葡萄柚黄酮对Skm-1细胞株增殖抑制作用及相关机制的研究

【摘要】目的：探索葡萄柚黄酮(PureTotalFlavonoidsfromCitrusparadisiMacfad,PTFC)对Skm-1细胞株的增殖抑制作用及相关机制,从而为骨髓增生异常综合征的临床治疗提供实验基础。方法：应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测PTFC对骨髓增生异常综合征(MDS)细胞株Skmm-1细胞的增殖抑制作用；AnnexinV/PI流式细胞术检测PTFC对Skm-1细胞株的凋亡诱导作用和对细胞周期的干预作用；Hoechst33258染色法研究PTFC诱导Skm-l细胞株凋亡的形态学变化；Westernblot法检测Caspase-3、PARP、CDK4、CDK6、CyclinD1、PI3K、Akt、P-Akt和P65相关蛋白的表达。结果：(1)1.0-1.6mg/ml不同浓度PTFC作用于Skm-1细胞株24小时、48小时后,IC50分别是1.54mg/ml,1.36mg/ml。(2)浓度为0、1.2、1.4、1.6mg/ml的PTFC分别作用于Skm-1细胞株,24小时后用流式细胞术检测凋亡,早期凋亡率分别是2.75%、3.38%、4.18%、4.6%；检测细胞周期,发现PTFC可阻滞细胞于G0/G1期。(3)Hoechst33258染色,Skm-1细胞核内未见明显的凋亡小体,并且随着PTFC浓度的增加细胞未见明显变化。(4)Westernblot结果显示PTFC不能激活Caspase-3、PARP蛋白,但能引起CDK4、CDK6、CyclinD1、PI3K、Akt、P-Akt和P65蛋白的下调。结论：(1)在一定浓度范围内的PTFC(1.0-1.6mg/ml)可明显抑制Skm-1细胞株的增殖,并呈时间浓度依赖性。(2)形态学及流式细胞术证明,PTFC未能诱导Skm-1细胞凋亡,但可阻滞细胞周期于G0/G1期,Westernblot法探索PTFC对Skm-1细胞增殖抑制机理是与PI3K/Akt/NF-kB信号通路的激活相关。
【作者】陈珍珍；
【导师】林圣云；
【作者基本信息】浙江中医药大学，内科学，2014，硕士
【关键词】骨髓增生异常综合征；葡萄柚黄酮；细胞周期；凋亡；

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