不同麻醉方法对围术期T辅助细胞的影响以及与肝癌转移复发的关系

【摘要】肝细胞肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)尽管近年来诊断方法和治疗手段不断改善但手术切除仍然是肝癌治疗的首选,能显著改善肝癌患者的预后,延长生存期,但手术也不可避免的影响了患者全身的内环境和免疫功能。围术期免疫系统的改变会直接影响患者术后的肿瘤转移复发和生存。T辅助细胞(Th,Thelpercell)是近年来逐渐被重视的一类免疫细胞,又被称为CD4+细胞,有四个主要的亚群,Thl,Th2,Thl7和Treg,在免疫反应中扮演中间过程的角色,因为其功能的特殊性,在机体对癌细胞的免疫监视方面起重要作用,与肿瘤的转移和复发直接相关。人类正常的生理情况下,Th1.Th2两类细胞处于相互抑制、相互转化的平衡状态,也就是Th1/Th2平衡,一旦平衡被打破,机体就处于Th1优势或Th2优势的漂移状态,从而出现各种病理反应,在肿瘤宿主中若Th1型细胞占优势,则提示机体对肿瘤具有活跃的免疫力,而Th2型细胞的优势状态将保护肿瘤细胞发生免疫逃逸。这四个亚群对肿瘤的反应是不同的,Th1通过产生IFN-γ来抗击肿瘤,使肿瘤衰退。相反,Th2,Th17和Treg细胞则有协助肿瘤生长的作用。在肿瘤患者中,Th细胞亚群的数量和分布很重要,但更为重要的是Th细胞亚群之间的平衡,它决定了对肿瘤免疫的趋向和病人的预后。合适的麻醉方法选择,通过消除手术对免疫功能的干扰和抑制,帮助患者从被打破的Th亚群平衡中恢复并进一步维持抗肿瘤反应的平衡,从而达到减少肿瘤术后转移复发,提高肿瘤患者生存率的目的。本研究的目的就是通过对大鼠原位肝癌模型和临床肝细胞肝癌患者的实验来揭示肝癌切除术本身和不同麻醉方法选择对围手术期T辅助细胞数量和亚群平衡的影响,进一步通过术后随访,来证明其与肝癌转移复发的关系。第一部分不同麻醉方法对大鼠原位肝癌模型肝癌切除术后T辅助细胞和肿瘤转移的影响目的：探讨不同麻醉方法对大鼠原位肝癌模型肝癌切除术后T辅助细胞和肿瘤转移的影响方法：建立ACI大鼠原位肝癌模型,将30只大鼠随机分为3组,分别是手术+硬膜外+全麻(G+E)组、手术+全麻(G)组和对照(C)组,每组10只,分别处理；种瘤后第14天,G+E组和G组的大鼠在不同麻醉方法下行肝癌切除术,并镇痛治疗三天。术后一周,每天观察镇痛情况一次,并在术后第2天,第7天和第30天分别从尾静脉采血检测血浆IFN-γ,IL-4,IL-17,IL-10和TGF-p1细胞因子水平。术后第30天,处死大鼠,观察腹腔淋巴结转移,癌性腹水,腹壁种植结节及肉眼肺转移结节等情况。结果：对照组中的大鼠,肺转移灶多,腹腔淋巴结转移率,癌性腹水和腹壁种植率高。G+E组的大鼠在肺转移灶和腹腔淋巴结转移率这两项中明显低于G组。G+E组和G组的血浆IFN-γ,IL-4,IL-17,IL-10,TGF-β1浓度,在d2与d0相比均显著升高,并在d7有不同程度的恢复,在d30基本回到手术前水平；两组的INF-γ/IL-4比值在d2与d0相比均显著降低,G+E组在d7和d30有一定程度的恢复,但G组的INF-γ/IL-4比值进一步的降低。血浆IFN-γ,IL-4,IL-17,IL-10,TGF-β1浓度,在d0中,三组之间无差别,在d2中,G+E组和G组与C组相比均有不同程度的升高,并在d7有所恢复,在d30基本恢复到与C组水平。但G+E组和G组这两组在d2,d7和d30这三个时间点上显示出许多统计学上的差异。G+E组主要表现为INF-γ的水平较高,而G组的IL-4,IL-17,IL-10,TGF-β1浓度较高。三组之间比较血浆INF-γ/IL-4比值,在d0和d2中,三组之间无差别,在d7和d30中,G+E组显著高于G组。结论：全麻复合硬膜外麻醉与单纯全麻相比大鼠肝癌切除术后肿瘤的转移较少,可能与全麻复合硬膜外麻醉更好的调节Th1/Th2平衡向Thl偏移,减少Th2,Th17和Treg细胞分泌的细胞因子相关。第二部分不同麻醉方法对肝癌切除患者T辅助细胞的影响目的：研究不同麻醉方法在行肝癌切除术的肝细胞肝癌患者(HCC,hepatocellularcarcinoma)中对T辅助细胞(Th,Thelpercell)亚群的影响方法：61例接受肝癌切除术的HCC患者随机分入硬膜外复合全麻组(G+E组；n=31)或单纯全麻组(G组,n=30)。手术当日的早晨(d0),术后2天的早晨(d2)和术后7天的早晨(d7)分别采集外周血。对Th细胞进行以下三种检测,分别是流式细胞仪,实时逆转录聚合酶链反应(real-timeRT-PCR)和酶联免疫吸附测定(Elisa)。结果：所有的61名患者中,与d0相比,Thl,Th2细胞频数和干扰素-γ(IFN-γ)的mRNA表达在d2显著增高,并且在d7有轻度的恢复。Thl/Th2的比值与d2相比,在d7有显著的增高。相反的,与d0相比,Th17,Treg(regulatoryTcell),白介素-17(IL-17)水平和FoxP3的mRNA表达在d2无显著改变,但在d7显著降低。相似的,血浆IFN-γ浓度在d2要显著高于d0,随后在d7部分恢复。与G组相比,G+E组的Thl细胞频数和Th1/Th2比值在d2轻度升高,并且在d7显著升高,而Th2,Th17和Treg细胞频数在d2轻度降低,并且在d7显著降低。同时,在d7的G+E组IFN-γmRNA和细胞因子水平,IFN-γ/IL-4比值都高于G组。相反的,G+E组的IL-17mRNA水平,IL-17和转化生长因子-β1(TGF-β1)浓度都显著低于G组。结论：全麻复合硬膜外麻醉与单纯全麻相比能更好的调节Thl/Th2平衡向Thl偏移,同时能减少Thl7和Treg细胞,通过改善Th细胞的抗肿瘤极性使肝癌手术患者得益更多。第三部分不同麻醉方法对肝癌切除术患者术后转移复发和预后的影响目的：比较硬膜外复合全麻和单纯全麻这两种不同的麻醉方法,对肝癌切除术后的患者转移复发和预后的不同影响,且这种影响是否与围手术期的Th亚群平衡相一致。方法：在第二部分实验的基础上,对61例肝癌切除术后的患者进行三年随访,记录患者术后是否复发和转移,发现复发和转移的时间和继续治疗的手段。对生存和复发相关的单因素和多因素进行分析。Kaplan-Meier法比较G+E组和G组对无瘤生存期(DFS)和总生存时间(OS)的影响。结果：在单因素分析中,年龄,性别,肝炎病史,肝硬化,AFP水平,ALT水平,Child-Pugh评分和肿瘤分化对OS和DFS无预测相关性。肿瘤数量,肿瘤包膜是否完整,肿瘤是否侵犯血管和TNM分期对DFS有预测价值,而除了以上4项外,肿瘤大小亦与OS相关。麻醉方法对DFS有预测价值,但与OS无关。将生存和复发相关的单因素分析中有预测价值的变量列出进行多变量Cox比例风险分析,血管侵犯是肝细胞肝癌的独立预测因素,与DFS和OS都相关。然而TNM,肿瘤数量,肿瘤大小和肿瘤包膜是否完整并不是独立的预后预测因素。麻醉方法在多因素分析后也不能作为DFS的独立预测因素。结论：硬膜外复合全麻者,与单纯全麻者相比肝癌术后复发率较低,无瘤生存期(DFS)较长,但总生存时间(OS)无差异,是肝癌切除术更为合适的麻醉选择。
【作者】周荻；
【导师】缪长虹；
【作者基本信息】复旦大学，麻醉学，2013，博士
【关键词】硬膜外麻醉；全麻；肝癌切除术；大鼠原位肝癌模型；T辅助细胞；Th平衡；肿瘤转移；

【参考文献】
[1]卢素红.介孔—大孔整体型催化剂的制备及用于CO优先氧化的研究[D].天津大学,2012.
[2]孙扬.地域文化视野下我国高中教材编制问题研究[D].渤海大学,课程与教学论,2013,硕士.
[3]谭美英.石墨烯整理液的制备及在医用纺织品中的应用[D].东华大学,2015.
[4]曾瑛.Web挖掘工具与数字图书馆信息服务[J].中国科技信息,2005,07:28.
[5]兰添.基于SNMP协议的地铁网络节点远程管理[D].北京交通大学,软件工程（专业学位）,2013,硕士.
[6]舒艳.高中思想政治课教师教学反思存在的问题与对策[D].华中师范大学,学科教学,2013,硕士.
[7]王茜.CNFs基柔性电致变色薄膜超级电容器制备及性能研究[D].北京理工大学,2014.
[8]邱艳璐.互文性理论下的新闻汉译方法[D].西安外国语大学,外国语言学及应用语言学,2013,硕士.
[9]魏衡.血清淀粉样蛋白A与缺血性脑卒中及亚型的相关性研究[D].辽宁医学院,神经病学,2012,硕士.
[10]刘福才,方一鸣,王洪斌.PLC在型材辊压生产线飞剪控制系统中的应用[J].冶金自动化,1999,06:32-34.
[11]陈青霞.文化软实力视角下的入境旅游目的地营销[D].首都经济贸易大学,旅游管理,2014,硕士.
[12]孙玉华.老年人的健康自评状况及其影响因素研究[D].吉林大学,社会医学与公共卫生事业管理,2013,硕士.
[13]成晓舟.u-PA与VEGF在胃癌中的表达及其意义[D].兰州大学,外科学,2013,硕士.
[14]魏浩然.三种生物质基活性炭的制备及其对CO_2的吸附研究[D].清华大学,环境科学与工程,2013,硕士.
[15]周媛也.流动人口的社会保障同城待遇问题研究[D].湖南师范大学,社会保障,2014,硕士.
[16]贾烊.地方政府对民办高校学科建设扶持政策研究[D].长春工业大学,行政管理,2013,硕士.
[17]姚芸.尽精微，至广大[D].湖南师范大学,传播学,2013,硕士.
[18]彭文琴.不同碳源和光照周期对三种微藻生长及油脂积累的影响[D].南昌大学,环境科学,2012,硕士.
[19]陈莹真.医学型社交网站的营销模式研究[D].上海交通大学,工商管理,2013,硕士.
[20]何瑜媛.92岁高龄老人呼吸道感染致心力衰竭1例报告并文献复习[D].兰州大学,老年医学（专业学位）,2013,硕士.
[21]李晓鹏.深水大直径群桩基础竖向承载特性分析及工程应用[D].长安大学,岩土工程,2014,硕士.
[22]臧霜.小学语文教材中的传统文化建构[D].首都师范大学,学科教学,2014,硕士.
[23]韩轲.寿险产品保障价值的度量研究[D].山东师范大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[24]甄伟会.CEO在我国公司治理结构中的融入[D].黑龙江大学,法律,2013,硕士.
[25]宋扬.间充质干细胞与shRNA联合治疗肝损伤的研究[D].吉林大学,生物化学与分子生物学,2013,硕士.
[26]李伟雄.噻唑杂环分散染料的开发及应用性能研究[D].东华大学,纺织工程（专业学位）,2014,硕士.
[27]侍银宝.油茶果皮多酚的分离纯化及其生物活性研究[D].中南林业科技大学,森林食品加工与利用,2014,硕士.
[28]陈实.基于DS与SMS混合协议的移动关爱终端研究与开发[D].山东大学,电子与通信工程（专业学位）,2012,硕士.
[29]冯杰.流通环节食品安全监管研究[D].上海交通大学,公共管理,2013,硕士.
[30]杨晓辉.农村土地流转问题研究[D].河北师范大学,政治经济学,2012,硕士.
[31]王宏宇.大学英语听力教材设计[D].四川外国语大学,英语语言文学,2014,硕士.
[32]汪洋,吕晓龙,武春瑞,高启君,张如意.高强度聚偏氟乙烯纤维的熔融纺丝法制备[J].纺织学报.
[33]李鑫.摩擦电选系统的自动控制研究[D].中国矿业大学,化工过程机械,2014,硕士.
[34]岳峰.马克思主义大众化路径研究[D].江西财经大学,马克思主义基本原理,2013,硕士.
[35]李昊伦.一类非线性系统的故障诊断方法研究[D].西安建筑科技大学,系统工程,2013,硕士.
[36]朱传鹏.1000MW超超临界机组协调控制系统设计及其改进[D].燕山大学,控制科学与工程,2014,硕士.
[37]张艳.BY通信有限公司战略转型研究[D].河北工业大学,工商管理,2013,硕士.
[38]吴杰.输电线路施工项目管理优化研究[D].苏州大学,工商管理（专业学位）,2013,硕士.
[39]孔纪霞.旋毛虫ESF1蛋白抗体的制备及其对人结肠癌HCT-8细胞的影响作用[D].吉林大学,病理学与病理生理学,2014,硕士.
[40]罗晨.朱熹《诗集传》训诂研究[D].河北师范大学,汉语言文字学,2012,硕士.
[41]孙添怡.对外汉语中成语的教学研究[D].苏州大学,汉语国际教育（专业学位）,2013,硕士.
[42]聂林.学习型组织文化、工作满意度对组织承诺的影响研究[D].山东大学,企业管理,2014,博士.
[43]吴勇.超高层建筑钢桁架加强层施工方法与施工期结构分析[D].重庆大学,土木工程,2014,硕士.
[44]本报记者夏芳.力合股份间接沾边石墨烯未来或享投资收益[N].证券日报,2011-10-17C01.
[45]韩丹,张爱文,高官俊,苏海全.负载型纳米Au催化剂光催化性能的研究进展[J].化工进展,2012,02:435-440.
[46]王瑞东.FDI对我国宏观经济波动的影响[D].大连理工大学,金融学,2013,硕士.
[47]王韬.装配式多孔箱板组合涵洞结构设计技术研究[D].新疆大学,建筑与土木工程,2013,硕士.
[48]林靖.基于.Net的城市基础设施投资管理系统的开发与研究[D].山东大学,软件工程（专业学位）,2012,硕士.
[49]庄宏清.环氧树脂废水处理工艺技术研究[D].华东理工大学,环境工程,2014,硕士.
[50]袁月.CSNS直线加速器空间电荷效应的模拟研究[D].兰州大学,粒子物理与原子核物理,2013,硕士.