【摘要】异丁醇因其具有高能量密度、高辛烷值、低吸湿性、低混合蒸汽压等优良特性而成为可替代汽油的新一代生物燃料。本研究旨在通过改造大肠杆菌的缬氨酸代谢途径,获得产异丁醇能力佳的工程菌。首先以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,构建异丁醇的合成代谢途径。将2-酮酸脱羧酶基因(kivd)和乙酰乳酸合成酶基因(alsS)分别克隆至质粒载体pCDFDuet的两个启动子下,醇脱氢酶基因(yqhD)和经重叠PCR […]

【摘要】R-3-羟基丁酸(R-3HB)是合成抗生素、生物聚酯、β-多肽等许多重要化合物的关键中间体。随着合成生物学的发展,生物合成R-3HB成为国内外研究热点。本研究在大肠杆菌表达型宿主中构建R-3HB的代谢途径,通过生物合成的方法获得R-3HB。首先克隆和活性表达R-3HB代谢途径中相关的酶基因。通过PCR扩增分别从大肠杆菌基因组、WautersiaeutrophaH16基因组获得tesB基因、 […]

【摘要】贝壳杉烯氧化酶KO和贝壳杉烯酸氧化酶KAO是赤霉素生物合成过程中重要的限速酶,近几年来,越来越多的物种对这两种编码酶基因进行克隆和功能验证,如拟南芥、水稻、小立碗藓等,但柑橘中研究甚微。为了研究并验证柑橘中这两种酶功能,本研究分离了纽荷尔脐橙的内-贝壳杉烯氧化酶CsKO、内-贝壳杉烯酸氧化酶KAO和其自身的NADPH-细胞色素还原酶CsCPR,通过利用毕赤酵母X-33共表达的方式来验证这两 […]

【摘要】辅酶Q10是线粒体呼吸链中重要的递氢体,是细胞自身产生的天然抗氧化剂,在氧化磷酸化中起着重要的作用,因此辅酶Qi0广泛应用于医药、化妆品行业。本文分别以大肠杆菌(Escherichiacoli)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomycespombe)和根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefacients)为研究对象,对代谢调控与基因工程法生产辅酶Q10进行了研究。在大肠 […]

【摘要】目的前列腺癌是欧美等发达国家和地区最常见的男性恶性肿瘤之一，其死亡率已居各种癌症的第二位。前列腺癌的发生是多种调控因子共同作用的结果，然而前列腺癌的发生机制至今尚未明确。那么如何寻找治疗前列腺癌的有效靶点成为了亟待解决的问题。随着生物大规模分型技术的发展使全基因组范围寻找前列腺癌风险靶点成为可能，如单核苷酸多态性（SingleNucleotidePolymorphism,SNP）位点分型。 […]