内质网应激—自噬反应减轻NRK-52E细胞过蛋白负荷损伤

内质网应激—自噬反应减轻NRK-52E细胞过蛋白负荷损伤

作者:师大云端图书馆 时间:2019-09-23 分类:参考文献 喜欢:2947
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【摘要】各种以蛋白尿为主要表现的肾病的病理和病理生理的发展是一个复杂且缓慢的过程,最后变化均表现为肾小球硬化症或肾小管间质纤维化,然而近年来的研究表明小管间质病变与肾损伤有更为紧密的关系。已有研究证实蛋白尿水平和慢性肾衰的进展密切相关。大量动物实验和临床研究发现过蛋白负荷直接导致肾小管间质受损,但是其机制尚未完全阐明,对蛋白尿导致的肾小管间质损伤也没有有效的治疗手段。为了研究尿蛋白对肾小管上皮细胞(NRK-52E)损伤的作用机制,提出以下推测:胞内蛋白蓄积,引起内质网应激;同时,蓄积蛋白拥塞溶酶体降解通路,抑制自噬反应,因内质网应激与自噬的关联性,未折叠蛋白反应加剧,导致细胞损伤甚至死亡。因此,设计以下思路:实验目的:本研究通过阿霉素(adriamycin,ADM)和去脂无内毒素白蛋白(BovineSerumAlbumin,BSA)致NRK-52E细胞过蛋白负荷来模拟体内蛋白尿环境,研究过蛋白负荷致肾小管上皮细胞凋亡的机制,并利用自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)来抑制自噬的终末阶段,观察肾小管上皮细胞的凋亡情况,为进行性肾脏损伤治疗靶点的研究奠定理论基础。实验方法:1.MTT法检测ADM、BSA及联合CQ对NRK-52E细胞存活率的影响;2.倒置显微镜观察细胞形态变化;3.AnnexinV/propidiumiodide双染后,流式细胞仪检测NRK-52E细胞凋亡;4.westernblot法检测GRP78、CHOP、LC3、Beclin1和p-PERK的表达情况。实验结果:MTT结果显示ADM和BSA引起NRK-52E细胞损伤呈时间和剂量依赖性;倒置显微镜下观察细胞发生凋亡时,细胞变圆,细胞间隙增加;流式细胞术显示ADM、BSA及联合CQ能够显著增加NRK-52E细胞凋亡;westernblot结果显示ADM+BSA组GRP78、CHOP及LC3的表达高于对照组及单独ADM、BSA组,Beclin1的相对表达量降低;CQ抑制自噬后内质网应激相关蛋白GRP78、CHOP及凋亡因子p-PERK表达增高。实验结论:1.阿霉素及去脂无内毒素BSA致NRK-52E细胞发生的过蛋白负荷导致细胞内质网应激,继而诱导细胞凋亡。2.抑制自噬导致内质网应激增强,明显增加过蛋白负荷对肾小管上皮细胞的损伤,可以为治疗蛋白尿造成肾小管损伤寻找有效靶点提供理论依据。
【作者】王芳;
【导师】杨成君;
【作者基本信息】吉林大学,生物化学与分子生物学,2014,硕士
【关键词】内质网应激;自噬;蛋白尿;细胞损伤;凋亡;

【参考文献】
[1]张丹凤.基于使用行为的车用内饰手持清洁器优化设计研究[D].西南交通大学,艺术设计(专业学位),2014,硕士.
[2]赵晓丽,唐立新.带有线性恶化工件和释放时间的两个代理单机调度问题[J].自动化学报.
[3]张巧革.电能质量复合扰动信号检测和识别算法研究[D].西南交通大学,电力系统及其自动化,2014,硕士.
[4]刘旭.生产队:公社时期农村的基层单位[D].华中师范大学,政府经济学,2014,硕士.
[5]段小霞.居民的主观感受与CPI统计数据的差异[D].山东大学,金融(专业学位),2013,硕士.
[6]王同有.基于集成学习的蛋白质结晶偏好性预测[D].吉林大学,计算机应用技术,2014,硕士.
[7]张云法.船舶发电机故障智能诊断系统研究[D].江苏科技大学,电力电子与电力传动,2013,硕士.
[8]汤丽.飞行数据管理记录系统关键技术研究[D].西北工业大学,计算机应用技术,2004,硕士.
[9]彭彬.基于内外均衡模型的中国外汇储备规模分析[D].云南财经大学,世界经济,2014,硕士.
[10]李红红.脑电数据分析方法及其在压力情感状态评估中的应用[D].燕山大学,生物医学工程,2014,硕士.
[11]仵颖璠.微流控浓度梯度芯片的研制及其在药物诱导细胞凋亡中的应用[D].东北大学,分析化学,2010,硕士.
[12]马荣.电影《阿凡达》的多模态话语分析[D].武汉理工大学,外国语言学及应用语言学,2012,硕士.
[13]刘白瑞.论保民官制度的演变及其启示[J].河南工业大学学报(社会科学版),2015,01:42-46.
[14]周瑜.内皮素1基因多态性与儿童青少年骨肉瘤化疗耐药的相关性分析[D].中南大学,临床医学,2014,博士.
[15]杨宇博.基于语料库的商务英语信函名词化的研究[D].大连海事大学,外国语言学及应用语言学,2014,硕士.
[16]赵美艳.农村学前教育发展的政府责任研究[D].南京师范大学,教育政策学,2012,硕士.
[17]赵山山.植物乳杆菌ST-Ⅲ盐应激反应及其协同保护作用的研究[D].江南大学,食品科学,2014,博士.
[18]史雷刚.H型坯连铸质量缺陷及其形成数值模拟[D].西安建筑科技大学,钢铁冶金,2013,硕士.
[19]陈文博.空间管桁架结构温度效应与地震作用分析[D].兰州理工大学,结构工程,2013,硕士.
[20]赵东雪.中国上市公司资本结构影响因素研究[D].华东师范大学,世界经济,2004,硕士.
[21]李凤梅.山东省农村信用社信息科技风险管理研究[D].山东大学,工商管理(专业学位),2012,硕士.
[22]史立英.我国积极财政政策的实施与调整研究[D].河北农业大学,农业经济管理,2004,硕士.
[23]范梅.新课程背景下小学语文课堂教学中的合作学习研究[D].贵州师范大学,学科教学(专业学位),2014,硕士.
[24]席航波.二维胶体晶体熔化的结构和动力学研究[D].苏州大学,光学,2014,硕士.
[25]衣馨瑶.老年神经退行性疾病和癌症相关标志物的表面等离子体激元共振与电化学研究[D].中南大学,化学,2014,博士.
[26]张丹丹.河南官民与福公司之间的利权斗争[D].东北师范大学,中国近现代史,2012,硕士.
[27]刘文丽,陈双.唐钢2~#高炉自动控制系统的开发和应用[J].冶金自动化,2006,04:10.
[28]黄辉.黑土地上的白玫瑰[D].中国音乐学院,音乐学,2014,硕士.
[29]肖姹莉,彭勇,王兴,庄成三.地震模式识别技术在碳酸盐岩油气预测中的应用[J].石油地球物理勘探,1995,S2:39-46+181.
[30]汪鹏.基于无线传感器网络的楼宇环境监控系统的研究[D].浙江工业大学,2009.
[31]王颖童.城市学龄儿童血钙与血脂和血糖关系的研究[D].河北医科大学,卫生毒理学,2014,硕士.
[32]王雁冰.2012年北京高考物理试题能力分析[D].首都师范大学,学科教学,2013,硕士.
[33]金宁人,李晨,胡晓锋,胡燕红,张建庭.AB型羟基改性PBO单体及其合成新技术[J].化工学报.
[34]孟祖晖.考虑信任和收益不对称的TR模型研究及应用[D].清华大学,管理科学与工程,2013,硕士.
[35]杨敏.巴赫《二部创意曲》教学与演奏研究[D].云南师范大学,课程与教学论,2013,硕士.
[36]钟云翔.重庆地区地源热泵系统实测分析及监测策略[D].重庆大学,供热、供燃气、通风及空调工程,2014,硕士.
[37]苏刚.孔子“陈蔡绝粮”及其历史文化解读[D].曲阜师范大学,专门史,2013,硕士.
[38]王海东.基于PCI总线的电能计量装置监测系统的研究[D].华北电力大学(河北),电力系统及其自动化,2004,硕士.
[39]谭银龙.高温后混凝土性能促进恢复及其机理研究[D].中国矿业大学,结构工程,2014,硕士.
[40]康建波.玉米油合成亚油酸乙酯试验研究[D].吉林大学,食品科学与工程,2013,硕士.
[41]卫万荣.高原鼠兔栖息地、洞系特征及其功能的研究[D].兰州大学,草业(专业学位),2013,硕士.
[42]周晓旭.中国、德国、美国高中数学教材幂指对函数的比较研究[D].华东师范大学,课程与教学论,2013,硕士.
[43]张阳.基于模糊神经网络的智能型火灾报警系统的研究与设计[D].合肥工业大学,精密仪器及机械,2004,硕士.
[44]胡兆庆,毛承雄,陆继明.适用于电压源型高压直流输电的控制策略[J].电力系统自动化,2005,01:39-44.
[45]唐多昌,李晓红,袁春华,杨宏道.机械剥离法制备高质量石墨烯的初步研究[J].西南科技大学学报,2010,03:16-18+59.
[46]张华阳.西部欠发达地区临床医学专业学位研究生培养模式的研究[D].兰州大学,公共管理(专业学位),2013,硕士.
[47]付丽茹.中国第三方物流企业客户服务研究[D].首都经济贸易大学,产业经济学,2004,硕士.
[48]李海玲.抗肝纤维化复方中药的Meta分析及其交集药味防治大鼠肝纤维化实验研究[D].山西医科大学,消化内科,2013,硕士.
[49]姚晓珊.威尼斯城市共和国与奥斯曼帝国商贸关系研究(1453-1718)[D].山西师范大学,世界史,2014,硕士.
[50]王江萍.电弧喷涂制备金属基陶瓷复合涂层及其性能研究[D].北京工业大学,材料加工工程,2004,硕士.

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