染后第7天起分别予低剂量阿奇霉素和生理盐水治疗，感染后第7、10、14天分别进行支气管肺泡灌洗液中的炎性因子IL-6和IL-17的ELISA检测以及肺组织TLR4mRNA表达水平的定量PCR分析，同时进行肺组织细菌培养、肺泡灌洗液白细胞计数和肺组织病理检查。接种无菌PA琼脂糖的小鼠做空白对照组。分析低剂量阿奇霉素对感染铜绿假单胞菌小鼠的肺组织TLR4表达及相关炎症因子的影响。结果：1.PA组在接种后第3天IL-6和IL-17均达高峰，两者在接种后第14天仍处于高水平。PA组中TLR4的mRNA相对表达第7天达高峰,第14天仍高于对照组。TLR2的mRNA在各时间点PA组和对照组相比变化均不明显。2.AZM组的小鼠在治疗后肺部感染症状明显改善。感染后第7天，感染PA小鼠肺组织病理损伤程度、细胞因子及TLR4mRNA表达均高于对照组。感染后第10、14天，阿奇霉素组的小鼠IL-6、IL-17及TLR4mRNA的表达量显著低于同时间点的生理盐水组的表达量。第14天时，阿奇霉素组小鼠的IL-17已降至对照组IL-17水平。结论：1.TLR4与小鼠肺部慢性感染PA的发生发展密切相关，其机制与TLR4参与肺的免疫损伤中有关。2.在PA慢性感染初期，低剂量阿奇霉素的治疗可通过下调TLR4表达进而发挥抗炎作用。
【作者】纪晓莉；
【导师】沈策；
【作者基本信息】苏州大学，内科学，2014，硕士
【关键词】铜绿假单胞菌；阿奇霉素；TLRs；慢性肺部感染；

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