野菊花对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶活性的影响

【摘要】本实验以牙龈卟啉单胞菌作为研究对象，选用野菊花粗提物，研究野菊花对牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonasgingivalis，P.g）的生长是否有抑制作用，并探讨其对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶(trypsin-likeprotease，TLP)活性是否有影响及影响程度，为野菊花在临床应用治疗牙周炎提供理论依据。本实验以P.gATCC33277作为实验菌株，采用液体二倍稀释法进行药敏实验，测定野菊花对P.g的最小抑菌浓度（MIC）；以此浓度为参考，配制牛心脑浸液培养基（BHI），加入不同浓度的野菊花粗提物和一定浊度的P.g菌悬液，野菊花粗提物中浓度分别为l/2MIC、l/4MIC和l/8MIC，P.g浓度为10８CFU/ml，在37℃恒温条件下厌氧培养48小时，离心后收集培养物上清液，并将剩余菌细胞超声破碎，收集菌细胞破碎后上清液，测定培养物上清液和菌细胞破碎后上清液中TLP活性及蛋白含量，计算TLP的比活。结果显示野菊花粗提物对P.g的生长有明显的抑制作用，在P.g数量为10８CFU/ml时，野菊花粗提物的MIC为1.25mg/ml。P.g的TLP存在两种形式：分泌到细胞外的游离态和与菌细胞结合的结合态，TLP主要以与菌细胞结合的结合态形式存在。P.g结合态TLP水解蛋白的能力比游离态强，其酶比活随野菊花粗提物浓度升高而降低。通过本实验可得到结论：野菊花粗提物对P.g的生长有抑制作用，对P.g结合态TLP活性有明显的抑制作用，高浓度的野菊花粗提物对P.g游离态TLP活性有明显抑制作用，但低浓度的野菊粗提物花对其抑制作用不明显。
【作者】陈春雨；
【导师】马宁；
【作者基本信息】吉林大学，口腔临床医学，2014，硕士
【关键词】野菊花；牙龈卟啉单胞菌；胰酶样蛋白酶；最小抑菌浓度；

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