缝隙连接蛋白36在癫痫中的作用

缝隙连接蛋白36在癫痫中的作用

作者:师大云端图书馆 时间:2019-09-24 分类:参考文献 喜欢:2605
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【摘要】目的:癫痫是一种由多种病因引起的慢性脑部疾患,以神经元过度同步放电导致反复、发作性和短暂性的中枢神经系统功能失常为特征。缝隙连接在癫痫发病过程中发挥重要作用。本实验拟在建立PTZ诱导的癫痫大鼠模型的基础上,用缝隙连接通道阻断剂CBX进行干预处理,观察记录各组大鼠行为学、脑电图变化,并检测痫性发作后不同时间点Cx36及Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达变化,进一步探讨缝隙连接蛋白在癫痫发作中的作用。方法:以大鼠腹腔内注射戊四氮制备急性癫痫模型为研究对象,将大鼠随机分为空白对照组、PTZ组、CBX组。采用HE染色、免疫组织化学染色、Westernblot法等测定Cx36在痫性发作后不同时点(2h、4h、8h、12h、24h)的表达的变化,并用上述方法检测致痫24h后Caspase-3、Bcl-2、Bax在三组间表达的差异以及DAPI染色检测细胞凋亡。结果:1、PTZ组和CBX组大鼠造模成功,脑电图均显示异常,出现棘波、多棘、多尖、尖-慢综合波等痫性电波。2、免疫组织化学染色显示,大鼠皮质以及海马区均可以见到大量Cx36免疫阳性细胞,免疫反应产物主要分布于神经元的胞浆内。Cx36表达变化以海马CA1和CA3区为明显,Cx36蛋白表达在PTZ和CBX组均从致痫后2h开始增多,并持续至24h。PTZ组和CBX组分别与对照组同一时间点比较,海马CA1、CA3区Cx36表达增多具有统计学意义,CBX组与PTZ组各时间比较,无显著差异。3、Westernblot检测结果显示,Cx36蛋白表达在PTZ和CBX组均从致痫后2h开始增多,并持续至24h,与免疫组织化学染色结果一致。PTZ组和CBX组大鼠在致痫24h后,Caspase-3,Bax蛋白表达增高,Bcl-2蛋白表达降低,CBX组与PTZ组比较,Caspase-3,Bax蛋白表达明显减少,Bcl-2蛋白表达较多。结论:1.PTZ诱导的急性癫痫大鼠模型中,对照组模型组的Cx36在皮质以及海马区均大量表达。模型组的Cx36的表达强度明显高于对照组。PTZ组与CBX组间表达无差异。2.Cx36表达及时程变化以海马CA1和CA3区为明显,在PTZ致痫后2h开始增多,并持续增多至24h。3.PTZ诱导的急性癫痫大鼠模型出现神经元凋亡,CBX阻断缝隙连接通道的功能,减轻癫痫导致的神经元凋亡的出现。
【作者】王晨;
【导师】高振平;
【作者基本信息】吉林大学,人体解剖学与组织胚胎学,2014,硕士
【关键词】缝隙连接蛋白;癫痫;缝隙连接;

【参考文献】
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