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实验室常用质粒对宿主大肠杆菌MG1655全菌蛋白表达谱影响的研究 06月03日

【摘要】质粒是一种共价闭合环状双链DNA,广泛存在于微生物中,是不同于基因组且独立于基因组之外的DNA。可以自主复制,其大小由几kb到几百kb不等。质粒在基因工程中的用途广泛,有着重要的作用。实验室常用的质粒通常包含复制子,抗性基因,多克隆酶切位点等原件。复制子决定了质粒在宿主菌中的拷贝数,抗性基因是一种筛选标记,多克隆位点上含有多种核酸酶酶切位点,可以方便外源基因片段的插入,从而有利于外源基因的 […]

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以工程大肠杆菌为模型探究不同修饰剂对纳米粒子生理毒性的影响 04月26日

【摘要】纳米荧光探针因为其良好的光学性能,被人们广泛应用于生物检测、生物传感、成像分析、癌症检测、药物传递及治疗等领域,而生物相容性一直是其应用的一个瓶颈。对纳米荧光探针生理毒性的探究,将指导研究者们更加有效的开发安全无毒的新型纳米材料,并加快其在临床应用中的推广。本文以目前广泛应用的CdTe量子点、荧光金纳米团簇(金簇)、荧光银纳米团簇(银簇)为研究对象,合成了巯基乙酸TGA、谷胱甘肽GSH和半 […]

奶牛乳腺炎大肠杆菌优势血清型相关毒力基因与耐药基因的检测与序列分析 03月22日

【摘要】本研究利用宁夏地区临床型奶牛乳腺炎大肠杆菌临床分离株,采用O抗原平板凝集试验鉴定大肠杆菌优势血清型,应用纸片扩散法对其耐药性进行分析,运用PCR方法对耐药基因以及毒力基因进行检测,并对血清型和耐药性之间的关系,以及irp2、iucA两种毒力基因的序列进行了分析比对,实验结果如下:1.根据GenBank报道的序列,设计大肠杆菌16SrRNA鉴定的通用引物,应用16SrRNA鉴定大肠杆菌的方法 […]

生物肝素酶法合成途径中三种关键酶的克隆和表达 12月27日

【摘要】肝素在体内外均有抗凝血作用,是目前最有效且应用范围最广的抗凝血类药物。体外酶催化合成生物工程肝素是目前肝素的研究重点。尿苷二磷酸葡萄糖醛酸(UDP-GlcAc)和3’-磷酸腺苷-5’-磷酰硫酸(PAPS)分别是超低分子肝素(ULMWH)化学酶法合成途径中的糖基与硫磺基供体,价格昂贵因而无法应用于实际生产。以此为出发点,希望借助体外酶催化解决UDP-GlcAc和PAPS的来源问题,进而为UL […]

大肠杆菌工程菌发酵生产莽草酸的工艺研究 12月27日

【摘要】莽草酸是莽草酸途径的代谢中间产物,是合成手性药物的关键原料。目前莽草酸的生产主要从八角茴香中提取,此方法受到植物原料的限制,时空产量低、成本高。随着基因工程和代谢工程的兴起,利用微生物合成莽草酸成为一种可行的方法,该方法具有生产周期短、成本低、环境污染少的优点。本文以大肠杆菌(E.coli)基因工程菌为莽草酸产生菌,对莽草酸发酵工艺进行了优化,提高了莽草酸的产量。论文的研究内容包括以下几点 […]

L-色氨酸工程菌的改造及发酵条件控制 10月09日

【摘要】色氨酸是人体和动物生命活动中八种必需氨基酸之一,在医药行业、食品行业以及动物饲料等行业的应用非常广泛。目前,世界市场对色氨酸的需求量每年都在万吨以上,其增长速率呈逐年上升趋势,因此L-色氨酸的市场空间巨大。目前由于大肠杆菌的遗传背景比较清晰,而且其具有改造方便,发酵周期短等优点,因此大肠杆菌已经成为发酵生产L-色氨酸的重要微生物。本文以大肠杆菌(Escherichiacoli)JLTRP为 […]

AspC介导的天冬氨酸代谢协调大肠杆菌细胞周期 04月17日

【摘要】大肠杆菌细胞周期不同阶段彼此协调,但其背后机理,特别是氨基酸代谢与其之间的联系尚不清楚。AspC是一种天冬氨酸氨基转移酶,主要负责细胞内天冬氨酸的合成。当AspC缺失后,DNA复制起始延迟,细胞生长速度减缓,细胞长度减小。在aspC缺失突变体中过表达aspC基因能够使这些表型缺陷得以恢复。在野生型细胞中过表达aspC基因使DNA复制提前,细胞长度增加。aspC基因删除后,DNA复制起始蛋白 […]

自制中药破坏大肠杆菌生物膜提高头孢他啶作用的实验研究 03月08日

【摘要】目的1.建立耐药大肠杆菌体外生物膜模型;2.探讨黄芩、自制中药分别联合头孢他啶对形成成熟生物膜的耐药大肠杆菌的作用情况,为临床用药提供实验依据。方法1.全自动细菌分析仪鉴定为大肠杆菌,K-B纸片扩散法测定大肠杆菌药敏情况,应用阿利新蓝-刚果红染色及刚果红平板定性大肠杆菌生物膜,以聚氯乙烯为载体,L-B肉汤96孔板培养建立大肠杆菌生物膜体外模型;2.大肠杆菌培养24h、48h、72h、5d时 […]

犬前列腺炎的人工发病及其B超检查的特点分析 07月10日

【摘要】在犬科动物中前列腺疾病有较高的发病率,其中前列腺炎是前列腺疾病的一种,临床上较为常见。B型超声学近年来发展很快,B型超声可以很清楚地显示各脏器及周围器官的各种断面图像,它显示的图像富有实体感,几乎接近于解剖的真实结构,因此应用超声检查进行早期诊断已成为现代临床医学中不可缺少的诊断方法。本研究通过对人工诱发犬前列腺炎的病犬进行B超检测,拟找出犬前列腺炎的B超诊断特点,为临床上犬前列腺炎的B超 […]

MBP原核表达及其对树突状细胞表型和功能成熟的影响 02月05日

【摘要】背景和目的麦芽糖结合蛋白(maltosebindingprotein,MBP)是近年发现的免疫佐剂,它可提高重组亚单位疫苗的免疫原性。研究发现,MBP具有广泛的免疫活性,可激活NK细胞、巨噬细胞和Th1细胞;也可通过TLR4活化DC,产生前炎症因子参与免疫。由此提示MBP可作为免疫增强剂,单独作用时也可提高机体免疫应答。DC是功能最强的专职性抗原提呈细胞(antigen-presentin […]