骨髓间充质干细胞对严重烧伤大鼠肝脏损伤的修复作用研究

骨髓间充质干细胞对严重烧伤大鼠肝脏损伤的修复作用研究

作者:师大云端图书馆 时间:2019-05-27 分类:参考文献 喜欢:3546
师大云端图书馆

【摘要】在我国,烧伤年发病率约达人群的2%左右,严重烧伤甚至可危及生命,一直为社会和医学界所重视。严重烧伤发生后,机体的肠道屏障遭到严重破坏,肠道细菌移位,导致内毒素血症的发生,如果治疗不及时,进一步可引发全身多器官功能的损伤。随着对烧伤认识水平的提高,因休克死亡的患者明显减少,多器官功能衰竭已成为当前临床上烧伤患者死亡的主要原因。目前临床处理多以补充血容量和抗感染为主,但是效果并不理想。如何减轻严重烧伤后引起的脏器损伤及促进损伤后再修复已经成为一个十分重要的课题。其中肝脏是人体最重要的代谢器官,能够保护其他脏器免受损伤,因此修复严重烧伤后肝损伤,对多器官功能衰竭的防治尤其重要。骨髓间充质干细胞(bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSCs)是一类具有强大增殖能力的多能干细胞,其具有多向分化潜能、来源方便、易于分离培养、免疫原性弱、进入体内后可定植于受损部位并修复其损伤等特性,因此,在修复病变组织损伤方面具有十分广阔的前景。已有研究表明:BMSCs局部应用能够修复局部烧伤创面,静脉移植可修复各种肝脏疾病,但关于BMSCs静脉移植能否治疗严重烧伤引起的肝损伤还未见报道。因此本课题将BMSCs移植到严重烧伤的大鼠体内,探讨其对严重烧伤引起的肝损伤的修复作用及其作用机制,希望为临床治疗严重烧伤提供新的思路。本研究采用贴壁培养法分离、纯化BMSCs,扩增后应用流式细胞仪检测细胞周期及细胞表面标志,并诱导其向成骨细胞分化。选用成年雄性Wistar大鼠,分为正常对照组、模型组(经球后静脉注入生理盐水0.1mL)和细胞治疗组(经球后静脉注入BMSCs0.1mL,1×107个),每组10只。制备大鼠烧伤模型,将氯甲基苯甲酰胺(CM-Dil)标记的BMSCs经球后静脉移植到细胞治疗组的大鼠体内,模型组大鼠注射等体积生理盐水。每日观察各组大鼠一般状态,分别在细胞移植后1和2周称量大鼠体重,计算创面愈合率。细胞移植后2周取血及大鼠肝组织,通过检测血清中ALT、AST和LDH的含量,HE染色进行病理组织学观察并评分,免疫组织化学法检测PCNA的表达,TUNEL法检测肝细胞凋亡,Westernblot法检测Bax、Bcl-2、Caspase-3和P-ASK1的表达,观察各组大鼠肝功能、肝组织病理、肝细胞增殖、肝细胞凋亡情况及凋亡相关蛋白的表达。细胞移植后2周利用激光共聚焦显微镜观察BMSCs在细胞治疗组大鼠肝组织内的定植情况。本研究结果显示:贴壁培养法得到的BMSCs生长状态良好。流式细胞术检测得到的BMSCsCD44和CD90呈阳性,基本不表达CD45,大部分细胞处于相对不活跃的静止期。BMSCs被诱导分化为成骨细胞,茜素红染色呈阳性。细胞移植后2周,模型组大鼠明显萎靡少动;细胞治疗组大鼠行为状态明显较好,细胞治疗组大鼠体重及创面愈合率显著大于模型组(P<0.05)。ALT、AST和LDH结果表明细胞治疗组大鼠肝功能显著优于模型组(P<0.05)。HE染色及病理评分表明细胞治疗组大鼠肝组织病理形态改变显著优于模型组。免疫组化结果显示,与模型组比较,细胞治疗组PCNA表达显著增加(P<0.05)。TUNEL结果表明细胞治疗组肝细胞凋亡率显著低于模型组(P<0.05)。Westernblot结果显示,与正常对照组比较,模型组Bax、Caspase-3和P-ASK1蛋白表达显著增加(P<0.05),而Bcl-2表达显著减少(P<0.05),Bcl-2与Bax比值(Bcl-2/Bax)显著降低(P<0.05);与模型组比较,细胞治疗组Bax、Caspase-3和P-ASK1蛋白表达显著减少(P<0.05),而Bcl-2表达显著增加(P<0.05),Bcl-2/Bax显著增高(P<0.05)。激光共聚焦显微镜观察结果显示,在细胞治疗组大鼠肝组织中存在CM-Dil标记的BMSCs。结论:BMSCs静脉移植后能够向受损肝组织定植,对严重烧伤引起的肝损伤有明显的修复作用,其修复机制可能与促进肝细胞增殖和抑制细胞凋亡有关。
【作者】陈浩;
【导师】郭丽;
【作者基本信息】吉林大学,卫生毒理学,2014,硕士
【关键词】骨髓间充质干细胞;烧伤;肝损伤;细胞移植;修复;凋亡;

【参考文献】
[1]周幸.重组人血管内皮抑制素联合化疗治疗骨肉瘤的临床研究[D].南方医科大学,外科学,2012,硕士.
[2]宋寅.我国上市银行股权结构与经营绩效关系的实证研究[D].中国政法大学,企业管理,2013,硕士.
[3]程慧.马克思主义平等观与社会主义和谐社会的构建[D].山西师范大学,马克思主义理论,2013,硕士.
[4]张陆东.我国上市公司控制股东滥用控制权的法律规制研究[D].复旦大学,民商法学,2012,硕士.
[5]崔小乐.股东出资责任研究[D].西南政法大学,法律(专业学位),2012,硕士.
[6]蒋小莉.Tollip基因敲除对压力负荷诱导的小鼠心肌肥厚及心功能影响的研究[D].华中科技大学,心血管内科,2013,硕士.
[7]王红旗,王庆林.移动机械手运动/力鲁棒自适应轨迹跟踪[J].控制与决策,2010,01:105-109+120.
[8]项菲.中国农村居民收入分配差距问题研究[D].吉林财经大学,统计学,2014,硕士.
[9]远航,于定勇.潮流与泥沙数值模拟回顾及进展[J].海洋科学进展,2004,01:97-106.
[10]芦芸.宫颈癌根治术后辅助放化疗有效性和安全性的Meta分析[D].兰州大学,妇产科学,2013,硕士.
[11]石磊.基于电信CRM的数据维护管理系统的设计与实现[D].西安电子科技大学,软件工程,2012,硕士.
[12]桂柳.贵州省国内游空间结构研究[D].贵州财经大学,统计学,2013,硕士.
[13]庞景月.滑动窗口模型下的数据流自适应异常检测方法研究[D].哈尔滨工业大学,仪器科学与技术,2013,硕士.
[14]田胜利.针对HBase的MapReduce数据访问方式的优化[D].国防科学技术大学,计算机科学与技术,2012,硕士.
[15]贤乾隆.产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选及其功能性发酵酸奶的研制[D].广西科技大学,生物化工,2013,硕士.
[16]邱桃荣,刘清,黄厚宽.关系数据库中知识发现的一种粒计算方法(英文)[J].自动化学报,2009,08:1071-1079.
[17]李永奎,邹新春.棒材厂冷床保护系统的实现[J].冶金自动化,2003,S1:137-139.
[18]胡青波.现代医院住院药物配送系统建筑空间设计研究[D].西安建筑科技大学,建筑设计及其理论,2013,硕士.
[19]张琳珊.后现代设计中的“超情趣”设计观[D].大连工业大学,设计艺术学,2009,硕士.
[20]刘明.C_1对称胺配体的设计及其在不对称Henry反应中的应用[D].天津大学,制药工程,2013,硕士.
[21]宋文利.税务精神文化建设初探[D].苏州大学,公共管理(专业学位),2012,硕士.
[22]安宏乐.北京首钢青少年篮球运动员体能训练现状研究[D].首都体育学院,运动训练,2013,硕士.
[23]何一乐.我国缔约过失责任赔偿范围研究[D].华中科技大学,法律,2013,硕士.
[24]赵颖.三民主义青年团第一次全国代表大会研究[D].西南大学,中国近现代史,2014,硕士.
[25]董钢锋.中小银行发展与中小企业融资约束[D].浙江工商大学,金融学,2013,硕士.
[26]田广.MIMO系统预编码技术研究[D].西安电子科技大学,通信与信息系统,2012,硕士.
[27]李辉超.兔耳增生性瘢痕中Th1/Th2细胞相关趋化因子表达及咪喹莫特对其表达影响的研究[D].第四军医大学,外科学(专业学位),2014,硕士.
[28]沈建苗.改变计算格局——芯片领域的五大技术突破[J].微电脑世界,2011,11:12-16.
[29]王楠.纳米TiO_2表面改性及光催化降解典型有毒污染物研究[D].华中科技大学,2010.
[30]刘坛树.鼻三针为主辨证取穴治疗常年变应性鼻炎的临床研究[D].广州中医药大学,针灸推拿学(专业学位),2013,硕士.
[31]邵元君.中高职衔接中的问题与对策研究[D].华东师范大学,职业技术教育学,2013,硕士.
[32]张招娣.纳米颗粒复合杂化整体固定化酶反应器的制备及应用[D].华东理工大学,分析化学,2014,硕士.
[33]田大志.柠檬精油乳液的物理化学稳定性研究[D].湖北工业大学,食品科学,2014,硕士.
[34]胡国荣.锂离子电池正极材料的产业化现状与发展趋势[A].中国化工学会储能工程专业委员会(InstituteofEnergyStorageEngineeringoftheChemicalIndustryandEngineeringSocietyofChina).第一届全国储能科学与技术大会摘要集[C].中国化工学会储能工程专业委员会(InstituteofEnergyStorageEngineeringoftheChemicalIndustryandEngineeringSocietyofChina):,2014:2.
[35]刘希伟,叶蕾,于明远,梁荣华,黄庆藏.面向异构集群的作业调度与资源分配研究[J].华中科技大学学报(自然科学版),2012,S1:175-178.
[36]史建宜.基于PKI的信息安全交换套件研究与应用[D].北方工业大学,计算机软件与理论,2014,硕士.
[37]杨春芳.中美高校通识教育课程设置的比较研究[D].四川外国语大学,课程与教学论,2014,硕士.
[38]李慧.A Comparative Analysis of Interpersonal Meaning between the English Corporate Profiles of Chinese Companies and American Companies Based on Corpus Study[D].西安外国语大学,外国语言学及应用语言学,2014,硕士.
[39]祁砚芩.关于第三方支付平台以及互联网金融发展研究[D].山西财经大学,金融学,2014,硕士.
[40]曹问.加强高校学生党建工作论[D].西南师范大学,学科教学,2004,硕士.
[41]陈慧萍.免费报纸趋势分析[D].南京大学,新闻学,2013,硕士.
[42]陆志鑫.武汉昙华林历史街区旅游发展中的社区参与研究[D].华中师范大学,人文地理学,2013,硕士.
[43]许铭慧.供应链知识管理中的问题与对策研究[D].沈阳师范大学,管理科学与工程,2014,硕士.
[44]王芳.浅析器乐伴奏艺术中的钢琴演奏[D].中央音乐学院,器乐伴奏艺术,2012,硕士.
[45]刘兴艳.脂多糖对大鼠胰岛瘤细胞INS-1自噬和凋亡的影响[D].济南大学,内科学,2012,硕士.
[46]陈龙.平原型乡村绿道规划的研究与实践[D].浙江理工大学,艺术设计(专业学位),2014,硕士.
[47]陈国华.手性药物分子结构表征及定量构效关系研究[D].重庆大学,2010.
[48]彭宏,荆晶.无线自组织量子通信网络的Grover路由算法研究[J].浙江工业大学学报,2014,06:612-615.
[49]汤毛虎.基础设施投资能否拉动私人投资:来自中国制造业企业层面的发现[D].复旦大学,西方经济学,2012,硕士.
[50]田景惠.冠心病病人细胞黏附分子与巨细胞病毒抗体水平的变化及其临床意义[D].青岛大学,临床检验诊断学,2004,硕士.

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